防臭鞋垫的抗菌性能评价

防臭鞋垫的抗菌性能评价

董海燕

(福建省纤维检验所，福州，350026)

[摘要] 目的评价防臭鞋垫的抗菌性能方法采用琼脂平皿扩散法，通过计算抑菌带宽度，对防臭鞋垫的抗菌效果做出定性评价；进一步采用振荡法，在温度24℃±1℃、恒温振荡器转速150r/min条件下，将防臭鞋垫与细菌在70mL的PBS中作用18h，通过平板计数法计算抑菌率，对防臭鞋垫做出定量评价。结果防臭鞋垫对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌带宽度均＞1mm，其抑菌率分别为97.4%、91.7%。结论防臭鞋垫具有很强的抗菌性能

[关键词] 防臭鞋垫；抗菌性；抑菌带宽；抑菌率

Evaluation for antibacterial property of deodorant insoles

DONG Hai-yan

( Fujian Provincial Fiber Inspection Institute 350026, China)

[Abstract] Objective To evaluate the antibacterial property of deodorant insoles. Methods Agar diffusion plate method was used. Bacteriostasis bandwidth was calculated and the antiba -cterial property was evaluated on the level of qualitation. Shake-flask method was used at 24℃ and 150r/min rotational speed of conatant temperature oscillator. The deodorant insoles and bacteria acted for 18h in PBS liquid. The bacteriostasis rate was calculated and the antibacterial property was evaluated through colony counting method on the level of quantitat -ion Results Bacteriostasis bandwidth was＞1mm，and Bacteriostasis band Bacteriostasis rate was 90.5% and 96.7% to coliform and staphlococcus，respectively. Conclustion The deodorant insoles has good antibacterial property

[Key words] Deodorant insoles; Antibacterial property; Bacteriostasis bandwidth; Bacteriostasis rate 防臭鞋垫具有抗菌、除臭等多项医疗保健功效。一般采用夹层中药或特殊天然材料，经独特配方精制而成对脚气、脚痒等有特效。防臭鞋垫主要目的是在穿着状态下抑制以汗和污物为营养源的微生物的繁殖，保持卫生状态，其作为一种功能性鞋垫，目前已经投入市场并被消费者认可[1]。本文采用琼脂平皿扩散法和振荡法，从微生物学角度对防臭鞋垫的抗菌性能进行定性和定量评价。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1 实验材料：防臭鞋垫，购自重庆恒仁商贸有限公司。

1.1.2 实验菌种：大肠埃希氏菌（8099）、金黄色葡萄球菌（ATCC 6538），均购自广东环凯微生物科技有限公司。

1.1.3 药品和试剂：各种培养基，均购自广东环凯微生物科技有限公司；PBS（磷酸盐）缓冲液、洗脱液（洗脱试样活菌用生理盐水），均由本室配制；吐温-80、氯化钠等均为分析纯1.1.4仪器和设备：ZSD-1270型生化培养箱，上海智城分析仪器制造有限公司；BHC-1300ⅡA

型生物洁净安全柜，苏州净化设备有限公司；ZHWY-100B型恒温振荡器，上海智城分析仪/B

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器制造有限公司；Nikon-YS100型显微镜，南京江南永新光学有限公司。

1.2定性方法[2]

1.2.1 菌液制备：复苏后的菌种传代2～3次，培养物划线接种到琼脂培养基平皿上，37℃培养24h，挑去单菌落接种于新鲜营养肉汤中，在37℃、振频110 r/min条件下，培养18～24 h，通过分光光度计方法，将菌液浓度控制至(1.0～5.0)×108 CFU/mL。

1.2.2 试样制备：从鞋垫上选取有代表性的试样，剪成圆形，直径为25mm±5mm，共取8块，每种菌实验4块（正面2块，反面2块）。同时，取1块与试样材质相同但未经抗菌处理的材料作为对照样，尺寸与试样相同。

1.2.3抗菌实验：采用平皿琼脂扩散法。向无菌平皿中倾倒10mL琼脂培养基，待冷却凝固。取45℃的琼脂培养基150mL，加入1mL实验菌液，充分混匀，向上述平皿中倾倒5mL，并使其凝固。用无菌镊子将试样和对照样分别放于平皿中央，均匀按压，直至试样与培养基接触良好。立即将平皿放入37℃的培养箱中培养18h～24h。

1.2.4抑菌带宽计算：采用公式：H=（D-d）/2，其中H为抑菌带宽度，D为抑菌带外径的平均值，d为试样直径。测定抑菌带后，用显微镜检查试样下面接触区域的细菌繁殖情况。凡H ＞1mm，并且试样下面无细菌繁殖，即可认定改样品具有良好的抑菌效果。

1.3定量方法[3]

1.2.1 菌液制备：复苏后的菌种传代2～3次，培养物划线接种到琼脂培养基平皿上，37℃培养24h，挑去单菌落接种于新鲜营养肉汤中，在37℃、振频130 r/min条件下，培养18～20 h，通过分光光度计方法测定，菌液浓度应该达到(1.0～5.0)×109CFU/mL。按照十进制稀释法，将菌液用PBS缓冲液稀释至(3.0～4.0)×105CFU/mL。

1.2.2 试样制备：将试样剪成0.5cm大小的碎片(1.0～5.0)×109CFU/mL，称取0.75g±0.0