霉菌的形态观察

微生物学实验报告
题目：霉菌的形态观察
姓名：学号：年级班级：组别：
同组者：时间：
【实验器材】
1．菌种
曲霉( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉( Rhizopus sp. ) 和毛霉（Mucor sp. ）培养2~5d 的马铃薯琼脂平板培养物。

2．培养基
马铃薯培养基（简称PDA）
3．仪器或其他用具
无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%的甘油以及显微镜等。

【目的要求】
1．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

2．了解四类常见霉菌的基本形态特征。

【基本原理】
霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。

可以采取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。

【操作步骤】
1．培养小室的灭菌
在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于110℃灭菌20~30min，烘干备用。

2．琼脂块制备
通过无菌操作，用解剖刀由马铃薯琼脂薄层平板上切下1cm2左右的琼脂块，将其移至培养小室的载玻片上，每片两块。

3．接种
通过无菌操作，用接种针从黑曲霉或黑根霉马铃薯琼脂平板培养物中挑取很少量孢子，接种于小室中琼脂块边缘上，将盖玻片覆盖在琼脂块上。

4．培养
通过无菌操作，在培养小室中圆滤纸片上加3~5mL灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，于28℃培养7天。

5．镜检
取出载玻片用低倍镜和高倍镜镜检。

【实验结果】
1．图片：四种霉菌的形态
假根
孢子囊
匍匐菌丝
图一：根霉（10×10）图二：曲霉（10×10）
足细胞
孢子梗
横隔
图三：曲霉孢子（10×40）图四：曲霉足细胞（10×40）
分生孢子梗图五：毛霉（10×10）图六：青霉（10×10）
黑曲霉和黑根霉在形态特征上有何区别？
答：黑根霉菌丝无隔，有匍匐菌丝和假根，假根着生处有直立的向上孢子囊梗，其顶端膨大成孢子囊，孢子囊底部有半球形囊轴。

黑曲霉菌丝有隔，气丝分化成分生孢子梗，顶端膨大形成球形顶囊，顶囊表面辐射出状生出一层或两层小梗，小梗上有一串串分生孢子。

【附】马铃薯培养基（简称PDA）配方
马铃薯 200g
蔗糖（或葡萄糖） 20g
琼脂 22~25g
水 1000mL
pH 自然
马铃薯去皮，切成块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000mL。

110℃灭菌30min。