(3)袁晨燕-2017年CLSI更新内容解读

Table1A-1C 药物推荐分组
• 删除一些过时的老药，调整药物分组。
2010年至今删除的药物折点
Table 2A-1 肠杆菌科-沙门氏菌属
喹诺酮类“非沙 门氏菌属”折点
（37）评估沙门氏菌属对氟喹诺酮类的敏感或耐药性的首选试验是环丙沙星MIC试验。条件允许时也 可以进行左氧氟沙星或氧氟沙星的MIC试验。如果环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星的MIC试验，和环 丙沙星的纸片扩散试验都不能做时，培氟沙星纸片扩散试验可用于预测环丙沙星敏感性的替代试验。 （38）单个试验不能检测沙门氏菌属所有已知的喹诺酮类耐药机制。
Table4-5 质量控制
问题排除指南
超出质控范围通常是污染或使用错误质控菌株的结果，纠正措施首先包 括使用质控菌株的纯菌落或新鲜传代菌株重复试验操作。
附录A 建议确认耐药（R）中介（I）或非敏感（NS）药敏试验结果 和细菌鉴定结果
脆弱拟杆 菌菌群
甲硝唑中介或耐药 碳青酶烯类中介或耐药 如果在本机构少见，需确认鉴定和药敏结果。 与本单位感控部门联系确定是否需要特别报告 程序或采取进一步行动 与当地公卫部门联系确定向其报告分离菌株， 以及合适将分离菌株移交公共卫生实验室。
mecA PCR and/or PBP2a tests when requested to perform AST on atypical isolates of S. aureus.
Feb;55(2):485-494. Miller et al. J Clin Microbiol. 2017
非表皮凝固酶阴性葡萄球菌
表格使用说明
• 折点和解释分类定义:
2016年使用“解释标准”
2017年使用“解释分类”和“折点”
•
A．折点-----用于将微生物分为敏感(S)、剂量依赖性敏感（SDD）、中介 (I)、非敏感（NS）和耐药(R)的最小抑菌浓度（MIC）或者抑菌环直径。注： 1. 通过敏感试验得到的MIC值或抑菌环直径可以根据折点进行解释。2. 由于 折点的建立基于体内外丰富的药理学和临床数据，被认为能有力的预测临床 结果。3. 也称为“临床折点”。 4. 见解释分类。
Table 2H-2 草绿色溶血链球菌
（6）青霉素MIC ≤0.125 μg/ml 等同于青霉素MIC ≤0.12 μg/ml ，应该释为 敏感。实验室应该将MIC ≤0.125 μg/ml报告为≤0.12 μg/ml 。
Etest 试验和Liofilchem MTS 读数进位规则：位于两 个稀释倍数之间的值，舍弃 小数点后第三位，然后进位 至上一个稀释倍数。
不敏感
抗菌药物 氨苄西林1 万古霉素2
1肠杆菌科
纸片含量 S 10μg 30μg
2
解释分类和抑菌环直径折点 （最近的整毫米数） SDD I 14-16 R ≤13 S ≤8 ≤1 ≥17 ≥17
解释分类和MIC折点 （μg/ml） SDD I 16 R ≥ 32 -
<17 -
>1-
肺炎链球菌
非敏感
流行病学界值 Epidemiological cut off value ECV
BMHA（MHA加5%羊血）上 进行头孢西丁纸片扩散 法时，有假敏感结果。
使用头孢西丁诱导生 长的菌落，用商品化 试剂检测PBP2a有较高 的敏感性和特异性。
Janet A. & Audrey H.
基于这些数据，我们推荐当要求对金葡菌非典型分离株进行药敏试验时实验室 仅做mecA PCR和/或PBP2a检测。On the basis of these data, weBaidu Nhomakorabearecommend that laboratories perform only
≤ 0.25
报告苯唑西林敏感 S
苯唑西林MIC （μg/ml) 0.5-2.0
检测mecA、 或PBP2a、或 头孢西丁纸片 扩散法
阴性
阳性
≥4
报告苯唑西林耐药 R Janet A. & Audrey H.
Table 2F-2 淋病奈瑟菌ECVs
阿奇霉素
用于淋病奈瑟菌
MIC分布数据来自CDC淋球菌检测项目 https://www.cdc.gov/std/GISP/
Table 2C 葡萄球菌属
小菌落变异金黄色葡萄球菌
（14）头孢西丁MIC和纸片扩散法试验使用非 CAMHB和未添加MHA培养基不能可靠的检测在这些 培养基上不生长的金黄色葡萄球菌分离株（如小 菌落变异）的mec-A介导的耐药性。应使用诱导 生长的菌落做PBP2a检测（如：BMHA或血琼脂平 板,5%CO2,24小时孵育，取头孢西丁纸片抑菌环 边缘的菌落）或者检测mec-A基因。mec-A阴性或 者PBP2a阴性或者头孢西丁敏感的菌株能报告为 苯唑西林敏感。
目前CLSI ECVs
抗菌药物 阿奇霉素 阿奇霉素 黏菌素 万古霉素 WT: 野生型， NWT： 非野生型 菌种 淋病奈瑟菌 福氏志贺菌 宋内志贺菌 产气肠杆菌，阴沟肠杆菌，大肠埃希菌，肺 炎克雷伯菌，解鸟氨酸拉乌尔菌 痤疮丙酸杆菌 ECV (μg/ml) WT ≤1 ≤8 ≤16 ≤2 ≤2 NWT ≥2 ≥16 ≥32 ≥4 ≥4
（15）苯唑西林的MIC折点 可能高估了一些凝固酶阴性 葡萄球菌的耐药性，因为一 些苯唑西林MIC值介于0.52μg/ml的非表皮葡萄球菌 菌株缺乏mecA基因。对于非 表皮凝固酶阴性葡萄球菌的 严重感染，当苯唑西林MIC 值介于0.5-2μg/ml时，检 测其mecA、PBP2a 或者头孢 西丁纸片扩散试验是合适 的。分离株mecA阴性或者 PBP2a阴性或者头孢西丁敏 感可以报告为苯唑西林敏 感。
谢 谢！
-
≤2
≥4
仅用于产气肠杆菌，阴沟肠杆菌 ，大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌和 解鸟氨酸拉乌尔菌
Janet A. & Audrey H.
Table 2B-1 铜绿假单胞菌
• 取消黏菌素和多粘菌素B纸片扩散法折点。 • 修改黏菌素MIC折点，增加对黏菌素的注释。
2016年
2017年
（15）黏菌素（甲磺酸 盐）通常应给予负荷剂 量和推荐最大剂量，并 且与其它抗菌药物联用
敏感 s 中介 I 剂量依赖性敏感 SDD 非敏感 NS 耐药R
微生物敏感性依赖于该患者的给药剂量方 案，提高剂量或/和增加频率，能达到可能 的临床疗效。SDD概念包含在中介范围 内，但是报告中介时容易被临床和微生物 工作者忽视。
非敏感(Nonsusceptible)
• 不存在或者很少出现耐药菌株，所以仅设立了敏感折点，分离株的抑 菌环直径小于或者MIC值高于敏感折点时，报告为“非敏感”。 • 分离菌株报告为非敏感时，不一定意味着存在耐药机制。MIC值高于 敏感折点的分离株，也有可能是在折点设定之后才出现的野生株。 • 在描述菌株/药物解释分类中为中介和耐药的时候不可以使用非敏感 （Nonsusceptible），分离株在“中介”或“耐药”分类中，可以被称 为不敏感 “Not Susceptible”。
厌氧菌药敏试验指征
Audrey N. Schuetz Clin Infect Dis. 2014 ;59(5):698-705.
附录B 固有耐药
替 四 加 环 环 素 素
摩氏摩根菌
附录E 用于建立敏感或剂量依赖性敏感折点 的给药方案
批准的药物的敏感(S)或剂量依赖性敏感(SDD)折点的建立都基于特定的给 药方案，应将这些给药方案信息分享给临床药师、感染疾病诊疗组以及提 供剂量推荐方案的其它专业人员。
黏菌素/铜绿假单胞菌 纸片扩散法区分度差！
Jerke et al. 2016. CMN. 38:69
≥4 R
≤0.25 S
MIC μg/ml
Table 2B-2 鲍曼不动杆菌
• 增加对黏菌素的注释。
2016年
2017年
（5）黏菌素（甲磺酸盐）通 常应给予负荷剂量和推荐最 大剂量，并且与其它抗菌药 物联用。 （6）(黏菌素）仅适用于鲍 曼不动杆菌复合群。
mCIM结果解释
碳青霉烯酶阴性：抑菌圈直径≥19mm。 不确定结果：抑菌圈直径为16-18mm，无法判断是否存在碳青霉烯酶*
碳青霉烯酶阳性：抑菌圈直径为6-15mm ,或直径为16-18mm抑菌圈内有散在菌落。
阴性质控BAA1706 阳性对照BAA1705 mCIM结果阳性
* 1.对于不确定结果： 检查待检菌株和大肠埃希菌ATCC25922指示株的纯度。 做纸片扩散质控试验检查美罗培南纸片是否合格。 重复试验。 如果重复试验结果依然不确定，考虑检测碳青酶烯酶基因。
正常菌落
小菌落变异
“非典型金黄色葡萄球菌”：菌落变小，色素减 少，溶血性和凝固酶活性下降。在未经离子校正 MHB和未添加MHA上不生长，可在普通血琼脂 上生长，连续培养能恢复正常菌群。 可分离自囊性纤维化 患者，整形外科患 者。
Miller et al. J Clin Microbiol. 2017 Feb;55(2):485-494.
•
B．解释分类----解释分类来自微生物学特征、PK/PD参数、临床结局数据 （可获得时）。注意：1. 通过敏感试验得到的MIC或抑菌环直径可以根据折 点进行解释。2. 见折点，例如：在CLSI M23文件中建立的MIC或抑菌环直径 折点或者分类解释可以分为敏感S、中介I和耐药R（在适当的条件下还包括剂 量依赖性敏感SDD和非敏感NS)。
Table 3D 改良碳青酶烯灭活实验（mCIM） 检测肠杆菌科细菌产生的碳青酶烯酶
• 若使用新的碳青酶烯类折点不需要常规检测碳青酶烯酶。 • 仅用于感染控制和流行病学研究。
M100-S20 2010 年的折点 需要检测碳青酶烯酶！
CRE的监测
M100-S27 p107
最有效的表 型检测试验
试验方 法：
喹诺酮类“沙门 氏菌属”折点
（40）环丙沙星敏感 或耐药结果报告可以 基于培氟沙星药敏结 果。培氟沙星不能检 测aac(6’)-1b-cr介导的 沙门氏菌属耐药。美 国没有培氟沙星纸 片。
阿奇霉素细胞内浓度高（>100倍血清浓度）可用于治疗沙门氏 菌，志贺氏菌的经验用药
阿奇霉素
（33)仅用于伤寒沙 门氏菌：折点基于 MIC分布数据和有限 的临床数据。福氏志 贺菌和宋内志贺菌见 Table 2A-2
1. 1ul接种环挑取过夜培养的试验菌株; 2.悬于2ml肉汤加美罗培南纸片; 3.孵育4小时; 4.ATCC25922接种MHA平板; 5.10ul接种环取出美罗培南纸片（A）； 6.将纸片贴于试管内壁并挤去多余水分(B); 7.同一接种环取出纸片（C） 8.并贴于MHA平板上（D）; 9.孵育过夜。 10. 读取结果
2017年CLSI-M100文件更新要点
东南大学附属中大医院检验科 袁晨燕
http://clsi.org/m100
更新总结
2017主要更新内容概括
• • • • • 表格使用说明：折点和解释分类定义、流行病学界值（ECVs)。 Table1A-1C：删除过时的药物，调整药物报告分组。 Table2A-2J：新增ECVs,黏菌素折点变化，葡萄球菌属变化。 Table3：肠杆菌科碳青酶烯酶检测新方法（mCIM）。 Table4和5：修改质控范围，增加新药的质控范围，增加新的MIC 问题排除指南。 • 附录和术语：脆弱拟杆菌耐药性，修改天然耐药
Table 2A-2 肠杆菌科ECVs
ECV≠临床折点
• •
ECVs 是根据表型将细菌群区分为具有耐药机制（获得和/或突变）和没有耐药机 制两类的MIC值，不可解释和报告为敏感、中介，或耐药。 以下所列ECVs仅能用于指定的菌种。对于其它菌种的应用目前尚缺乏足够的数据 支持。
用于福氏志贺菌 阿奇霉素 用于宋内志贺菌 黏菌素
• ECV: 将微生物群体区分为无获得和/或突变耐药的野生型（wild-type, WT），以及获得和/或突变耐药的非野生型 （non-wild-type,NWT）的 MIC值或者抑菌环直径。 • ECV 定义为野生型菌株群体敏感的上限。 • ECV用于以下情况： 没有充足的临床和/或PK/PD数据建立临床折点。 某种药物对某种细菌具有重要的临床和/或公共卫生意义。