实验一 农药残留检测

实验一农药残留的检测（酶抑制法）
一．概要
有机磷和氨基甲酸酯类农药中存在着部分高毒和剧毒品种，如甲胺磷、对硫磷、涕灭威、克百威、水胺硫磷等，如果被施用于生长期较短、连续采收的蔬菜，则很难避免因残留量超标而导致人畜中毒。

农药进入粮食、蔬菜、水果、鱼、虾、肉、蛋、奶中，造成食物污染，危害人体健康。

二．实验原理
在一定条件下，有机磷与氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药浓度成正比。

在正常条件下，胆碱酯酶可催化底物（乙酰胆碱）水解，水解产物可与显色剂进行显色反应，产生黄色产物。

可在412nm下检测吸光度的变化值，计算出抑制率，通过抑制率判断农药残留是否超标。

三．实验材料、仪器与试剂
（一）材料：果蔬样品
（二）仪器：农药残留快速检测仪(中检维康icheck101)、电子天平、水浴箱、样品杯、比色皿、移液枪、10ml离心管
（三）试剂：农药残留快速检测试剂盒（缓冲液、显色剂、底物、胆碱酯酶）
四．实验步骤
对照实验：向离心管中加入2.5ml缓冲液，再加入100ul酶、100ul显色剂，37℃水浴10分钟后（设置仪器的相关选项），加入底物100ul，迅速倒入比色皿，放入任一通道。

测得吸光度为ΔA0。

样品前处理：取2g（±0.1）果蔬制品（剪成1cm大小）于样品杯中，加入10ml缓冲液，摇2min，待用。

样品检测：取2.5ml样品液于离心管中，加入100ul酶、100ul显色剂，37℃水浴10min 后（设置仪器相关选项），加入底物100ul，迅速导入比色皿，放入设置好参数的通道中。

测得吸光度为ΔA t。

五．计算
）/ΔA0}×100%
抑制率：{（ΔA0﹣ΔA
t
式中:ΔA0----对照组反应3min吸光度的变化值
ΔA t----样品组反应3min吸光度的变化值
六．限量标准
GB/T5009.199 2003中规定抑制率≦50%为合格
七．注意事项及实验反思
1.取样时注意均匀取样
2.注意移液枪的使用，熟练掌握移液枪的量程
3.利用实验中的等待时间设置仪器中检测的样品信息
4.运用不同的实验仪器进行农药残留实验，尽快熟练农药残留的检测，脱离说明书进行操作。