疟疾血片制作课件

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疟原虫血片制作染色精讲33页PPT

疟原虫血片制作染色精讲33页PPT


26、要使整个人生都过得舒适、愉快,这是不可能的,因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭

27、只有把抱怨环境的心情,化为上进的力量,才是成功的保证。——罗曼·罗兰

28、知之者不如好之者,好之者不如乐之者。——孔子

29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
疟原虫血片制作染色精讲
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法, 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现,法律就是这样 一种的 网,触 犯法律 的人, 小的可 以穿网 而过, 大的可 以破网 而出, 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏,庇 护着我 们大家 ;它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿

30、意志是一个强壮的盲人,倚靠在明眼的跛子肩上。—

血片制作 PPT课件

血片制作 PPT课件

2019/9/7
3
血片制作染色与疟原虫计数
血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种:一种是将血液涂
呈薄膜状,称薄血膜;一种是血辅在玻片上面。
发热病人血片 2019/9/7
标本片 4
52006-12-13
取血时机 现症病人一般可随时取血,疟疾普 查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期 疟原虫作标本时,则应掌握适宜的取血时机。
2019/9/7
13
血片的染色 (一)染液的种类及染色原理
染液种类:目前所用的血片染色液,虽然名称 很多,但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液 变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液 两大类,前者包括罗氏、西氏(Simon)、 J.S.B氏染液等,后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染 液中的主要染剂都包含美兰、伊红和由美兰 氧化所成的天青,所以称多色性染剂。
涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为6等分, 第1、2格备贴标签及编号用;厚血膜涂在第3 格中央,薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个; 门诊和发热病人血片每片1人,涂
涂2个厚血膜1个薄血膜,以
标标签签
防血膜脱落而影响检查;
2019/9/7
2
血片制作与染色镜检
2 采血制片 自耳垂或手指采血,厚血膜的血量约为火柴 头大小(4-5mm3),滴在载玻片的1/3处;薄血膜的 血量为其1/4,滴于玻片中央,立即用边缘整齐光滑的推 片与玻片之间成30-40度角平直向前推成薄血膜。再用推 片的一角将厚血滴涂制成直径约0.8-1cm的圆形厚血膜, 厚度以能清晰映出报刊上的铅字为宜。薄片的厚度为镜下 只见一层均匀紧密排列的红细胞为宜。血片涂制好后用 HB铅笔在干燥的薄血膜底部写上受检者的姓名或编号。 对疑为恶性疟者,可用皮肤划痕法刮取渗出的体液作涂片 染色,此法检出率较高,且可查见末梢血液中不常看到的 恶性疟原虫的滋养体和裂殖体。

疟疾血片制作课件

疟疾血片制作课件
血片的制作厚血膜涂片血片的制作厚血膜涂片用推片的一角刮取45微升血量相当于火柴头大小使血滴涂于载玻片的中央偏右处由里向外一个方向旋转2圈涂成直径0810cm的圆形厚血膜血膜厚薄均匀过厚易于脱落过薄达不到检出率的要求厚度以1个油镜视野内可见510个白细胞为宜
血片的制作(材料准备)
1.载玻片:新玻片浸入有液态洗涤剂的清 水中10-20分钟,干净棉巾逐个擦拭, 再用清水冲洗干净,晾干备用。 2. 采血针:一次性 3. 玻片盒:防止污染和昆虫吸食血膜 4. 75%酒精棉球:采血前后消毒 5. 记号笔:玻片上书写号码
血膜染色前的处理
固定薄血膜 血片干燥后,用吸有甲醇的吸管 在薄血膜表面轻轻涂抹,自然干燥。注意固定 时甲醇不要接触厚血膜,否则会影响厚血膜的 溶血。 溶解厚血膜 血片干燥后,用滴管滴水于厚血 膜上,待血膜呈灰白色时,将水倒去,晾干。 (吉姆萨染色:直接)
血膜制作注意事项
1. 清洗玻片,且勿碰撞、磨损 2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内 3. 血膜应自然干燥 ,要充分干燥。
D. 冲洗染液时,水流轻缓,勿冲走厚血膜。
疟疾检测的注意事项
1.同一个病人的血涂片样本要大于等于5张。 2.标本一定要做好标记,上报结果时,一定要 把观察到疟疾病原虫的血涂片标本一起交上来。 3.标本染色时,不要一次把所有标本全部染完, 分批次染,找到最好的血涂片进行观察。
血片的制作(血膜位置)
通常将厚、薄血膜涂在一张载玻片 上。方法是将载片分为 6 等分,第 1 、 2 格备贴标签及编号用;厚血膜涂在第 3 格中央;薄血膜涂在第4格前缘至第6格 中部。
血片的制作(编号)
血膜编号 血膜制成后,立即在玻片面上 写上受检者的号码,以防差错;待 薄血膜干后再用铅笔于薄血膜中写 上受检者的个人编号,依次按顺序 插入标本盒内。

血片制作染色课件

血片制作染色课件

血片的染色
第二步:染色用水和冲洗用水配制
常用中性的蒸馏水或经煮沸过滤的冷开水; 用pH7.0~pH7.2的缓冲液。
血片的染色
第三步:染色

薄血膜经甲醇固定干燥后, 将血片平放

用PH7.0-7.2的磷酸缓冲液 (PBS)或蒸馏水将吉氏原液 稀释;
染色20-30分钟,晾干镜检。

血片的染色
久,颜色偏酸;
染色时间 :染色时间应根据染液的质量、新旧、稀释浓度和气温而适当增减。 冲洗方法:染色后不要直接将染液倒掉,沿玻片及染缸边缘加水使染液表面 益出,并轻轻冲洗,以免染液色素颗粒粘污血膜。
染色质量影响因素
染色稀释用水: PH7.0-7.2清洁水。
用水过酸,可致感 染的RBC上的点彩 染不出来; 用水过碱,则使薄 血膜上的RBC染成 灰蓝色,致使R的 胞浆难以辨论。
厚血膜溶血染色 放臵多时未染色的血 片(2天以上,薄片已 用甲醇固定),在染 色之前,须在厚血膜 上用清水进行溶血, 待血膜全部溶解后倒 掉,用吉氏染液染色, 清水漂洗干净,晾干。
血片的染色
如果血片偏红,说明
标 准
偏 碱
血片制作影响因素
载玻片必须清洁无油污,理想的薄血膜是一层血细胞均匀 分布不重叠、无裂缝、无皱折和空泡,血膜末端呈舌状; 厚血膜厚度以一个油镜视野内可见5-10个白细胞为宜; 血片制作场所要保持清洁,以免尘埃沾污血膜,防止苍蝇 等舔食血膜; 制成的血片在未干前不能倾斜放臵,待其自然干燥,不要 加热,加热会使原虫变形,影响镜检结果.
血片制作
第二步:患者信息的核实
首先要核对患者的姓名、年龄和住址。
非常重要
血片制作
第三步:血样的采集 部位:指尖、耳垂

血片制作染色和血检质量控制培训(PPT 41页)

血片制作染色和血检质量控制培训(PPT 41页)
9
制作血膜的注意事项
3. 血膜让其自然干燥,切忌用太阳晒或 火烤,干透后才能用甲醇固定薄血膜。 夏天标本尽可能24~48小时内固定染色; 冬天也不能超过72小时。放置时间越久, 厚血膜越不易溶血,染色效果也差。若 不能及时染色,膜血膜宜先用甲醇固定 (1~3分钟)然后用过滤清水对厚血膜 溶血,晾干固定后装入盒内盖严,待以 后染色。
浓液混入瓶内,至25毫升甲醇 洗净钵中甘油染液为止,塞紧瓶
3
取血量及涂片法(涂片操作)
薄血膜 取洁净的载玻片2 张,1张平置在桌上,以左 手拇指,食指夹持载玻片 两端(手指切勿接触玻片 表面),用另一张边缘平 滑(最好为磨口边缘)的 载玻片做推片,用推片一 端边缘的中点从取血部分 取约1微升的血量(相当于 1/4火柴头大小),使血 滴与平置的载玻片接触, 并形成25~30度夹角,待 血液向两侧扩展约2厘米长 度时,均匀而迅速地轻轻 向左推出(约2.5厘米 长)。
12
血片的染色 (一)染液的种类及染色原理
染色原理:美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色,必须由天青作为媒介(染媒)才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂,但又 具有染媒作用,使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红,这样,就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色,而较小或菲薄的原 虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
取血方法 采血部位一般人为耳垂,指头, 通常在耳垂取血(现场取血用采血针采血, 一人一针,避免血传疾病)。先用75% 酒精棉球消毒取血部位(冬季用手捻动耳 垂使其充血后再行消毒),待酒精干后, 用左手拇指和食指紧捏耳垂上方,右手持 消毒针迅速刺入耳垂下端1~2毫米,不宜 过深或过浅。然后用右手中指轻轻向上挤 压出血。
13

疟疾厚薄血膜的制做和染色方法PPT演示课件

疟疾厚薄血膜的制做和染色方法PPT演示课件

经2分钟后,添加等量的蒸馏水(PH7.0)于薄血膜的染液
中,用吸管和匀或倾侧摇匀,再引制厚血膜上,过约5至15
分钟,待干镜检。未稀释的(未加入前的)染色液,切不可
沾及厚血膜(因血红蛋白被酒精固定,致厚血膜呈不透
明的污绿色而无法镜检)。
•7
染色的 注意事项
1、染液的寿命与染色力的变异 2、染色时间与温度的关系 3、染液浓度与染色结果的关系 4、稀释液的PH与染色结果的关系 5、染液稀释后的使用时间 6、在进行大量血膜染色前,对染液的稀释度、PH
值和染色时间的长短是否适宜,应先用少数血膜进 行染色测定。 7、镜油易使血膜褪色,所以镜检无盖片的血膜后, 应用中性二甲苯完全洗掉血膜上的镜油。
•8
薄血片中四种人体疟原虫主要鉴别要点
1、受染的红细胞大小、颜色。 2、环状体(小滋养体)体积、细胞质、细
胞核。 3、大滋养体(色素颗粒、形状) 4、裂殖体(数目、排列、颗粒) 5、大、小配子体(形状、细胞核、细胞质、
•5
吉氏染液配制法、染色
吉氏染剂粉
0.5克
甘油
25毫升
甲醇
25毫升
先用甲醇固定薄血膜,然后用2-5%吉氏染 液,染色30分钟,水洗2-3分
1、瑞氏染剂粉 0.1-0.5克
2、甘油
3毫升
3、甲醇
97毫升
用蜡笔在厚薄血膜之间划一道界限,再用滴管加
瑞氏液5-8滴于薄血膜上,另加蒸馏水2-3滴于厚血膜上,
颗粒)
•9
厚血膜疟原虫鉴别要点
1、早期滋养体(环状体) 2、晚期滋养体(大滋养体) 3、裂殖体 4、配子体
•10
间日疟原虫环状体
•11
间日疟原虫滋养体 •12

2013.4.15疟原虫血片制作染色

2013.4.15疟原虫血片制作染色

2020/2/25
9
血片编号
血膜制成后,立即将受检者的个人编 号写在玻片磨砂面上(血片的编号要 与血检登记本上编号一致)以防差错。
2020/2/25
10
制作血膜的注意事项
1. 玻片清洗时,避免玻片碰撞、 磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时,手指只能持载片的边缘,不 能接触玻片表面,以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑, 才能使推出的血膜均匀一致。
血片制作和染色质量标准
项目
检查 内容

质量标准


血量 4~5цl
略多或略少
过多或过少
厚血 膜
位置 直径
玻片右1/3 0.8~1.0cm
稍偏右
0.7~0.8 或1.0~ 1.2cm
偏右过多 <0.7或>1.2cm
血片 制作
外观 血量
圆形厚膜均匀, 边缘整齐
1~1.5цl
圆形稍不均不整齐 厚薄不匀影响着色
2020/2/25
23
影响染色效果的因素
(4)染液的稀释浓度 染液的浓度高其着 色就快而深,从而疟原虫寄生红细胞的薛 氏点粗大显著,但颜色常偏碱;染液浓度 过低则染色时间久,颜色偏酸,薛氏点不 明显或消失。
2020/2/25
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影响染色效果的因素
(5)染色时间 染色时间长染色效果好, 反之较差。室温高则着色快,染色时间可 略缩短,气温低可适当延长。因此染色时 间应根据染液的质量、新旧、稀释浓度和 气温而适当增减。
2020/2/25
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血片的染色 (一)染液的种类及染色原理
染色原理:美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色,必须由天青作为媒介(染媒)才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂,但又 具有染媒作用,使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红,这样,就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色,而较小或菲薄的原 虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
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吉氏染液的染色方法
血片染色: 取蒸馏水或缓冲液1ml加入吉氏原液1滴, 混合均匀后涂在厚、薄血膜上,染色30分钟左 右,然后用清水轻轻将载玻片上的染液冲洗干 净,晾干镜检。
血片制作注意事项
A. 使用前载玻片一定要清洁,否则会影响 血片制作和镜检结果。 B. 厚血膜干燥时勿加热,加热会使原虫变 形,影响镜检结果。 C. 固定薄血膜时勿将甲醇触碰到厚血膜。
血片的制作(材料准备)
1.载玻片:新玻片浸入有液态洗涤剂的清 水中10-20分钟,干净棉巾逐个擦拭, 再用清水冲洗干净,晾干备用。 2. 采血针:一次性 3. 玻片盒:防止污染和昆虫吸食血膜 4. 75%酒精棉球:采血前后消毒 5. 记号笔:玻片上书写号码
血片的制作(厚、薄血膜)
用于检查疟原虫的血涂片有两种: 一种是将血液涂成薄膜状,称薄血膜; 一种是血液涂成圆盘状,称厚血膜。 最好一张玻片上同时制作厚、薄两种血膜。
血片的制作(薄血膜涂片)
取洁净的载玻片 1 张,左手持 载玻片平置 , 右手持推片,推片一端边缘 的中点刮取血液 1.0~1.5 微升(相当于 1/4 火柴头大小),使血滴与平置的载玻片中 线接触,待血液向两侧扩展约 2cm 宽时, 以25°~35°夹角均匀而迅速地向左推成 舌状薄血膜(约2.5cm长)。
血片的制作(血膜位置)
通常将厚、薄血膜涂在一张载玻片 上。方法是将载片分为 6 等分,第 1 、 2 格备贴标签及编号用;厚血膜涂在第 3 格中央;薄血膜涂在第4格前缘至第6格 中部。
血片的制作(编号)
血膜编号 血膜制成后,立即在玻片面上 写上受检者的号码,以防差错;待 薄血膜干后再用铅笔于薄血膜中写 上受检者的个人编号,依次按顺序 插入标本盒内。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
血膜染色前的处理
固定薄血膜 血片干燥后,用吸有甲醇的吸管 在薄血膜表面轻轻涂抹,自然干燥。注意固定 时甲醇不要接触厚血膜,否则会影响厚血膜的 溶血。 溶解厚血膜 血片干燥后,用滴管滴水于厚血 膜上,待血膜呈灰白色时,将水倒去,晾干。 (吉姆萨染色:直接)
血膜制作注意事项
1. 清洗玻片,且勿碰撞、磨损 2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内 3. 血膜应自然干燥 ,要充分干燥。
D. 冲洗染液时,水流轻缓,勿冲走厚血膜。
疟疾检测的注意事项
1.同一个病人的血涂片样本要大于等于5张。 2.标本一定要做好标记,上报结果时,一定要 把观察到疟疾病原虫的血涂片标本一起交上来。 3.标本染色时,不要一次把所有标本全部染完, 分批次染,找到最好的血涂片进行观察。
厚度以薄血膜上的红细胞之间互相接触而不相互 重叠为佳。
薄血膜
血片的制作(厚血膜涂片)
用推片的一角刮取4~5微升血量(相当于火柴 头大小),使血滴涂于载玻片的中央偏右处,由 里向外一个方向旋转2圈,涂成直径0.8~1.0cm的 圆形厚血膜,血膜厚薄均匀,过厚易于脱落,过 薄达不到检出率的要求(厚度以1个油镜视野内可 见5~10个白细胞为宜)。
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