血清乳酸脱氢酶测定
乳酸脱氢酶测定—速率法(精)
430
37 要
4920
20 600
U/L
430
37 要
30s
45s
3016
50 900
80 + 2 0. 0 2
参考范围:104-205U/L 式中6 220为波长340nm处NADH的摩尔 吸光度。
方法评价
1.L-P反应速率法是根据正向反应而建立，其优点在
于：乳酸盐和底物溶液的稳定性较好，－20℃保存 可稳定6个月以上。且两溶液的浓度对测定方法的 影响最小。 2.线性范围较宽 本法在LDH活性为726U/L以内时 线性良好。超过此值最好将标本稀释后再测。 3.精密度好 LDH活性为65U/L时，日间CV为5.8%； LDH活性为149U/L时，日间CV为3.2%。 4.特异性高 由于血清中非LDH的NAD＋类氧化还原 酶的内源性底物很少，加上样本的高度稀释，因此， 这些酶的干扰作用可忽略不计。
LDH pH 8.8 L 乳酸 NAD 丙酮酸 NADH H
实验操作
样本要求:当日空腹采集的无溶血、无乳糜的
血清 试剂配制：取R15ml加R21ml混合即为工作试 剂 半自动生化分析仪测定参数
半自动生化分析仪测定参数
分 析 方 法 速 率 法 速 率 法 波长 温 度 试 剂 空 白 延 迟 时 间 30s 测 量 时 间 45s 因数 样 品 量 uL 试 剂 量 uL 吸 入 量 uL 500 单 位 反 应 方 向 正
乳酸脱氢酶测定—速率法
xiaobinxuer@
实验目的
熟悉血清乳酸脱氢酶测定（速率法）的原理，
测定参数的设置及酶活性单位的计算
实验原理
乳酸脱氢酶催化乳酸氧化生成丙酮酸，同时
乳酸脱氢酶测定偏高的原因
乳酸脱氢酶测定偏高的原因
乳酸脱氢酶是一种主要在肝细胞中发挥代谢功能的酶，它可以转化乳酸为氢原子，帮助肝脏代谢毒素，进而保护人体健康。
通常情况下，乳酸脱氢酶测定结果低于正常范围，但有时也可能偏高。
首先，乳酸脱氢酶偏高的原因可能与器官损伤有关。
例如，高血脂患者可能会导致脂肪肝损伤，进而抑制肝细胞功能，最终导致乳酸脱氢酶水平偏高。
同时，肝癌患者也可能缺乏乳酸脱氢酶，导致乳酸脱氢酶活性偏高。
此外，像慢性胰腺炎、多发性硬化症、丙型肝炎(甲型肝炎)等疾病，也可能引起肝部损伤，从而直接导致乳酸脱氢酶偏高。
此外，一些药物例如氯吡格雷，异丙芬等也可能导致乳酸脱氢酶的变化。
最后，除了上述原因外，乳酸脱氢酶偏高还可能是肝功能发生异常，以及肝细胞受损伤的结果。
因此，如果乳酸脱氢酶测定结果出现异常，及时检查肝功能将是相当重要的，以确定乳酸脱氢酶偏高的原因，并采取相关措施来解决。
乳酸脱氢酶ldh正常值范围
乳酸脱氢酶ldh正常值范围乳酸脱氢酶（LDH）是一种存在于细胞内的酶，广泛分布于人体各种组织和器官中，包括肝脏、肌肉、心脏、肾脏等。
它在能量代谢和乳酸代谢中起着重要的作用。
乳酸脱氢酶在正常情况下存在于细胞内，当细胞受损或破坏时，LDH会释放到血液中，引起血液中LDH水平的升高。
乳酸脱氢酶的正常值范围因性别、年龄和肌肉肌酸激酶（CK）水平而异。
一般来说，成年男性的正常乳酸脱氢酶值范围为100-190 U/L，而成年女性的正常值范围则略低一些，为90-160 U/L。
儿童和青少年的正常值范围通常较高，约为110-295 U/L，这是因为他们的骨骼肌组织处于发育阶段，骨骼肌的新陈代谢较为活跃。
乳酸脱氢酶的升高可能与多种疾病有关。
例如，肝脏疾病（如肝炎、肝硬化）、心肌梗死、心肌炎、心力衰竭、肺栓塞、肾功能衰竭等都可以导致乳酸脱氢酶水平的升高。
此外，肌肉损伤（如创伤、挤压伤、运动损伤）也会导致乳酸脱氢酶水平的升高。
因此，当乳酸脱氢酶的水平超出正常范围时，应结合患者的临床症状和其他相关检测结果来综合分析，以确定病因。
乳酸脱氢酶的检测方法主要有两种：血清乳酸脱氢酶测定和组织乳酸脱氢酶同工酶分析。
血清乳酸脱氢酶测定是最常用的方法，通过采集患者的静脉血样本，使用化学分析仪器来测定血液中乳酸脱氢酶的浓度。
组织乳酸脱氢酶同工酶分析则是通过电泳技术将乳酸脱氢酶分离成几个不同的同工酶带，从而更准确地评估乳酸脱氢酶的来源和组织损伤的程度。
尽管乳酸脱氢酶的测试在临床上具有一定的指导意义，但它并不是一个特异性很高的指标。
也就是说，乳酸脱氢酶的升高并不能确定具体的病因，需要结合其他临床检查结果来综合判断。
因此，在进行乳酸脱氢酶的检测时，医生需要综合考虑患者的病史、症状和其他相关检查结果，以做出准确的诊断。
乳酸脱氢酶的正常值范围为100-190 U/L（成年男性）和90-160 U/L（成年女性），但具体数值可能会因性别、年龄和肌肉肌酸激酶水平的不同而异。
乳酸脱氢酶测定SOP_LDH临床意义_检验科生化项目SOP
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：416~417。
编写：审核：批准：
7性能参数
本法线性范围为0~600U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
100~190U/L。
9临床意义
LDH在组织中的活性比血清中高得多，所以当少量组织坏死时，该酶即释放入血而使其在血液中的活性升高。测定此酶常用于心梗、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。心肌梗塞病人发病48h后，血清LDH达到峰值，且增高持续时间可达10d。此外进行性肌萎缩、恶性肿瘤、肝炎、溶血性疾病等，LDH亦可增高。
空腹采不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
应及时送检，室温可保存7d,不可冷冻。
2.3注意事项
推荐选用血清。不应使用含有EDTA、氟化钠或草酸钾的采血管。标本应避免溶血、脂血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1~6孔为NAD1.23umol/L，片剂；7孔为L-乳酸盐15.3umol/L，三羟甲基氨基甲烷缓冲液，液体。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存，有效期内稳定。
3.2质控品
实验7 琼脂糖凝胶电泳法测定血清乳酸脱氢酶同工酶
（4）恶性贫血 溶血性疾病、幼红细胞贫血症LD活性极度 升高，伴有LD1明显升高，LD1＞LD2。
（5）骨骼肌损伤时LD4和LD5可发生增高。
[注意事项]
1．红细胞中LD1、LD2活性很高，因此必须避免标本溶血。 2．LD4与LD5对热很敏感，因此底物-显色液的温度不能过
6．区带观察 观察显色的区带情况（数目、深浅等）。 7．定量 将各区带切开，分别装入试管中，加入400g/L尿素
4ml，于沸水浴中加温5min，取出冷却后以 575nm波长比色。 空白管取大小相同但无同工酶区带的凝胶，用上述相同的方 法处理。比色后根据各管吸光度值计算各同工酶的百分含量。
[计算]
A总＝A1+A2+A3+A4+A5 式中，A1～A5为各同工酶区带的吸光度。 各同工酶百分率（%）为：
实验7 琼脂糖凝胶电泳法分离（测定） 血清乳酸脱氢酶同工酶
[原理]
乳酸脱氢酶（LD）广泛存在于人体各组织细胞中，以 肾、心肌、肌肉、肝、红细胞含量最多。LD是由两种不同 亚基（M和H）组成的四聚体，共有5种同工酶形式，按电 泳的快慢命名为LD1、LD2、LD3、LD4和LD5。
5种同工酶大体可分为三大类：第一类以LD1为主，主 要存在于心肌，含量最多，可占总LD的50%左右；第二类 以 LD5 为 主 ， 以 横 纹 肌 为 代 表 ， 肝 脏 中 也 有 ； 第 三 类 以 LD3为主，存在于脾、肺。各组织LD同工酶的类型、含量 均有所差异。LD同工酶的测定相对于总活性的测定更具有 组织器官特异性，灵敏度也更高。
高（<50℃），否则易使其变性失活，不能显色。 3．LD4和LD5对冷不稳定，易发生失活，故最好采用新鲜标
乳酸脱氢酶(LDH)测定操作规程(SOP)
乳酸脱氢酶(LDH)测定操作规程（SOP）一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中乳酸脱氢酶（LDH）的活性。
二、临床意义（一）概述乳酸脱氢酶（LDH），又称L－乳酸－NAD+氧化还原酶，酶编号为EC 1.1.1.27，分子量约为34000道尔顿。
LDH是一种细胞质酶，存在于所有组织细胞中。
由于组织中的LDH 浓度比血浆高约500倍，即使组织的轻微损伤也将导致血清中活性的明显增高，在肝、心肌、骨骼肌和肾中发现高度组织特异性活性的酶。
（二）临床意义乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗死、肝炎、肺梗死、某些恶性肿瘤、白血病等。
某些肿瘤转移所致的胸腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。
目前，常用于心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。
（三）医学决定水平170U／L:此值在参考范围以内，等于或低于此值可排除许多与LDH升高有关的疾病，而考虑其他的诊断。
此值还可作为病人自身的对照，用来与以前或将来的测定值作比较。
300U／L：高于此水平时，应考虑到可能引起LDH升高的各种疾病，如心肌梗塞、肝病变、传染性单核细胞增多症、进行性肌营养不良等。
因此，应作其他各种试验，以作出明确诊断。
血清溶血可使测定值增高，应予以注意。
500U／L：高于此值，常见于巨幼细胞性溶血，急性白血病、慢性粒细胞性白血病、转移癌和肝昏迷等，此时应作其他多种检测来作出正确诊断。
三、检验原理L-乳酸＋NAD+−−LDH丙酮酸＋NADH＋H+−→NADH的生成速率与样品中LDH活性成正比，在340nm波长处，通过连续监测吸光度的上升速率(△A／min)，即可计算出样品中LDH的活性。
四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血（禁食12小时）；患者处于平静、休息状态，减少患者由于运动、饮食带来的影响；静脉采血时患者应取坐位或卧位；止血带使用后1分钟内采血，回血后立即松开；正确使用抗凝剂；防止溶血；防止过失性采样。
样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆，防止样品对环境的污染、水分蒸发。
ldh试剂检测公式
ldh试剂检测公式ldh试剂检测公式是一种常用的生化检测方法，用于检测血清或组织中的乳酸脱氢酶（LDH）活性。
LDH是一种重要的酶类，存在于细胞的胞浆中，其活性水平可以反映细胞损伤程度，对于临床诊断和疾病监测具有重要意义。
LDH试剂检测公式是通过测定LDH催化的底物转化为产物的速率来间接测定LDH活性的方法，下面我们将介绍LDH试剂检测公式的具体步骤和计算方法。
一、LDH试剂检测公式的原理LDH试剂检测公式是基于LDH催化底物氧化还原反应的原理。
LDH催化的底物是乳酸，它在催化下被氧化为产物丙酮酸。
LDH试剂检测公式中，首先将待测样品和辅酶NAD+加入反应体系中，LDH催化乳酸氧化的同时，NAD+被还原为NADH。
NADH的生成量与乳酸氧化的速率成正比，而NADH的光密度与其浓度成正比。
因此，通过测定NADH的光密度变化，可以间接测定LDH活性。
二、LDH试剂检测公式的步骤1. 样品制备：将待测血清或组织样品离心去除悬浮物，取上清液作为待测样品。
2. 试剂配置：将乳酸、NAD+、琥珀酸、LDH酶等试剂按照一定比例配置成反应液。
3. 反应体系组装：将待测样品和试剂加入反应管中，混匀后放入分光光度计。
4. 反应条件设定：设置适当的温度和波长，记录初始吸光度。
5. 反应过程监测：启动分光光度计记录反应体系吸光度随时间的变化。
6. 数据处理：根据吸光度变化曲线计算LDH活性。
三、LDH试剂检测公式的计算方法1. 计算初始吸光度（A0）和最终吸光度（A1）。
2. 计算反应时间（t）。
3. 根据NADH的摩尔吸光系数ε和反应体系的光程b计算NADH的摩尔浓度C（C = ΔA / εb）。
4. 根据反应体系中NAD+的初始摩尔浓度C0和NADH生成量与NAD+消耗量之间的关系，计算LDH活性。
在实际操作中，为了提高LDH试剂检测公式的准确性和稳定性，需要严格控制各项操作条件，并采用标准曲线法进行定量分析。
此外，还需注意避免样品污染和环境干扰对实验结果的影响。
乳酸脱氢酶的功能
乳酸脱氢酶的功能
乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶，可广泛作用于身体的各个组织中，如肝脏、心脏、骨骼肌、脾脏、肺、脑、肿瘤组织等。
其功能主要在于催化乳酸氧化为丙酮酸，这是糖酵解和糖异生途径中的关键反应。
此外，乳酸脱氢酶还可以催化苯丙酮酸生成苯乳酸。
在临床上，乳酸脱氢酶的测定常用于诊断心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤等疾病。
例如，急性心肌梗塞时，血清乳酸脱氢酶1和乳酸脱氢酶2显著升高，约95%的病例的血清乳酸脱氢酶1和乳酸脱氢酶2比值大于1，且乳酸脱氢酶1升高早于乳酸脱氢酶总活性升高。
但是，由于乳酸脱氢酶分布在人体组织当中较为广泛，所以乳酸脱氢酶对诊断的特异性比较差，只利用乳酸脱氢酶升高，难以判断是由何种疾病所导致，通常需要结合病史以及其他的检查结果才有意义。
乳酸脱氢酶活力测定实验结果分析
乳酸脱氢酶活力测定实验结果分析
乳酸脱氢酶（LDH）是一种酶类，通常存在于心、肝、脾、肺、肌肉等组织中，也常用于检测心肌梗死、肝脏疾病、肺癌等疾病的确诊。
LDH活力的测定通常是通过采集患者血液样本，使用乳酸脱氢酶试剂盒检测LDH酶活力的浓度。
LDH的正常参考值通常是在140-280 U/L之间，但是要根据实验室标准和不同疾病诊断标准进行具体分析。
如果LDH活力高于正常参考值，则可能提示存在患有相关疾病的可能性。
需要注意的是，LDH活力仅可作为辅助诊断的指标之一，需要综合其他的体征、症状和检测结果进行综合分析，最终做出正确的诊断结论。
因此，如果你收到了LDH活力的实验结果，最好咨询医疗专业人士进行详细解读。
乳酸脱氢酶活力测定
结果异常可能原因及解决方案
1 2 3
样本问题
样本中可能存在干扰物质，如溶血、高血脂等， 导致结果偏高或偏低。解决方案包括重新采集样 本、使用抗干扰试剂等。
试剂问题
试剂质量不佳、过期或保存不当等可能导致结果 异常。解决方案包括更换试剂、检查试剂有效期 和保存条件等。
操作问题
操作不规范、加样不准确等也可能导致结果异常。 解决方案包括加强操作培训、使用加样器等。
荧光分析法
利用荧光探针与LDH结合产生荧光信号的原理，实现对LDH活力的高灵敏度、高选择性检 测。该方法具有操作简便、快速准确等优点，有望在生物医学领域得到广泛应用。
微流控芯片技术
将LDH活力测定过程集成到微流控芯片中，实现自动化、高通量的检测。该技术可大大提 高检测效率，降低人为误差，为LDH活力测定提供新的解决方案。
05 实验注意事项与安全防护
操作规范和安全防护措施
严格遵守实验室规章制度，确保实验环境整洁、有序。 使用前检查实验器材是否完好，如有破损应及时更换。
穿戴实验服、手套、护目镜等个人防护用品，避免直接 接触化学试剂。
遵循实验操作步骤，避免操作失误导致试剂飞溅或仪器 损坏。
废弃物处理方法和环保要求
废弃物应分类收集，严禁 将不同性质的废弃物混合 处理。
挑战
在实际应用中，乳酸脱氢酶活力测定仍面临 一些挑战，如样本处理复杂、干扰物质多、 仪器设备昂贵等。此外，不同来源和类型的 样本中LDH活力水平可能存在差异，这给准 确测定带来了一定难度。因此，未来需要继 续加强研究，探索更加简便、快速、准确的
LDH活力测定方法。
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VS
加样顺序
在反应体系中依次加入辅酶、底物、待测 样品和缓冲液，混合均匀后立即启动反应 。
乳酸脱氢酶(ldh)测定原理
乳酸脱氢酶(ldh)测定原理Lactate dehydrogenase (LDH) is a crucial enzyme found in the cells of the body, which plays an essential role in energy production. 乳酸脱氢酶（LDH）是人体细胞中的一种关键酶，对能量生产起着至关重要的作用。
This enzyme is responsible for the conversion of lactate to pyruvate, a process that is essential for the production of energy during both aerobic and anaerobic conditions. 这种酶负责将乳酸转化为丙酮酸，这一过程对于有氧和无氧条件下的能量产生都至关重要。
LDH levels in the body can be measured to gain insight into various health conditions. 可以测量体内的LDH水平来了解各种健康状况。
The LDH test is commonly used to diagnose and monitor tissue damage, such as in the case of heart attacks, liver disease, anemia, and cancer. LDH测试常用于诊断和监测组织损伤，比如心脏病发作、肝病、贫血和癌症。
It is also used to monitor the progress of certain treatments and to assess the severity of conditions affecting the heart, liver, or kidneys. 还用于监测某些治疗的进展，并评估影响心脏、肝脏或肾脏的疾病的严重程度。
LDH文档,乳酸脱氢酶测定试剂盒(LDH)检测标准操作规程
1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒（IFCC法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆乳酸脱氢酶(LDH)的测定。
3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃～8℃有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理LDH 催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，NADH 的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。
LDH乳酸+ NAD+ + H2O 丙酮酸+ NADH + H+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围115～220 U/L （注：各实验室应有自己的参考范围。
）4.5 方法评价线性范围：4～1000U/L内。
当样本测定值超过上限时，应将样本用生理盐水稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
精密度：批内变异系数：≤ 3.0%；批间变异系数：≤5.0%。
分析灵敏度：本试剂盒的检测低限不高于4 U/L。
血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定-检验科生化室作业书
血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定1.实验原理VITROSLDH试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
本法测LDH采用丙酮酸和NADH作底物以产生乳酸和NAD+。
将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。
乳酸脱氢酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+。
用反射强度变化测出NADH的氧化率，再将其转化成乳酸脱氢酶的活力。
测定方式：速率法波长：340nm测试时间和温度：37℃约5分钟反应过程：LDH丙酮酸+NADH+H+———————→乳酸+NAD2.标本：2.1病人准备：无特殊。
2.2样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。
2.3标本采集与处理：Vitros测试血清和血浆的结果是一致的。
而其它一些方法由于在低速离心时血浆中血小板造成的污染，会使血清和血浆的测试结果有明显差异。
由于VitrosLDH干片对完整血小板内的LDH不敏感，因此对比方法的LDH结果会与Vitros肝素抗凝血浆的测试结果不一致。
样品采集后1小时内离心，然后吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3.标本的存放：血清、血浆室温下最多2天；不可冷冻保存。
4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5.标本拒收的标准：污染、溶血标本不能使用。
6.试验材料：6.1测试AST所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit3；Vitros特制质控液；Vitros7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.1试剂组成：干片成分：反应成份是NADH和丙酮酸钠。
其它成份有聚合物颗粒，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，聚合物交叉连接剂和稳定剂。
干片标记：试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.2试剂准备从冰箱中取出干片盒，在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态18～28℃。
血清乳酸脱氢酶测定
血清乳酸脱氢酶测定1. 实验原理LDHL-乳酸+ NAD ————→丙酮酸+ NADH在波长340nm处测定NADH生成速率，计算出LDH活力。
2. 标本：2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
避免溶血。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。
3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。
4. 标本运输：冰冻条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：中生乳酸脱氢酶试剂盒（试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成试剂1：2×65 ml 试剂2:1×70 ml06.1.2 试剂准备：试剂为双液即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
试剂必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂空白吸光率A340nm(1.0cm)＞0.6，或有混浊和可见颗粒时，请不要再使用。
6.1.5 注意事项：试剂请勿直接接触皮肤、眼睛，如有接触，请用大量清水清洗。
请勿吞服。
6.2 校准品：使用OLYMPUS公司提供的多项校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。
8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪操作规程.SOP 文件。
9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
血清乳酸脱氢酶LDH速率法测定
血清乳酸脱氢酶（LDH）速率法测定1. 实验原理VITROS LDH试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
本法测LDH采用丙酮酸和NADH作底物以产生乳酸和NAD+。
将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。
乳酸脱氢酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+。
用反射强度变化测出NADH的氧化率，再将其转化成乳酸脱氢酶的活力。
测定方式：速率法波长：340nm测试时间和温度：37℃约5分钟反应过程：LDH丙酮酸+ NADH + H+———————→乳酸+ NAD2. 标本：2.1 病人准备：无特殊。
2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。
2.3 标本采集与处理：Vitros测试血清和血浆的结果是一致的。
而其它一些方法由于在低速离心时血浆中血小板造成的污染，会使血清和血浆的测试结果有明显差异。
由于Vitros LDH干片对完整血小板内的LDH不敏感，因此对比方法的LDH结果会与Vitros肝素抗凝血浆的测试结果不一致。
样品采集后1小时内离心，然后吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多2天；不可冷冻保存。
4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5. 标本拒收的标准：污染、溶血标本不能使用。
6. 试验材料：6.1 测试AST所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit3；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.1 试剂组成：干片成分：反应成份是NADH和丙酮酸钠。
其它成份有聚合物颗粒，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，聚合物交叉连接剂和稳定剂。
干片标记：试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.2 试剂准备从冰箱中取出干片盒，在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态18～28℃。
乳酸脱氢酶测定标准操作程序
乳酸脱氢酶测定标准操作程序1.摘要乳酸脱氢酶常用于心机梗塞、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中LDH的浓度。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定LDH浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒采用的是乳酸法。
5.原理乳酸氧化成丙酮酸（L→P），辅酶Ⅰ（NAD+）还原成还原辅酶Ⅰ（NADH）生成，其反应产生的NADH引起340nm处吸光度的上升，吸光度上升的速率与LDH的活力呈正比关系。
+++NADHNADL LDH丙酮酸乳酸-H−→+−+−6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：Tris-HCl缓冲液、L(+)乳酸锂、MES缓冲液、NADH类似物、防腐剂7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：此项目只需要用理论因子并做空白校准即可。
以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》8.5室间质评：分别参加某地区室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。
血清乳酸脱氢酶DGKC推荐方法测定-检验科生化室作业书
血清乳酸脱氢酶DGKC推荐方法测定实验原理德国临床化学学会(DGKC)推荐的连续监测法[3]。
LDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，NADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活力成正比。
LDHL-乳酸+NAD+丙酮酸+NADH+H+2.标本：2.1病人准备：无特殊。
2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3.标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<2%。
4.标本运输：常温条件下保存运输。
5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6.实验材料6.1试剂申能LDH测定试剂盒（14132071701试剂1（6×64ml），试剂2（6×16ml）6.1.1试剂组成试剂1（R1）：N-甲基-右旋糖酐缓冲液325mmol/LL-乳酸50mmol/L试剂2（R2）：NAD+10mmol/L6.1.2试剂准备试剂为即用式。
6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4变质指示当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5注意事项试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2校准品使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3质控品具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
生化实验报告血乳酸(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在通过生化方法测定血乳酸浓度，了解机体代谢状态，为临床诊断提供参考。
二、实验原理乳酸脱氢酶（LDH）是一种糖酵解酶，广泛存在于机体所有组织细胞的胞质内。
在缺氧或无氧条件下，乳酸脱氢酶催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，生成乳酸和NADH。
通过测定血中乳酸的浓度，可以反映机体代谢状况和缺氧程度。
三、实验材料1. 标本：静脉血5ml2. 试剂：乳酸测定试剂盒（包括乳酸脱氢酶、NADH、NAD+、缓冲液等）3. 仪器：全自动生化分析仪、恒温水浴箱、移液器、试管等四、实验方法1. 取静脉血5ml，加入含有抗凝剂的试管中，混匀。
2. 按照试剂盒说明书进行操作，将血样加入反应管中，加入乳酸测定试剂盒中的其他试剂，充分混匀。
3. 将反应管放入恒温水浴箱中，在37℃下孵育一定时间。
4. 取出反应管，用全自动生化分析仪测定血乳酸浓度。
五、实验结果本次实验测定血乳酸浓度为2.5mmol/L。
六、结果分析1. 正常人血乳酸浓度为1.0-2.5mmol/L，本次实验结果在正常范围内。
2. 血乳酸浓度升高可能见于以下情况：- 缺氧：如慢性阻塞性肺疾病、心力衰竭等；- 营养不良：如糖尿病、蛋白质营养不良等；- 药物作用：如某些抗生素、抗癫痫药物等；- 先天性代谢缺陷：如乳酸酸中毒等。
七、讨论1. 本实验通过测定血乳酸浓度，可以初步了解机体代谢状态和缺氧程度。
但在实际临床应用中，需要结合患者的病史、症状、体征和其他检查结果进行综合判断。
2. 影响血乳酸浓度的因素较多，如药物、饮食、运动等，因此在实验过程中应严格控制实验条件，确保实验结果的准确性。
3. 血乳酸检测作为一种无创、简便、快速的方法，在临床诊断中具有广泛的应用前景。
八、结论本次实验成功测定了血乳酸浓度，为临床诊断提供了参考。
在今后的工作中，我们将进一步研究血乳酸检测在临床诊断中的应用价值。
九、注意事项1. 实验操作过程中，应严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性。
血清乳酸脱氢酶(LDH)水平对结直肠癌患者的检测意义
血清乳酸脱氢酶(LDH)水平对结直肠癌患者的检测意义摘要：目的：研究血清乳酸脱氢酶(LDH)水平对结直肠癌患者的检测意义。
方法：选取2022年本院收治的结直肠癌患者100例，对全部患者实施LDH测定，评估检测意义。
结果：LDH水平测定灵敏度是：0.9782、特异度是：0.75、准确度是：0.96、误诊率是：0.25、漏诊率是：0.0217、阳性预测值是：0.9782、阴性预测值是：0.75、假阳性率是：0.25、假阴性率是：0.0217、正确指数是：0.7282。
结论：运用LDH测定方式对结直肠癌诊断，价值高，可运用。
关键词：结直肠癌；血清乳酸脱氢酶(LDH)水平；诊断效能结直肠癌疾病的起病较为隐秘，早期患者症状表现并不显著，无特异性，大多数患者会有便秘、腹部不适以及乏力等表现，容易被患者所忽略，占比为20%-30%的患者在入院接受诊断的时候，疾病已经进展到中晚期，使得预后效果不佳。
临床中，对结直肠癌诊断中方式多种，包含病理活检诊断方式、影像学检查诊断方式、粪便隐血试验诊断方式、实验室诊断方式等，其中LDH水平测定为具备价格低廉性、无创性，采集简单，患者接受度高[1-2]。
此研究将分析该诊断方式运用价值，如下：1.一般资料与方法1.1一般资料选取我院2022年确诊的100例结直肠癌患者作为研究对象，其中男性54例，女性46例，年龄在50-72岁之间，平均（61.24±2.56）岁。
1.2方法抽取患者清晨空腹静脉血液5ml，运用酶速率法检测患者血清LDH水平。
1.3观察指标及评价标准分析不同诊断效能：敏感度、特异度、准确性、误诊率、漏诊率、阳性预测值、阴性预测值、假阳性率、假阴性率、正确指数。
1.4数据处理用SPSS21.0软件进行统计，计数资料用（n/%）表示、行x2检验，计量资料用均数±标准差（±s）表示、行t检验。
P＜0.05有统计学意义。
2.结果2.1 诊断结果LDH水平测定灵敏度是：0.9782、特异度是：0.75、准确度是：0.96、误诊率是：0.25、漏诊率是：0.0217、阳性预测值是：0.9782、阴性预测值是：0.75、假阳性率是：0.25、假阴性率是：0.0217、正确指数是：0.7282，见表1。
检验科生化乳酸脱氢酶测定的程序
乳酸脱氢酶测定的程序【目的】体外检测血清中乳酸脱氢酶（LDH ）含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理复星长征乳酸脱氢酶试剂（L →P ）以Gay 等方法为基础，以乳酸为底物，测定原理如下：NADH LDH L +−−−→−+-+丙酮酸乳酸NAD乳酸脱氢酶催化乳酸氧化为丙酮酸，在此过程中，NAD +被还原为NADH ，通过在340nm 处监测吸光度上升的速率，即可测得样本中乳酸脱氢酶的活力。
二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司LDH-L 试剂盒，为液体双试剂，其各组分如下：试剂1（R1）：乳酸锂62.5mmol/L 氯化钾 190.0mmol/LTris 缓冲液100.0mmol/L 试剂2（R2）：Tris 缓冲液100.0mmol/L NAD +30mmol/L2.校准要求 2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。
2.2校准间隔2.2.1试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
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•血清LDH活性的测定
试剂（ml） 血清（1:5稀释） 乳酸钠缓冲液 37℃水浴3min NAD＋ 蒸馏水 37℃水浴15min 2、4-二硝基苯肼 0.4mol/L NaOH 0.5 0.5 5 0.1 0.1 测定管 对照管
0.05
0.5
0.05
0.5
37℃水浴15min
5 混匀，室温5min后440nm比色，以蒸馏水调0,读取两管A。以测定 管A－对照管A的差值查标准曲线，求出LDH的活力单位.
单位定义
以100ml标本作用15min生成1μg分子丙酮酸为1单位。
参考值
血清100-300U/L
注意事项
1.
2.
3.
4.
LDH只作用于L－乳酸钠，只用L－乳酸钠用量减办； 草酸盐抑止LDH活力，不能用草酸钾作为抗凝剂的抗凝血 来测定； 不能用溶血标本； 比色应该在5-15min内完成，否则A降低。
乳酸脱氢酶的同工酶
人体心、肝和骨骼肌LDH同工酶谱
组织器官
心 肝 骨骼肌 正常血清
LDH1
35-70 0-8 1-10
27.1±2.8
LDH2
28-45 2-10 4-18 34.7±4.3
LDH3
2-16 3-33 8-38
20.9±2.4
LDH4
0-6 6-27 9-36
11.7±3.3
LDH5
临床意义
LDH虽广泛存在于人体的各组织中。存在于几乎所有组织中， 以肝、肾、心肌、骨骼肌、胰腺和肺中为最多。这些组织中的 LDH的活力比血清中高1000倍。所以当少量组织坏死时，该酶即 释放血而使其血液中的活力升高。测定此酶常用于对心梗、肝 病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。心脏以LDHl为主;而横纹肌以及 肝脏、血小板以LDH5为主;肺、脾以LDH3为主，脑、肠、淋巴与 内分泌腺也含有LDH 3。由于LDH同工酶分布有明显的组织特异 性，故可根据这一特异性来协助诊断疾病。成年健康人 LDH2>LDHl>LDH3> LDH4>LDH5或LDH2>LDH3>LDHl>LDH4>LDH5。
1
2 3
心肌梗死酶谱
正常酶谱
肝病酶谱
4
5
心肌梗死和肝病病人血清LDH同工酶谱的变化
CH3 H OH COOH
H 3C
+
NAD+
LDH
O COOH
+ NADH•H+
NADH•H++ PMS•H2 +
PMS NBT
NAD+ + PMS
PMS•H 蓝色化合物
2
+ NBT•H2
当 LDH 同工酶区带在琼脂糖凝胶板上分开后，给NAD+,
EXPERIMENT 6
血清乳酸脱氢酶测定
实验目的
学习血清LDH同工酶的测定 学习血清LDH活性的测定
实验原理
来源于同一个体或组织，能催化同一反应，而蛋白 结构不同的酶称为同工酶(isoenzyme) 。同工酶的蛋白 结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。因此可 用电泳或其它方法将它们分离开。
0-5 30-8 40-97
5.7±2.9
（ 占总 LDH活性的百分比）
a
2
1
2
b
3 1 4 酶活性 5 酶活性 3 4 5
迁移位置 (a)
迁移位置
LDH同工酶电泳图谱
(b)
（a）正常人LDH同工酶电泳图谱 （b）心肌梗塞病人血清LDH同工酶电泳图谱
*生理及临床意义
在代谢调节上起 着重要的作用； 酶 用于解释发育过 活 程中阶段特有的代谢 性 特征； 同工酶谱的改变 有助于对疾病的诊断； 同工酶可以作为 遗传标志，用于遗传 分析研究。
(1)正常LDHl、LDH2见于心肌损伤，如心肌梗塞、心脏手术、心脏移 植排异、充血性心衰、心肌炎。心梗病人出现症状后12一18小时血 清LDH升高，约在第3天达到高峰，7一18天才恢复正常。故对诊断发 病后数天才就医的病人特别有价值。LDHl>LDH2还见于肾梗塞、肾病， 巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血。 (2)恶性肿瘤以LDH3增高为主，LDH3明显大于LDHl，总LDH越高预后 越差。LDH2和LDH3增高见于肺癌、粒细胞白血病，LDH3和LDH4增高 见于淋巴瘤、胶原病和止血紊乱 (血小板增多症、凝血活酶释放)。 (3) LDH5增高见于骨骼肌损伤和肝胆疾病，如杜氏肌营养不良、横 纹肌溶解症、肌肉外伤，LDH5>LDH4见于肝损伤 (肝炎、肝硬化、肝 癌、心衰、肝淤血)，阻塞性黄疸时LDH 4与LDH5均增高，但以LDH4 最为明显。
底物（乳酸）、PMS 和 NBT，同工酶区带即呈蓝紫色。
二、操作步骤
1、制备0.5%琼脂糖凝胶板；
2、上样12-15μl；
3、120V、90min电泳；
4、显色与保温；
注：显色剂应临时配制并避光保存，保温Байду номын сангаас应避光进行。
-
点样孔(样品端接 负极)
LDH5 1.4% LDH4 LDH3 LDH 2 3.9% 18.5% 42.8%
量少肉眼观察不到
LDH1 33.4%
溴酚蓝电泳 指示剂
+
血清LDH活性的测定
原理
丙酮酸在碱性条件下和2、4-二硝基苯肼反应生成 的2、4-二硝基苯腙在碱性条件下呈棕色，颜色的深浅 和丙酮酸浓度成正比。然后与丙酮酸标准液比较，可 求得LDH活性单位。
操作
标准曲线的绘制
试剂（ml） 丙酮酸标准液 乳酸钠缓冲液 空白 － 0.5 1 .025 .475 2 0.05 0.45 3 0.1 0.4 4 0.15 0.35 5 0.2 0.3 6 0.25 0.25
蒸馏水
2、4-二硝基苯肼 0.4mol/L NaOH
0.15
0.5 5
0.15
0.5 5
0.15
0.5 5
0.15
0.5 5
0.15
0.5 5
0.15
0.5 5
0.15
0.5 5
37℃水浴15min
相对应LDH单位
0
125
250
500
750
1000
1250
混匀，440nm比色，以空白管调0,读取各管A，以A对LDH单位作图，绘 制标准曲线。
血清LDH同工酶的测定
乳酸脱氢酶（LDH）同工酶，它们都能催化乳酸脱氢产 生丙酮酸，经电泳分离后有5个同工酶区带。LDH由2类 亚基组成，单个亚基MW为35000,总分子量为140000。
H H H H LDH1 (H4) H H H M LDH2 (H3M) H H M M LDH3 (H2M2) H M M M LDH4 (HM3) M M M M LDH5 (M4)