谷氨酸含量的测定

（ ｍｍ）
Ｖ３— ——样品反应前华勃氏呼吸仪读数
（ ｍｍ）
Ｖ２— ——空白反应后华勃氏呼吸仪读数
（ ｍｍ）
Ｖ１— — — 空白反应前华勃呼吸仪读数（ ｍｍ）
ｋ— ——华勃氏呼吸仪读数（ ｇ／ｍｍ）
ｍ— ——样品质量（ ｇ）
ｎ— ——稀释倍数
４ 生物传感仪法
４．１ 原理 生物传感器是一类特殊形式的传感器， 由生
９５．１９
华勃氏 呼吸法 ９９．９０
９６．９５
９５．０７
生物传 感法 ９９．８７
９７．０２
９４．９７
—４７—
物分子识别元件与各类物理、化学换能器组成， 用 于各种生命物质和化学物质的分析和检测。固定 化酶作为传感器测量样品， 具有稳定性好、分析精 度高， 分析速度快和分析范围广的特点。在味精 行业中广泛利用生物传感仪来分析谷氨酸含量和 葡萄糖含量。 ４．２ 操作方法
称 取 样 品１０ｇ， 精 确 至０．０００１ｇ， 加 入 ５０ｍｌ 水 ， 加热并用１ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ溶液使其全部溶解， 冷却 至 室 温 后 定 容 至 １００ｍｌ。 吸 １ｍｌ 定 容 至 １００ｍｌ 为 样 液。用生物传感仪测样液， 自动打印读数。 ４．３ 计算
ａ
Ｌ×ｃ
Ｘ＝
×１００
３２．００＋０．０６（２０－ ｔ）
其中： Ｘ— ——样品中谷氨酸含量（ ％）
ｃ— ——１ｍｌ试样中含谷氨酸的质量（ ｇ／ｍｌ）
—４６—
ａ— ——实测试样的旋光度 Ｌ— ——旋光管长度（ ｄｍ） ３２．００— ——谷氨酸的比旋光度 ｔ— ——测定时试样的温度（ ℃） ０．０６— ——温度校正系数 １．４ 分析 由于样品准备时使用滤纸过滤或者加碳 脱色后过滤， 会造成ｃ偏大， 影响ａ值， 使ａ偏大， 造 成Ｘ偏大。
３ 华勃氏呼吸法
３．１ 原理
利 用 谷 氨 酸 脱 羧 酶 在 一 定 温 度 、体 积 下 与 谷
氨酸反映， 使谷氨酸脱羧放出ＣＯ２， 以华勃氏呼吸
仪测定放出ＣＯ２的压力、体积， 并以一定的公式换
算谷氨酸的含量。
谷氨酸脱羧酶
ＣＯＯＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨＮＨ２－ＣＯＯＨ
→ ＣＯＯＨ－ ＣＨ２－ ＣＨ２－ ＣＨ２ＮＨ２＋ＣＯ２↑
Ａ×１００×１００ Ｘ＝
ｍ 其中： Ｘ— ——样品中谷氨酸含量（ ％）
Ａ— ——生物传感仪自动打印的读数 １００— ——第一次稀释倍数 １００— ——第二次稀释倍数 ｍ— ——样品质量 ４．４ 分析 此方法操作方便， 受其他因素影响小， 准确性高。但检测成本高， 而且技术含量高， 需专 人专职操作。
２ 中和滴定法
２．１ 原理 根 据ＧＢ／Ｔ８９６７－ ２０００， 谷 氨 酸 具 有 两 个 酸 性
的－ ＣＯＯＨ基和一个碱性的－ ＮＨ２， 可以用碱液滴定 其中－ ＣＯＯＨ基， 以消耗碱的量间接求得谷氨酸含 量。 ２．２ 操作方法
样 品 粉 碎 后 称 取０．２５ｇ， 精 确 至０．０００１ｇ， 置 于 １００ｍｌ烧杯中， 加水７０ｍｌ， 加热使其全部溶解， 冷却 至室温， 采用电位滴定法， 以０．０５ｍｏｌ／Ｌ标准ＮａＯＨ 溶液滴定， 终点ｐＨ值控制在７．０， 记录消耗ＮａＯＨ溶 液的体积。同时做空白试验， 记录消耗ＮａＯＨ溶液 的体积。
发酵科技通讯
第 ３６ 卷
谷氨酸含量的测定
赖勇利 李哲新 （ 广州奥桑味精食品有限公司 广州 ５１０２８０ ）
摘 要： 通过旋光法、中和滴定法、华勃氏呼吸法和生物传感仪法四种方法测谷氨酸含量， 比较不同 方法的优缺点， 生物传感法测量方便快捷而且准确度高。
关键词： 谷氨酸含量； 旋光法； 中和滴定法； 华勃氏呼吸法； 生物传感仪法
水定容， 混匀。用滤纸过滤， 收集滤液。若试验颜
色较深， 可加活性炭０．１ｇ搅拌脱色。用滤纸过滤，
弃去前５ｍｌ滤液， 收集其余滤液为试验。
１．２．２ 试液测定 在恒温室（ ２０℃） 里， 先用标准旋
光管校正仪器。然后， 将上述试液置于旋光管中，
观察其旋光度， 同时记录旋光管中试验的温度。
１．３ 计算
３．２ 操作方法
称取样品１０ｇ， 精确至０．００１ｇ， 加５０ｍｌ水， 加热
并用１ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ溶液使其全部溶解， 冷却至室
温后定容至１００ｍｌ为样液， 吸１ｍｌ样液于反应瓶主
室０．５ｍｌ缓冲液１ｍｌ谷氨酸 脱 羧 酶 于 反 应 瓶 副 室 ，
放进华勃氏呼吸仪中， 保持水浴温度３７℃， 半小时
５ 综合比较
用以上四种方法分别测分析纯谷氨酸样品、 ９７％优等品谷氨酸和９５％合格品， 测量数据如下：
表１ 四种检测数据比较
测量方法
分析纯谷氨酸 样品（ ％）
９７％优 等 品 谷氨酸（ ％） ９５％合 格 品 谷氨酸（ ％）
旋光法 ９９．９４ ９７．１１ ９５．１８
中和滴 定法 ９９．９２
９７．０９
滴定前先校正自动电位滴定仪。 ２．３ 计算
Ｘ＝ ０．１４７１×ｃ×（Ｖ－ ＶＯ） ×１００ ｍ
其中： Ｘ— ——样品中谷氨酸含量（ ％） ｃ— ——标准ＮａＯＨ溶液的浓度（ ｍｏｌ／Ｌ） ｖ— ——试样消耗标准ＮａＯＨ溶液的体积（ｍｌ）
第 ３６ 卷第 ４ 期 ２００７ 年 １０ 月
发酵科技通讯
Ｖｏ— ——空白消耗标准ＮａＯＨ溶液的体积（ｍｌ） ０．０１４７— ——１．００ｍｌ， ｍｏｌ／Ｌ标 准 ＮａＯＨ 溶 液相当于谷氨酸质量（ ｇ） ｍ— ——样品质量（ ｇ） ２．４ 分析 滴定法的原理是酸碱滴定： Ｈ＋＋ＯＨ－→Ｈ２Ｏ， 如果 试 样 中 混 有 其 他 酸 的 Ｈ＋或 者 其 他 碱 的 ＯＨ， 均 会影响测定结果。
随着味精行业的发展， 生产分化， 有些专家专 门生产谷氨酸提供给其他厂家生产味精， 谷氨酸 成交量越来越大， 如何准确测定谷氨酸含量， 关系 到购销双方的利益。
测量谷氨酸含量的方法有多种， 可以根据自 身情况选择一种作为谷氨酸含量的测定方法。
１ 旋光法
１．１ 原理
根据ＧＢ／Ｔ８９６７－ ２０００， 谷氨酸分子结构中含
后记录读数并把副室的脱羧酶压进主室中， 使样
液和脱羧酶充分反应， 半小时后再次记录读数。
用相同的方法做空白实验。
测样前先用分析纯谷氨酸样品标定华勃氏呼
吸仪。
３．３ 计算
［（ Ｖ４－ Ｖ３） － （Ｖ２－ Ｖ１）］×Ｋ×ｎ
Ｘ＝
×１００
ｍ
其中： Ｘ— ——样品中谷氨酸含量（ ％）
Ｖ４— ——样品反应后华勃氏呼吸仪读数
有一个不对称碳原子， 具有光学活行， 能使偏振光
面旋转一定角度， 所以， 可用旋光仪测定其旋光
度。根据旋光度换算成谷氨酸的含量。
１．２ 操作来自百度文库法
１．２．１ 样品准备 称取样品１０ｇ， 精确至０．０００１ｇ， 加
水２０ｍｌ， 在搅拌下加入盐酸１６．５ｍｌ， 使其全部溶解
并移入１００ｍｌ容量瓶中， 待溶液冷却至２０℃时， 用