《现代分离方法与技术》
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• 将各种生物大分子从凝胶转移到一种固 定基质上的过程称为印迹技术 （blotting）。
• Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他 将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变 性使其成为单链，然后将一张硝酸纤维素 (nitrocellulose， NC)膜放在凝胶上，上面放上吸水 纸巾，利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移 到 NC膜上，使之成为固相化分子。载有DNA单链分 子的 NC膜就可以在杂交液与另一种带有标记的 DNA 或RNA分子(即探针)进行杂交，具有互补序列的RNA 或DNA结合到存在于NC膜的 DNA分子上，经放射自 显影或其他检测技术就可以显现出杂交分子的区带。 由于这种技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹，因 此称为“blotting”，译为“印迹技术”。
• 2 固相萃取 • 通常，样品的制备都包括溶剂萃取，由 于分子印迹技术的出现，这可以用固相 萃取代替，并且可利用分子印迹聚合物 选择性富集目标分析物。由于印迹聚合 物既可在有机溶剂中使用，又可在水溶 液中使用，故与其他萃取过程相比，具 有独特的优点。
• 谢谢大家
需要如何的条件
• 1、 残余气体的分压必须很低，使残余 气体的平均自由程长度是蒸馏器和冷凝 器表面之间距离的倍数。 • 2、 在饱和压力下，蒸汽分子的平均自 由程长度必须与蒸发器和冷凝器表面之 间距离具有相同的数量级。
• 在这此理想的条件下，蒸发在没有任何 障碍的情况下从残余气体分子中发生。 所有蒸汽分子在没有遇到其它分子和返 回到液体过程中到达冷凝器表面。蒸发 速度在所处的温度下达到可能的最大值。 蒸发速度与压力成Βιβλιοθήκη Baidu比，因而，分子蒸 馏的馏出液量相对比较小。
其他分离技术
刘昌春
分子蒸馏技术
• 分子蒸馏是一种特殊的液--液分离技术， 它不同于传统蒸馏依靠沸点差分离技术， 而是靠不同物质分子运动平均自由程的 差别实现分离。
它的原理？
• 当液体混合物沿加热板流动并被加热，轻、重 分子会逸出液面而进入气相，由于轻、重分子 的自由程不同，因此，不同物质的分子从液面 逸出后移动距离不同，若能恰当地设置一块冷 凝板，则轻分子达到冷凝板被冷凝排出，而重 分子达不到冷凝板沿混合液排出。这样，达到 物质分离的目的。
• 生物大分子印迹技术发展极为迅速，己 广泛用于 DNA、RNA、蛋白质的检测。 通常人们将DNA印迹技术称为Southern blotting，将RNA印迹技术称为 Northern blotting，将蛋白质印迹技术 称为Western blotting，将不经凝胶的 印迹技术称为斑点印迹（Dot blotting）
有何应用？
• • • • A 食品工业 1 单甘酯的生产 2 鱼油的精制 3 羊毛脂的提取
• B医药工业 • 利用分子蒸馏技术,在医药工业中可提取 天然维生素A、维生素E;制取氨基酸及 葡萄糖的衍生物;以及胡萝卜和类胡萝卜 素等。
• 此外,在分子生物学领域中,可以将分子蒸 馏技术作为生物研究的一种前处理技术, 以保存原有组织的生物活性和制备生物 样品等。
• 在大中型短程蒸馏中，冷凝器和加热表 面之间的距离约为20~50mm，残余气体 的压力为10-3mbar时，残余气体分子的 平均自由程长度约为2倍长。短程蒸馏器 完全能满足分子蒸馏的所有必要条件。
装置图
分子蒸馏技术作为一种与 国际同步的高新分离技术， 具有其他分离技术无法比 拟的优点
• 1、操作温度低（远低于沸点）、真空度高（空载 ≤1Pa）、受热时间短（以秒计）、分离效率高等，特 别适宜于高沸点、热敏性、易氧化物质的分离； • 2、可有效地脱除低分子物质（脱臭）、重分子物质 （脱色）及脱除混合物中杂质； • 3、其分离过程为物理分离过程，可很好地保护被分 离物质不被污染，特别是可保持天然提取物的原来品 质； • 4 、分离程度高，高于传统蒸馏及普通的薄膜蒸发器。
基本原理
• 当模板分子（印迹分子）与聚合物单体 接触时会形成多重作用点，通过聚合过 程这种作用就会被记忆下来，当模板分 子除去后，聚合物中就形成了与模板分 子空间构型相匹配的具有多重作用点的 空穴，这样的空穴将对模板分子及其类 似物具有选择识别特性
在分离中的应用
• 1 色谱分离 • MIPS最广泛的应用之一是利用其特异的识别 功能去分离混合物，近年来，引人瞩目的立体、 特殊识别位选择性分离已经完成。其适用的印 迹分子范围广，无论是小分子（如氨基酸、药 品和碳氢化合物等）还是大分子（如蛋白质等） 已被应用于各种印迹技术中 。
• 综上所述，分子蒸馏技术作为一种特殊 的新型分离技术,主要应用于高沸点、热 敏性物料的提纯分离。实践证明,此技术 不但科技含量高,而且应用范围广,是一项 工业化应用前景十分广阔的高新技术。 它在天然药物活性成分及单体提取和纯 化过程的应用还刚刚开始,尚有很多问题 需要进一步探索和研究。
分子印迹技术
• Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他 将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变 性使其成为单链，然后将一张硝酸纤维素 (nitrocellulose， NC)膜放在凝胶上，上面放上吸水 纸巾，利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移 到 NC膜上，使之成为固相化分子。载有DNA单链分 子的 NC膜就可以在杂交液与另一种带有标记的 DNA 或RNA分子(即探针)进行杂交，具有互补序列的RNA 或DNA结合到存在于NC膜的 DNA分子上，经放射自 显影或其他检测技术就可以显现出杂交分子的区带。 由于这种技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹，因 此称为“blotting”，译为“印迹技术”。
• 2 固相萃取 • 通常，样品的制备都包括溶剂萃取，由 于分子印迹技术的出现，这可以用固相 萃取代替，并且可利用分子印迹聚合物 选择性富集目标分析物。由于印迹聚合 物既可在有机溶剂中使用，又可在水溶 液中使用，故与其他萃取过程相比，具 有独特的优点。
• 谢谢大家
需要如何的条件
• 1、 残余气体的分压必须很低，使残余 气体的平均自由程长度是蒸馏器和冷凝 器表面之间距离的倍数。 • 2、 在饱和压力下，蒸汽分子的平均自 由程长度必须与蒸发器和冷凝器表面之 间距离具有相同的数量级。
• 在这此理想的条件下，蒸发在没有任何 障碍的情况下从残余气体分子中发生。 所有蒸汽分子在没有遇到其它分子和返 回到液体过程中到达冷凝器表面。蒸发 速度在所处的温度下达到可能的最大值。 蒸发速度与压力成Βιβλιοθήκη Baidu比，因而，分子蒸 馏的馏出液量相对比较小。
其他分离技术
刘昌春
分子蒸馏技术
• 分子蒸馏是一种特殊的液--液分离技术， 它不同于传统蒸馏依靠沸点差分离技术， 而是靠不同物质分子运动平均自由程的 差别实现分离。
它的原理？
• 当液体混合物沿加热板流动并被加热，轻、重 分子会逸出液面而进入气相，由于轻、重分子 的自由程不同，因此，不同物质的分子从液面 逸出后移动距离不同，若能恰当地设置一块冷 凝板，则轻分子达到冷凝板被冷凝排出，而重 分子达不到冷凝板沿混合液排出。这样，达到 物质分离的目的。
• 生物大分子印迹技术发展极为迅速，己 广泛用于 DNA、RNA、蛋白质的检测。 通常人们将DNA印迹技术称为Southern blotting，将RNA印迹技术称为 Northern blotting，将蛋白质印迹技术 称为Western blotting，将不经凝胶的 印迹技术称为斑点印迹（Dot blotting）
有何应用？
• • • • A 食品工业 1 单甘酯的生产 2 鱼油的精制 3 羊毛脂的提取
• B医药工业 • 利用分子蒸馏技术,在医药工业中可提取 天然维生素A、维生素E;制取氨基酸及 葡萄糖的衍生物;以及胡萝卜和类胡萝卜 素等。
• 此外,在分子生物学领域中,可以将分子蒸 馏技术作为生物研究的一种前处理技术, 以保存原有组织的生物活性和制备生物 样品等。
• 在大中型短程蒸馏中，冷凝器和加热表 面之间的距离约为20~50mm，残余气体 的压力为10-3mbar时，残余气体分子的 平均自由程长度约为2倍长。短程蒸馏器 完全能满足分子蒸馏的所有必要条件。
装置图
分子蒸馏技术作为一种与 国际同步的高新分离技术， 具有其他分离技术无法比 拟的优点
• 1、操作温度低（远低于沸点）、真空度高（空载 ≤1Pa）、受热时间短（以秒计）、分离效率高等，特 别适宜于高沸点、热敏性、易氧化物质的分离； • 2、可有效地脱除低分子物质（脱臭）、重分子物质 （脱色）及脱除混合物中杂质； • 3、其分离过程为物理分离过程，可很好地保护被分 离物质不被污染，特别是可保持天然提取物的原来品 质； • 4 、分离程度高，高于传统蒸馏及普通的薄膜蒸发器。
基本原理
• 当模板分子（印迹分子）与聚合物单体 接触时会形成多重作用点，通过聚合过 程这种作用就会被记忆下来，当模板分 子除去后，聚合物中就形成了与模板分 子空间构型相匹配的具有多重作用点的 空穴，这样的空穴将对模板分子及其类 似物具有选择识别特性
在分离中的应用
• 1 色谱分离 • MIPS最广泛的应用之一是利用其特异的识别 功能去分离混合物，近年来，引人瞩目的立体、 特殊识别位选择性分离已经完成。其适用的印 迹分子范围广，无论是小分子（如氨基酸、药 品和碳氢化合物等）还是大分子（如蛋白质等） 已被应用于各种印迹技术中 。
• 综上所述，分子蒸馏技术作为一种特殊 的新型分离技术,主要应用于高沸点、热 敏性物料的提纯分离。实践证明,此技术 不但科技含量高,而且应用范围广,是一项 工业化应用前景十分广阔的高新技术。 它在天然药物活性成分及单体提取和纯 化过程的应用还刚刚开始,尚有很多问题 需要进一步探索和研究。
分子印迹技术