肝脏中酮体的生成与利用-11月11

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肝中酮体的生成作用
• 实验目的
• 熟悉肝脏中酮体的测定原理与操作方法
• 实验原理
• 本实验以丁酸作为底物分别与新鲜肝、肌肉匀浆 保温,以证明酮体只能在肝组织中生成。酮体中 的乙酰乙酸在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠作 用生成紫色化合物。
器材与试剂
1.器材 试管及试管架、剪刀、恒温水浴箱、匀浆器、研钵 2.试剂 (1)肝匀浆和肌肉匀浆。 (2)0.9%NaCl溶液。
混匀 37℃水浴保温45min 显色粉 (勺) 1 1 1Βιβλιοθήκη Baidu1
各管充分混匀后、倾斜试管,沿试管壁分别加入0.4N的 NaOH 1ml,静止5min后,观察各管液体接触面颜色并分 析比较。
对照反应结果
强阳性------立即显现深紫色环
阳性------立即显现紫色环
弱阳性------5min内出现紫色环 阴性------始终不出现紫色环
(3)0.5mol/L丁酸: (4)1/15mol/L磷酸缓冲液(pH7.5)。
(5)显色粉:亚硝基铁氰化钠0.5g、无水碳酸钠10g,硫酸铵220g,混合后研 碎。
实验操作
试剂 磷酸盐 缓冲液 0.5mol/L 丁酸溶液 肝匀浆 (ml) 肌匀浆 (ml) 1号管 2ml 3ml --------2号管 2ml 3ml 1ml ----3号管 2ml 3ml ----1ml 4号管 2ml --------1ml
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