蜡样芽孢杆菌检测方法研究进展

特 别 是 能 够 引 起 人 畜 肠 道 疾 病 ，导 致 腹 泻 型 或 呕 吐 型 食 物 中毒 。快 速 准 确 检 测 蜡 样 芽 孢 杆 菌 是 控 制 其 污 染 和感 染
后 治 疗 的 关 键 环 节 。作 者 对 蜡 样 芽 孢 杆 菌 的 检测 方法 进行 了 全 面详 细 的 总 结 ，主 要 包 括 传ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ统 检 测 方 法 、普 通 ＰＣＲ、
病 原 及 其 致 病 力 。 总 的来 说 ，蜡 样 芽 孢 杆 菌 对 人 畜 的健 康 安 全 均 构 成 了 威 胁 ，快 速 准 确 地 检 测 能 有 效 辅 助 治 疗 和
提 前 预 防 ，作 者 将 主 要 检 测 方 法 进 行 了 总结 ，希 望 能 有 助 于 全 面 准 确 地 评 估 蜡 样 芽 孢 杆 菌 的风 险 ，为 主 动 监 测 和 预
ＨＵＡＮＧ Ｊｉｎｇｊｉｎｇ ， ＬＵＯ Ｊｉｎｇ ， ＨＥ Ｈｏｎｇｘｕａｎ （１． Ｋｅｙ Ｌａｂｏｃａｔｏｒｙ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｚｏｏｌｏｇｙ，
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａ ｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１０１， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１０１， Ｃｈｉｎａ）
多 重 ＰＣＲ（ｍＰＣＲ）、实 时荧 光 定 量 ＰＣＲ（Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ）、叠 氮 溴 化 丙 锭一 定 量 ＰＣＲ（ＰＭＡ－ｑＰＣＲ）、微 滴 数 字 ＰＣＲ
技 术 （ｄｄＰＣＲ）、环 介 导 等 温 扩 增 （ＬＡＭＰ）及 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 （ＥＬＩｓＡ）。从 传 统 方 法 到 新 兴 技 术 ，涉 及 传 统 检 测
技 术 、分 子 生 物 学 检 测 和免 疫 学 检 测 技 术 ，作 者 主要 总 结 了各 方 法 的 原 理 、检 测 范 围 ，并 对 各 方 法 的 优 缺 点 进 行 了
比较 。 这些 检测 方 法 的 灵 敏 度 、精 确 度 、样 本 要 求 等 有 所 不 同 ，可 根 据 检 测 需 要 和 条 件 限 制 进 行 选 择 。 将 分 子 生 物
中 国 畜 牧 兽 医 ２０１８，４５（３）：６３５—６４２ Ｃｈｉｎａ Ａｎｉｍａｌ Ｈ ｕｓｂａｎｄｒｙ ＆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃｉｎｅ
蜡 样 芽 孢 杆 菌 检 测 方 法 研 究 进 展
黄 晶菁 。，罗 静 ，何 宏轩
（１．中 国 科 学 院 动 物 研 究 所 ，动 物 生 态 与 保 护 生 物 学 重 点 实 验 室 ，北 京 １００１０１； ２．中 国科 学 院大 学 生 命 科 学 学 院 ，北 京 １００１０１）
警 提 供 科 学 依 据 。
关 键 词 ：蜡 样 芽 孢 杆 菌 ；检 测 ；食 物 中 毒
中 图 分 类 号 ：￥８５２．６１ ６
文 献 标 识 码 ：Ａ
文 章 编 号 ：１６７１－７２３６（２０１８）０３—０６３５—０８
Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｍ ｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ
摘 要 ：蜡 样 芽 孢 杆 菌是 一 种 可 引 起 食 物 中毒 的 常 见 食 源 性 细 菌 ，属 于 革 兰 氏 阳 性 的 条 件 致 病 菌 ，广 泛 存 在 于 土
壤 、空 气 、水 及 植 物 源 、动 物 源 加 工 的 食 品 中 。近 年 发 现 也 能 感 染 包 括 人 在 内 的 多 种 动 物 ，是 一 种 人 兽 共 患 性 细 菌 ，
学 方 法 和 免疫 学 等 方 法 有 效 地 结 合 起 来 ，多 角 度 多 层 次 地 对 样 品 进 行 检 测 ，可 全 面 而 准 确 地 呈 现 检 测 结 果 。蜡 样
芽 孢 杆 菌 能 产 生 多 种 毒 素 ，这 些 毒 素 决 定 了其 致 病 性 ，所 以除 了 检 测 菌 体 外 ，还 可 以 对 毒 素 进 行 检 测 ，有 助 于 确 定
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ｉｓ ａ ｃｏｍ ｍｏｎ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｃａｕｓｉｎｇ ｆｏｏｄ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ，ｇｒａｍ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｏｐｐｏｒｔｕｎ— ｉｓｔｉｃ ｐａｔｈｏｇｅｎ，ａｎｄ ｗ ｉｄｅｌｙ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｎｇ ｉｎ ｓｏｉｌ，ｗ ａｔｅｒ ａｎｄ ａｌｌ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｆｏｏｄ．Ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ａｌｓｏ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ａ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ａｎｉｍ ａｌｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｐｅｏｐｌｅ ａｓ ａ ｚｏｏｎｏｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ．Ｉｔ ｇｉｖｅｓ ｒｉｓｅ ｔｏ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｄｉｓｅａｓｅ，ｗｈｉｃｈ ｌｅａｄｉｎｇ ｔｏ ｄｉａｒｒｈｏｅａｌ ｏｒ ｅｍｅｔｉｃ ｔｙｐｅ ｏｆ ｆｏｏｄ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ． Ｔｈｕｓ，ａ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｉＳ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ ｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍ ｅｎｔ。Ｔ ｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ａ ｃｏｍ ｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ａｎｄ ｄｅｔａｉｌｅｄ ｓｕｍｍ ａｒｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍ ｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅ— Ｋｅｕｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａＩ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｉ ＰＣＲ ，ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＰＣＲ ，Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ ，ｐｒｏｐｉｄｉ— ｕｍ ｍ ｏｎｏａｚｉｄｅ—ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ ，ｄｒｏｐｌｅｔ ｄｉｇｉｔａｌ ＰＣＲ ，ｒｉｎｇ—ｍ ｅｄｉａｔｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒｍ ａｌ ａｍ ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｔｅｃｈ— ｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｅｎｚｙｍ ｅ—ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍ ｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ （ＥＬＩＳＡ ）．Ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍ ｅｔｈｏｄ ｔｏ ｔｈｅ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｔｈｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍ ｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ ａｕｔｈｏｒｓ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ ｔｈｅ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ，ｒａｎｇｅ ａｎｄ ｔｈｅ ａｄｖａｎ一