药物的质量研究(综合整理)-20130329

药物的质量研究（专业知识）

2013.3.29

前言：

以下内容的参考依据：

1、中国药典2005、2010年版二部附录XIXA 药品质量标准分析方法验证指导原则

2、化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则

3、化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则

4、审评中心电子刊物

5、以前的工作经验积累等。

部分知识点、考察面尚在不断完善中，我们要注意及时关注国家局政策动态，学习新知识，提高研发技术能力。

质量研究的一般内容

1.性状

2.鉴别

3.检查

4、含量测定

1 性状

性状项下有很多内容，外观、色泽、臭、味、结晶性、引湿性等。性状描述要准确，注意对颜色的描述，不能模棱两可。比如某药品标准规定“本品为白色或类白色粉末或结晶性粉末”，结果应根据实际情况写为下面几种情况：（1）本品为白色粉末；（2）本品为类白色粉末；（3）本品为白色结晶性粉末；（4）本品为类白色结晶性粉末。不能直接写为：本品为白色或类白色粉末或结晶性粉末。

2 鉴别

常用的方法有化学反应法、色谱法和光谱法等。注意要考察专属性。

2.1 化学反应法：主要原理是选择官能团专属的化学反应进行鉴别。包括显色反应、沉淀反应、盐类的离子反应等。

2.2 色谱法：主要包括气相（GC）、液相（HPLC）、薄层（TLC）等。

2.3 光谱法：红外吸收光谱法（IR）和紫外-可见吸收光谱法（UV）。

3 检查

检查项下内容比较多。

原料药主要包括一般杂质（氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐、炽灼残渣等）、有关物质、残留溶剂、晶型、溶液的澄清度与颜色、干燥失重或水分、比旋光度、异构体等。

制剂需进行的检查项目，除应符合相应的制剂通则中的共性规定外，还应根据其特性、工艺及稳定性考察结果，制订其他的检查项目。如口服片剂、胶囊剂一般还应进行溶出度、有关物质等检查；缓控释制剂、肠溶制剂、透皮吸收制剂等应进行释放度检查；小剂量制剂（主药含量低）应进行含量均匀度检查；注射剂应进行pH值、溶液的颜色、不溶性微粒、可见异物、细菌内毒素或热原、无菌、有关物质等检查，注射用粉末还应检查干燥失重或水分等。

注：含量均匀度检查，2010版药典有新规定，更加严格：

除另有规定外，片剂、硬胶囊剂或注射用无菌粉末，每片（个）标示量不大于25mg 或主药含量不大于每片（个）重量25%者；内容物非均一溶液的软胶囊、单剂量包装的口服混悬液、透皮贴剂、吸入剂和栓剂，均应检查含量均匀度。

3.1 有关物质

分已知杂质和未知杂质。未知杂质的限度检查，一般情况下采用不加校正因子的主成分自身对照法来进行。对照溶液一般选择1%浓度，有时也会选择2%、5%等浓度，对杂质限度要求低的则可能选择更低浓度，如0.1%、0.2%、0.5%等，以实际品种而定。对于已知杂质的定量检查，要像含量测定一样进行详细的方法学验证（后面详细介绍）。

下面介绍一下HPLC法研究的一般流程。

3.1.1 色谱条件的确定

先进行波谱扫描，确定检测波长。

已有国家标准的药品，应先以标准上的方法进行试验，如试验不出，可参考其他文献进行流动相选择试验（通常主峰保留时间6～10min最佳）。应注明所用色谱柱、流速、柱温、进样体积等信息。

3.1.2 耐用性

典型的变动因素包括：液相色谱法中流动相的组成、流速和pH值、不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱、柱温等。

一般：流动相比例变化±5%、pH变化±0.2、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化±20%以及三根不同色谱柱进行测定。经试验，应说明小的变动能否符合系统适用性试验要求，以确保方法有效。

3.1.3 系统适用性试验

有的项目标准中未明确说明溶液的制备，则直接用供试品溶液；有的项目标准中规定了系统适用性溶液的配制，比如各种条件下的破坏溶液，比如主药与其他物质（包括杂质与非杂质）的混合溶液，考察指标有分离度、理论板数、拖尾因子、保留时间、相对保留时间等。除另有规定外，分离度不得小于1.5；峰高法定量时，拖尾因子应在0.95~1.05，峰面积法测定时，拖尾因子无明确规定，若拖尾严重，将影响峰面积的积分，应以线性关系合格为判定依据。主峰的理论板数应符合质量标准的规定。

3.1.4 专属性试验

（1）空白溶剂

（2）空白辅料（制剂）

（3）破坏试验

试验内容：未破坏样品、酸破坏、碱破坏、高温破坏、光照破坏、氧化破坏。制剂应同时做空白辅料的破坏试验，保证辅料不影响主峰的测定。试验时间应长一些，比如标准规定至主成分峰保留时间的3倍，我们试验应至少作到4倍。

结论应说明本品主峰与各种破坏条件下产生的降解产物峰分离完全，本法专属性良好。然后说明样品及破坏后的样品在……分钟之后无明显杂质峰出现，色谱图

记录时间设定为主成分峰保留时间的……倍。

破坏程度：一般要求主峰降解5~20%，10%左右是比较理想的。应考察主峰纯度及物料平衡情况（建议列表说明）。

关于这一点，下列情况可能会被发补：

（1）如果药物在有的破坏条件下都不降解，会被要求加剧破坏条件，如果仍不降解，要求提供合理的解释。

（2）如果降解程度过大，会被要求采用缓和的破坏条件重复实验。

（3）如果主峰明显降解，检测到的杂质却很低，说明检测方法不合适，会被要求建立专属性强的方法。

3.1.5 检测限试验

取对照品适量，用溶剂作一系列稀释，按拟定的色谱条件进样，记录色谱图。以信噪比约为3:1或2:1时的进样量为检测限。

3.1.6 溶液稳定性试验；

一般做0、2、4、6、8h下的溶液稳定性（或更长时间）。按各品种项下规定，取0h下的自身对照溶液作为所有时间点的对照溶液，若不稳定，可做2h内的溶液稳定性（常温或低温，以实际情况而定）。

可接受的标准为：主成分的含量变化的绝对值应不大于2.0%，杂质含量的变化在±0.1%以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质。溶液不稳定的，须注明“临用新制”。

何为"报告限度"？

《化学药物杂质研究的技术指导原则》中有定义，报告限度（Reporting Threshold）：超出此限度的杂质均应在检测报告中报告，并应报告具体的检测数据。

原料药的杂质限度

最大日剂量：≤2.0g，0.05%

最大日剂量：＞2.0g，0.03%

制剂的杂质限度

最大日剂量：≤1.0g，0.1%