食用菌母种的分离 ppt课件

菌柄与菌盖交界处取组织块
用解剖刀或鲜剖剪蘸酒精进行火焰消毒，冷却后把自己消毒 的种菇纵切开，然后用菌盖笔菌柄交界处，切取长宽的 0.3~0.5厘米的菌肉组织块，用接种针移到斜面培养基上，置 24℃恒温箱中培养。
检查筛选
每天检查试管斜面菌落生长情况，如从分离的菌肉组织块上 长出正常的白色菌丝，即分离成功，及时将生长出来的菌丝 转移新的试管斜面。若在组织块附近或其他地方出现其他颜 色杂菌生长应予以淘汰。
实验方法
种菇选择：
在出菇场要选择肉厚肥大、鲜嫩，出菇早、菇形 整齐、菌柄短且无病害的做种。
表面消毒：
将种菇表面用清水冲洗干净，放在接种箱（或无 菌室内）进行表面消毒。用镊子将种菇放在培养 皿内，用另一反镊子夹75%酒精棉球（或0.1%升 汞棉球）对种菇进行表面消毒，然后移入另一培 养皿内再用无菌水反复洗涤三次，洗净残留的消 毒剂。
1、母种的保藏 母种量少，一般保藏于冰箱里。
2、原种与栽培种的保藏 培养好的原种栽培种， 如不能马上使用，可保藏于冰箱里。但也以保藏于 阴凉、干燥、干净的保藏室里。室温10-200C。温 度低，保藏时间长些；温度高，保藏时间短些。保 藏室的温度不宜低于00C，也不能高于200C。
3、菌种检验 菌种的品种和质量都直接影响食用 菌的产量和质量。因此，质量检验工作十分重要， 一般从形、色、味、状五个方面进行检验。
食用菌母种的分离制备
一、母种培养基的制备及接种培养
（一）母种培养基制作：
1.用具、设备： 手提消毒灭菌锅、铝锅、试管、电
炉、棉花、漏斗、PH试纸、接种箱或超 净工作台、培养箱等。
精品资料
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5.培养基的灭菌
通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭 菌法以达到灭菌的目的。高压灭菌2小时或常 压灭菌于100℃维持8-10小时，灭菌后培养基 最好放在适温下，空白培养5-7天，以检查培 养基灭菌的效果。如在此期间没有出现任何 杂菌，说明灭菌效果良好。待其冷却30℃以 下可接种。
三、栽培种培养基的制备及接种培养
孢子收集器示意图
3、母种转管接种与培养。
母种的接种必须在严格的无菌条件下进行。 否则将会造成严重污染，给生产造成造成巨大损失。 然后将所有试管及接种器具放入接种箱里进行消毒 灭菌，力求灭菌彻底。在点燃酒精灯火焰上进行操 作，将菌种试管和接种用斜面培养基放在火焰旁。 拨去棉塞，把消毒灭菌的接种针伸入菌种试管内， 挑小块菌种放入斜面培养基中（见下图）
斜面试管转管接种
二、原种培养基的制备及接种培养
（一）、原种常用培养基制作：
1.用具、设备： 高压蒸汽灭菌锅或常压蒸汽灭菌锅；铝锅、 电炉；拌料机；装袋机；无菌室、接种箱 或超净工作台；培养箱或培养室等。
2.培养基配方：
① 木屑培养基：木屑78%，麸皮或米糠 20%，石膏1%，糖1%，水适量。适用于培养 平菇、木耳、香菇、猴头。
②.去皮马铃薯100克，玉米粉30克，葡萄糖20 克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二 钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克，水1000亳 升，PH值自然。
③.去皮马铃薯100克，玉米粉15克，麸皮15克， 葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克， 磷酸氢二钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克， 水1000亳升，PH值自然。
“不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨， 没有学问无颜见爹娘 ……”
“太阳当空照，花儿对薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克， 磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二钾0.1克，硫酸镁 0.5克，蛋白胨2克，水1000亳升，PH值自然 （也可根据不同食用菌品种进行调节，如草 菇PH值7.5-8）。
3.工艺流程：
称量→煮制→分装→灭菌 → 排斜面→无菌检验
培养基的分装及排斜面示意图
（二）、母种的接种与培养
1．组织分离法制母种（无性繁殖） 将子实体、菌核、菌索等一小块组织放
于斜面培养基上，使其萌发为纯菌丝的方法， 称为组织分离。该法具有简便、易成功、能 保持原菌种性状等优点，但重复多，易退化， 应与孢子分离交替进行。组织分离法适用于 绝大多数食用菌
纯化培养
将菌丝块移入PDA平板培养 若纯：四周辐射状生长，外缘整齐一致 否则：边缘参差不齐，色素分布不均匀 将较一致的菌丝的前端，切割→新培养皿
菌肉组织分离示意图
菌核组织分离示意图
2．孢子分离法（有性繁殖） 孢子分离有单孢分离和多孢分离两种方
法。单孢分离由于技术难度大，主要用于杂 交育种的研究，生产上较少采用，一般采用 多孢分离法。
② 棉子壳培养基：棉子壳99.5%，石膏 0.3%，水适量。适用于培养平菇、猴头、金 针菇、鸡腿菇。
3.培养料的配制 ⑴ 木屑、棉籽壳培养料的拌料配制
木屑、棉籽壳培养料按配方称量后，堆制 混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水 中再拌入。拌料时要控制料的含水量在60﹪ 左右 。
⑵ 谷粒培养料的配制
栽培种是直接用于生产的菌种。生产种 的优劣，对产量有着直接的影响。栽培种的 培养基和接种方法，基本上和原种相同。栽 培种是用培养好的原种进行扩大接种的。
栽培种制作示意图
四、菌种质量 优质菌种是食用菌栽培成功的重要保证。
因此，在食用菌栽培中，既要了解各类菌种 的贮藏保管方法，又要能正确选用菌种，识 别菌种的真假与优劣。
谷粒因其营养较丰富，制作的菌种具有菌 丝萌发早、吃料快、抗衰老能力强、产量高 等优点，在生产中应用较多。一般是采用浸 泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。
4.装袋或装瓶 将培养料拌匀装入菌种瓶（或袋）内、
装料松紧适宜，上下一致，装料高度以齐瓶 （袋）肩为宜。然后用锥形木棒在瓶的中央 向下插一个小洞，塞上棉塞。装好的料瓶 （袋）要当天灭菌，以免培养料发霉变质。