高效液相色谱操作步骤PPT课件

快速
排气 2：按下阀泵前面的“排气”键
排气5min后拧紧快速排气阀
4：用一次性平 头微量注射器 吸入1~2ml的样 品溶液，注入 手动进样阀的 进样口
一次性平头 微量注射器
色谱工作站
排 气
• 作用：平衡活化色谱柱并清除管路中的质和残留的水分。
• 步骤：分析样品前先用甲醇或乙腈冲洗流路20min~30min
分析速度快等。
拧紧色谱柱的接口
四：放置流动相
• 1：将储存流动相的贮液瓶放置 于贮液瓶架上
• 2：更换仪器泵头里清洗瓶中的
超纯水（以确保仪器外回路系 统清洁和良好的工作状态）
清 洗 瓶
六：系统排气
• 3：进入色谱工作站，待仪器自检 完成后进行进样系统的清洗
• 1：拧松泵右侧的快速排气阀（两圈 即可）
• 简而言之：根据流动相的不同选择不同的溶液冲洗流路。
•
具体问题具体分析！
八：设定分析方法
• 1：设置程序文件（流动相通道、 流速、比例、检测器检测波长、分 析时间、最高压力、最低压力）
• 2：设定分析方法的方法文件（文 件名称，表示浓度的单位）
• 3：设定样品分析表（标准名称、 测定次数、样品名称、编号）
如果流动相为有机相和纯水相的混合液，在用甲醇或乙
腈冲洗流路后，按照分析样本的需要调节比例阀的比例，冲洗 流路约20min；
如果流动相含有缓冲盐溶液、有机酸、无机酸或其他电
解质，则应该用与分析样品流动相中缓冲盐溶液或有机酸、无
机酸、其他电解质与有机相相同比例的水加有机相冲洗流路约 20min以上，再按照分析样品的需要调节有机相与缓冲溶液等 的比例冲洗流路约20min，平衡进样环境。
的样品溶液，用一次性注射器和 一次性滤头过滤后，加入2ml具塞 试管中备用。
一次性滤头：由机系 、水系组成； 滤膜的
三：色谱柱的连接
将色谱柱按流动相流动 方向即色谱柱标示箭头
方向安装在仪器上
色谱是一种分离分 析手段，分离是核 心，因此担负分离 作用的色谱柱是色 谱系统的心脏。对 色谱柱的要求是柱 效高、选择性好，
• 3.食品质量分析：农药残留，兽药残留；防腐剂、抗氧化剂、人工合成 色素等食品添加剂的分离与测定，保健食品中的功效成分检测，真菌毒 素分析等
前
后
1、溶剂
（流动 2、相输）
4真液、空脱气系柱机 温3统、箱手 动（（进色四样 谱元器柱泵 检固相5器，）、测定）
高效液相色谱分析仪的 型号、外形因生产厂家 的不同而有较大的差异 。各型号仪器配有相应
• 2：顺时针旋转六通阀，仪器开 始进行分析 顺时针旋转
• 1：根据样品的出峰时间定性 • 2：根据样品的峰面定量 （在一定的色谱操作条件下，流入检测器的待测组分的含量、质量或
浓度与检测器的响应信号：峰面积或峰高成正比。）
色 谱 图 示 例
• 4：待进样环境平衡后，打开检测器的 氘灯，检测器开始自检和教正，进行 基线检测，待基线平稳后进样分析。
打开检测器的氘灯
简而言之：软件的各种设置；繁杂但不复杂
九：进样分析
• 1：启动设置程序文件、设定分 析方法的方法文件、设定样品分 析表按照样品分析表的顺序，用 平头微量注射器将经过0.45um滤 膜过滤的标准溶液和样品溶液逐 次注入六通进样阀中，
高效液相色谱仪的应用
• 1.环境污染物分析：大气、水、土壤和食品中的多环芳烃、多环联苯， 阴离子表面活性剂，有机氯农药、有机磷农药，除草剂，酚类胺类、黄 曲霉毒素等污染物的分离与测定。
• 2.精细化工 ：在精细化工生产中使用的具有较高分子量和较高沸点的有 机化合物，如高碳数脂肪族或芳香族的醇、剂、药物、农药、燃料、炸 药等工业产品的醛、酮、醚、酸、酯等化工原料，以及各种表面活性分 离与测定。
的数据处理系统。
6、色谱 工作站
一：流动相的配制
• 1：有机溶剂的过滤（使用
• 2：流动相超声脱气
0.45um的一次性水系滤膜过滤） （10~30min）
滤 膜
开关
二：样品处理
• 1：样品过滤（过滤装置：一次 型注射器;一次性滤头）进入高效
液相色谱仪样品液都必须经过样 品过滤装置过滤
• 2:把经过称量、定容、超声处理后