医学细胞生物学实验_PPT幻灯片

【实验步骤】
A. DNA和RNA的定位
制备蛙血涂片1张，晾干。 固定：70％乙醇固定5min。 染色：滴1d甲基绿-哌洛宁染液染色5-10min，
水冲洗后在纯丙酮中分化处理2-3s。 观察绘图
【实验步骤】
B. 血细胞计数
制备蛙血细胞悬液，稀释400-600× 熟悉血细胞计数板，找到计数室和计数区域 盖玻片盖在计数板槽上，吸取1d血细胞悬液滴在盖
【实验目的】
了解光镜下细胞器的形态和分布 掌握超活染色法制作光镜标本的基本方法
【实验原理】
活体染色是能使活的细胞或组织着色且无毒害的一种 染色方法。可用于研究生活状态下的细胞形态结构和 生理或病理变化。
活体染色分为体内活染和体外活染（超活染色）。
活体染料被特异性地固定和堆积在细胞内某种细胞器 上而显色。
【实验目的】
• 了解普通光学显微镜的构造及原 理，熟练掌握其操作方法；
• 掌握光镜下多种细胞的形态和结 构特征
【实验原理】
• 显微镜种类：
• 显微镜的组成系统：光学、机械、 电子。
• 普通光镜的光学系统：物镜、目镜、 聚光器、光阑等。
• 普通光镜的机械系统：镜筒、镜臂、 物镜转换器、调焦螺旋（粗调和细 调）、载物台、镜座等
核酸分为DNA和RNA，呈酸性, 可与碱性染料 反应而显色和定位。由于两类核酸分子聚合程 度不同，对不同的碱性染料亲和力不同，甲基 绿-哌洛宁染料的两种组分分别对DNA和RNA 有高亲和力，并分别将二者染成蓝绿色和红色。
【实验原理】
B. 细胞计数
血细胞计数板包括2个计数室，每个计数室有9个 大格，每大格的体积为0.1mm3，计数4大格内（4 个角）的细胞数，根据每大格的体积和细胞悬液 的稀释倍数即可算出细胞密度。
颗粒白细胞 嗜中性颗粒白细胞；嗜酸性颗粒白细胞；嗜碱性颗粒白 细胞
无颗粒白细胞 淋巴细胞；单核细胞
血小板
【作业】 绘图：各种细胞的形态结构，并标示出 细胞的各部分
实验报告要求：
实验名称： 实验目的： 实验原理： 实验步骤： 实验结果和分析：
实验二 线粒体的超活染色 和细胞显微结构的观察
詹纳斯绿B是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线 粒体进行超活染色。其原理是由于线粒体内细胞色素 氧化酶系的作用，使JGB保持氧化状态，呈亮绿色； 而周围的细胞质中染料被还原为无色的色基。
【实验步骤】
A. 线粒体的超活染色与观察 用牙签刮取口腔颊部粘膜的上皮细胞，在洁净的载玻
片上与1d JGB染液混匀，染色15min以上。 盖上盖玻片，光镜下观察线粒体的形态和分布。 B. 线粒体标本的观察 小鼠肝脏切片 C. 高尔基复合体标本的观察 兔脊神经节切片
【作业】
绘图：人口腔上皮细胞（显示线粒体） 小鼠肝细胞（显示线粒体） 兔脊神经节细胞（显示高尔基体）
光镜下高尔基复合体
实验三 细胞内核酸的定位 和细胞计数
【实验目的】
掌握细胞化学技术定位细胞组分的一般方法； 掌握细胞内核酸的分布特点； 掌握活细胞计数的方法。
【实验原理】
A. 细胞化学染色与DNA和RNA的定位
• 动物各种不同组织的细胞具有不同 的形态大小等特征
Leabharlann Baidu实验步骤】
B：操作练习：
1）血细胞涂片的观察：观察血细胞的组成
2）不同细胞的形态观察：分别观察肠上皮细胞、骨骼 肌细胞、肝细胞切片和神经细胞等，注意比较鉴别细 胞的形态结构、核形态数量和位置等特征。
红细胞 淡红色，无核的圆形细胞，双凹形，边缘部分染色较深， 中心较浅，直径7-8微米
玻片外侧边缘，使其渗入计数室 10×物镜下计数（四角的4大格） 细胞密度换算： 细胞数/ml=4大格细胞数/4 ×10000×稀释倍数
【作业】
绘图：核酸的细胞 内定位 细胞计数结果和密 度换算