月季花的组织培养

（4）消毒与接种 在超净工作台上，用饱和
漂白粉上清液作表面灭菌25～30分钟，用无菌水涮洗数次 ，无菌纱布吸干茎段外表水分，按无菌操作要求接种，从 芽萌发到芽长到1厘米左右需要2～3周。
•（5）培养 培养温度21℃最
好，最高不超过25℃，有昼夜温差， 光照10～12小时/天，光强800～
1200LX。
月季的植物组织培养
汇报：王照雷 素材：叶康康 制作：孙超、顾俊伟
主要内容

<一> 月季花

<二>月季花的组织培养

<三>问题分析与解决
月季
月季，被称为花中之王，又称“月月 红”，蔷薇科。常绿，半常绿低矮灌 木，四季开花﹐多红色﹐或粉色、偶 有白色﹐可作为观赏植物，可作为药 用植物，也称月季花。
二、实验原理
细胞的全能性：细胞具有全套遗传物质。能够发育
成完整植株的能力。
激素调控理论：当细胞分裂素和生长素的比值大时
，诱导芽的产生；当比值小时，诱导根的产生；一样时， 诱导愈伤组织的形成。
（3）清洗外植体 采回的枝条切去叶，再剥
去附在茎上的叶柄及皮刺，先整段用洗衣粉水仔细刷洗， 再用自来水冲洗，毛巾擦干后，放置在小木板上，用刀切 成2～3厘米一段，每段至少一个侧芽，装入消毒过的培养 皿，放在超净工作台上。
（5）生根与移栽 月季嫩芽生长到一定长度时，就应切 割下来，转入生根培养基。切下的嫩芽长度以2～3厘米为 宜，让幼苗基部伤口愈合，已长出根原基，幼根尚未长出 ，即出瓶种植。这种方法不会损伤根系，移栽速度快，成 活率高。
（a）以MS培养基为基础，配方为MS+NAA0.5，此外加入 300mg/L活性炭，30g/L蔗糖。插植2厘米以上无根嫩茎， 经2周左右出现根原基，幼根尚未长出即出瓶种植。
（d）移栽后植保工作。首次移栽1周后，可少量的追肥， 视苗大小，浓度逐渐由0.1％提高到0.3％左右，施用种类 有复合肥、尿素、磷酸二氢钾，MS培养液等，通常每7～ 10天喷一次杀菌剂，如百菌清等保苗，也可结合喷药施肥 ，以减少管理用工。试管苗第二次移栽后，管理上仍不可 放松，须注意除草、施肥、防治病虫害，及时掐去顶芽， 尤其是花蕾，以促进侧芽的生长，促使早日壮大。
（二）继代增殖
（1）将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到MS+BA12mg/l+IAA0.1-0.3mg/l或MS+BA1-2mg/l+NAA0.010.1mg/l的培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，原茎段 弃去。继代增殖培养基每升用蔗糖30克
（2）5周后 ，所培育的月季成倍的增加。
（3）每5～6周做一次继代增殖，继代前先制备好培养 基，然后在无菌操作条件下，将月季嫩茎切成1～2节一 段，投入新鲜的增殖培养基上，月季小苗就会按几何级 数增殖起来，也可以将大苗转入到生根培养基上。
红色切花更成为情人间必送的礼物之 一，并成为爱情诗歌的主题。月季花 有较好的抗真菌及协同抗耐药真菌活 性。
月季种别
学名：Rosa chinensis 英名：Chinese Rose 别名：长春花、月月红、斗雪红、瘦客 科属：蔷薇科
月季的分类---切花月季
此类月季，切枝较长， 直立挺拔，花蕾杯状较 高，花型优美，花色众 多。本基地用日本无刺 蔷薇杆插和果实生苗做 砧木嫁接成苗，根系特 别发达（成网状），抗 性极强，年产花量每平 方可达150－200枝，是 理想的鲜切花生产用苗 。
（2）使用抗氧化剂PVP半光氨酸
（3）使用吸附剂活性炭，0.1%~0.5%
（4）连续转移
继代培养的材料的玻璃化 玻璃化现象：当植物不断进行离体培养繁殖时，培养物会
呈半透明水壮的现象。 产生的原因：湿度太大，光照水平太低；培养细胞细胞分
裂素水平较高。 解决方法： （1）增加光照；降低培养温度；增加通风CO2浓度。 （2）降低培养基中细胞分裂素含量。
繁殖方法
播种繁殖（多用于培育新品种） 扦插繁殖（扦插是繁殖月季的主要方法，
南方可在春秋两季进行嫩枝插） 嫁接繁殖（对扦插难以生根的优良品种） 压条繁殖（在生长旺盛时期进行，1个月
即可生根，生根后剪离母体，带土坨定） 植组织培养
植物组织培养
目录
➢（一）：培养意义 ➢（二）：实验原理 ➢（三）: 实验步骤
（b）移栽。幼苗出瓶后，先洗去沾附的琼脂培养基，再 种植到粗沙+园田土（1：3）介质中，总的原则是疏松透 气，有一定的保水、保肥能力。种植密度2～3厘米×4～6 厘米/株，移栽完毕浇透水，并用0.1％的百菌清、多菌灵 或甲基托布津等喷雾保苗，能显著提高成活率。
（c）移栽后管理。移栽后需保持相对湿度85％以上，在 温室、拱棚中移栽，覆好遮荫网，一般成活率都比较高， 并注意通风和温度管理。4～6周后，须做好第二次移植， 通常植入5厘米×9厘米的塑料杯中，每杯种1苗，再经4～ 6周，地上、地下部分都充分生长，有些植株还能开花。
月季与玫瑰的主要区别
月季与玫瑰的主要区别：1）月季叶少，3-5片，而玫瑰59片。
2）月季刺少，玫瑰刺多。 3）月季叶泛亮光，玫瑰叶无亮光。 4）月季花较大，颜色多样；玫瑰花较小，一般为粉红色
。第二种玫瑰花稍大，但呈扁平盘形，容易与月季区分开 来。 5）还没见到有卖玫瑰花的，花店出售的都是月季。
玫瑰花香味纯正、产油量高，干 燥加工可制作成玫瑰香茶（也可 熏茶），在众多食用、药用、保 健、养颜花卉品种中最佳。
玫瑰和月季
1.月季（Rosa chinensis)： 我国是月季的故乡。18世纪末19 世纪初中国月季传人欧洲，与很 多国外品种反复杂交，中国月季 的月月、季季开花的遗传性改造 了欧洲月季，随之育成了现代月 季。所以现代月季和中国原产的 古代月季(Rosachinensis)无论在 形态上或染色体组成上都有很大 的差异。现在国内90％以上的月 季都是国外引进的现代月季。现 代月季以株型、花的大小、香味 等分为六类：丰花月季、壮花月 季、微型月季、藤本月季、香水 月季、灌木月季等。杂交品种超 过200种。花色有白、绿、兰、 红、淡红、粉红、黄、淡黄等。
问题分析及解决
1. 可能是在外植体灭菌过程中个别没有灭菌完全 ，是自生菌；或者升汞灭菌后没有将升汞完全洗 干净。
2.可能因为培养基内水分较大，在培养过程中平 皿上方形成很多水珠，造成加大了污染几率。
3. 叶片的出愈率不高，分析可能是因为叶片的取 材不够好，应该去茎尖上最幼嫩的叶片，这样它 的分化能力会更强，更容易长出愈伤组织；
1 ：初代培养 2 ：继代培养
➢（四）: 问题与讨论
一、培养意义
月季属蔷薇科蔷薇属多年生草本植物，每年多次开花，而 且香味怡人，在观赏植物中地位很高。另一大优点是分布 极广，适应性强，栽培容易。使得月季无愧于“花中皇后 ”之美誉，古今中外文人墨客咏叹月季的佳作，不胜枚举 。但品种比较单一，更新换代缓慢。随着组织培养技术的 应用成功培育了大量优质月季组培苗，填补了市场空白， 对加速新老品种更新换代，迅速普及名优新品种起到了重 要作用 。
（4） 壮苗培养
①对增殖倍率高的品种，所增殖的嫩茎很细弱，要求进行 一次壮苗培养，以取得适合生根和今后移栽的苗子。壮苗 培养的培养基为：MS+BA0.3-0.5+NAA0.01-0.1，如果并 不特别强调繁殖速度，也可以一直使用这种培养基，以壮 苗为主，增殖为辅，使增殖与壮苗合为一步。
②培养条件。光照10～12小时/天，光强800～1800LX， 温度20～23℃，最高24～26℃。
月季的分类---微型月季
月季家族的新品种，其株型矮小 ，一般不超过30厘米，开花甚 密，花朵较小，颜色种类繁多， 花型极美，因其品性独特又称为 "钻石月季、袖珍月季"。广泛用 于盆栽造型和点缀草坪。
月季的分类---藤本月季
长势强壮，攀援性强， 株高一年生可达2—4米 以上，二年生节间发芽 全身开花，花头众多， 花色艳丽、奔放，花期 持久，是优良的立体绿 化品种，布置走廊、围 墙（篱笆）等效果极佳 （有红、黄、白、复色 、朱红等各色）。
月季的分类---茶香大花月季
盆栽观赏品种，品种繁多，树势 健壮美观，大部分单枝开花，花 朵硕大丰满，形态优美，花香浓 郁，花色丰富、艳丽，是极受欢 迎的品种群。
月季的分类---丰花月季
扩张型长势，花头成聚 状，耐寒、耐高温、抗 旱、抗涝、抗病，对环 境的适应性极强。广泛 用于城市环境绿化、布 置园林花坛、高速公路 等，本基地复壮优选的 莫海姆宫殿、花房、肯 特等丰花品种，当年单 株蓬茎70厘米左右，其 花色不受温度高低之影 响，始终不变色。
月季的分类---地被月季
匍匐生长，枝条触地生 根，覆盖率极强（单株 年覆盖面1平方米左右 ，厚度30厘米左右）； 多花（单枝花朵50—— 100朵，单株次开花可 达千朵以上）；耐寒、 抗旱、抗病，是抵御风 沙、水土保持最理想花 卉品种。其中以恋情火 焰、巴西诺、哈德福俊 、梅郎珍珠为佳。
月季的分类---食用月季

（四）问题与讨论
初代培养外植体的褐变：褐变是由于植物组织
中的多酚氧化酶被激活而使细胞的代谢发生变化 。在褐变过程中产生醌类物质，他们多呈褐色， 当扩散到培养基后，就会抑制其他酶的活性，从 而影响从接种的外植体的一种现象。
减轻褐变现象发生的方法：
（1）合适的培养基。降低无机盐浓度和细胞分 裂素浓度，但蔗糖浓度不能降低。
4.在切割组织块时候，用酒精灯灭刀、剪后 未完全晾凉就切割叶片。
5.因为温度太高将叶片杀死；叶片比起茎段 来说组织较薄胶脆弱，灭菌很可能伤害到 组织内部，影响其愈伤组织的形成。
6.花药及萼片出愈率很低，原因可能是因为 花药为单倍体，在培养方面的要求较高， 配制的培养基的成分上不能充分满足；萼 片的分化能力较低，所以出愈率不高。