基因工程期末复习题

2012级基因工程复习题

名词解释

1.限制酶：是由细菌产生的一类能特异识别双链DNA中的特定碱基序列，并在识别位点切割磷酸二酯键的核酸内切酶。

2.同尾酶：来源不同、识别序列不同，但切割后能产生相同黏性末端的限制性核酸内切酶。3•外切核酸酶：一类从多核苷酸的末端开始逐个降解核苷酸的酶。

4.同切点酶：一类来源于不同微生物、能识别相同序列的限制性核酸内切酶。

5.反转录酶：是依赖于RNA的DNA聚合酶，是分子克隆中重要的核酸酶之一。

6.新裂酶：识别序列相同、但切割位点与原型酶不同的酶。

7.星号活性：是指当条件改变时，许多酶的识别位点会改变，导致识别与切割序列的非特异性的现象。

8.质粒：存在于多种宿主细胞、独立于染色体外的可以自主复制闭合环状的DNA分子。

9.松弛型质粒：其复制宿主不偶联，每个细胞中有几十到几百个拷贝数的质粒。

10.隐蔽质粒：不赋予寄主细胞任何表型或者究竟赋予寄主细胞何种表型，迄今仍未清楚，因此特称这类质粒为隐蔽质粒。（自己搜的，正确性不明确）

11.人工染色体载体：染色体具有复制功能，利用染色体的复制元件来驱动外源DNA片段复

制的载体。

12.表达载体：可携带外源DNA片段进入宿主细胞进行复制并进行转录、翻译的载体，即用于在宿主细胞中高水平表达外源蛋白质的载体。

13.克隆载体：克隆和运载目的基因并转移到宿主细胞中进行复制和扩增的载体。

14.平末端：限制性核酸内切酶在识别序列的对称轴上切割形成的片段末端。

15.黏性末端：是指DNA分子在限制酶的作用之下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结构，

它们能够通过互补碱基间的配对而重新环化起来。

16.反向PCR由已知的一段DNA序列向两端扩增未知核苷酸序列并能快速获得未知序列的PCR操作。

17.PCR平台效应：PCR反应经过一定数量的循环后，随着产物的对数积累趋于饱和，DNA 片段不再呈指数积累，而进入线性增长期或静止期的过程。

18.简并序列：同一种氨基酸具有两个或更多个密码子对应，即一段氨基酸序列可以有多个可能的编码序列。

19.终止子：是为转录提供终止信号的一段DNA序列。

20.目的基因：基因工程中克隆的目标DNA分子。

21.基因表达：遗传信息从DNA转到mRNA再到蛋白质的过程。

22.RNAi:双链RNA寸基因表达的阻断作用称为RNA干扰。

23.感受态细胞：处于能吸收外源DNA分子的生理状态的细胞。

24.简并引物：用来编码一段短肽不同碱基序列的混合物。

25.增强子：是远距离调节启动子并提高转录效率的一段DNA序列。

26.启动子：是RNA聚合酶识别、结合并起始转录的一段DNA序列。

27.沉默子：是远距离调节启动子并降低转录效率的一段DNA序列。

28.盒式诱变：是一种定点突变技术，将靶基因的一段DNA删掉，并用人工化学合成所具有的突变核苷酸的双链寡核苷酸片段取代的技术。

29.基因治疗：指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的。

30.CDNA文库：利用某种生物的总mRN合成cDNA再将这些cDNA与载体连接，转入细菌

细胞中进行保存和扩增，称cDNA文库。

31.转化：细菌获得外源质粒DNA产生新的遗传性状的过程。

32.基因漂移：指转基因生物中的目的基因在生物个体、种群甚至物种间自发移动是过程。

33.实质等同原则：是安全评价的起点，是指以有安全食用历史的传统食品为基础，要求转基因食品和它所替代的传统食品至少要同样安全。

34.切口：两个相邻核苷酸之间缺少一个磷酸二酯键

35.裂口：缺少一个或几个核苷酸

36.MCS :多克隆位点

37.YAC:酵母人工染色体

38.MAC:哺乳动物人工染色体

39.TAC:可转移人工载体

填空题

1.基因工程常用的DNA连接酶有两种：一个是（大肠杆菌）DNA连接酶，由NAD供能, 另一个是

（T4）DNA连接酶，由ATP供能。

2.在DNA保存液中，常加一滴氯仿，主要是起（有效防止细菌和核酸的污染）的作用。

3.对于双链DNA分子，在一条链上失去了一个磷酸二酯键称为（切口），失去一段单链称为（缺

口）。

4.限制性内切核酸酶的命名原则，第一个大写字母取自（微生物属名）的第一个字母，第

二、三个字母取自（种名）的前2个字母，第四个字母用株名表示。

5.在Lacl标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显（白）色，为邙阳性）克隆，未插入基因的克隆显（蓝）色，为（阴）性克隆。

6.基因序列经碱基替代、缺失或插入后，可使遗传信息产生三种不同的后果，分别是（同义突变）、（错义突变）、和无义突变。

7.在分离DNA寸，要戴手套操作，原因是手上有（核酸酶）。

8.乙醇沉淀DNA勺原理是（乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，是理想的沉淀剂。）

9.依据质粒自身传递的性质可以分为（结合型）质粒和非结合型质粒，依据可否引起宿主细胞出现新性状分为显性质粒和（隐性质粒），根据质粒的复制性可分为严紧型质粒和

（松弛型质粒）。

10.抽提含pBR322系列质粒的细菌前，需在培养基中加入一定浓度的氯霉素，此氯霉素的作用是（抑制蛋白质合成，阻止细菌染色体复制）。

11.基因工程众多的工具酶可粗略分为（限制酶）、（连接酶）、（聚合酶）、（修饰酶）4类。

12.核酸探针可分为2类：DNA探针和RNA探针。其中DNA探针又分为（单链DNA探针）和（双链DNA探针）

13.E.coli感受态出现的生理时期是（对数生长期）

14.在质粒pBR322的抗四环素基因插入一个外源DNA转化细菌后，就不可以再用四环素筛选出这种细菌了，这种现象称为（插入失活）。

15.由于不同构型的DNA插入EB的量不同，电泳时迁移率也不同，SCDNA的泳动速度最（快）,