第二章 样品预处理方法
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❖ 改变分离的选择性 改变组份的基团，如： ❖变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离
❖ 典型的例子 氨基酸分析
实用文档
加速溶剂萃取（ASE）
ASE 是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取的技 术.
ASE 的原理是选择合适的溶剂、通过增加温度和压 力来提高萃取过程的效率.
ASE 可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振摇、 煮沸法和其他萃取方法
二、样品的采集
气体（包括蒸汽） 涉及的样品形式 液体（包括乳液）
固体（包括气体悬浮物、 液体悬浮物）
主要采集方法
直接采集 富集采集 化学反应法采集
实用文档
❖ 直接采集：只需将样品直接引进容器中，所
用容器最好是新的或洗净后干燥的，以防止 其他样品的残留影响。
❖ 富集采集：是在采集过程中，同时将待测组
实用文档
三种不同型号的ASE
ASE100↑
ASE200 ↓
实用文档
ASE300 ↑
ASE的突出优点
❖ 快速，15分钟 ❖ 溶剂用量少 ❖ 萃取效率高 ❖ 样品基体影响小 ❖ 可同时选用四种溶剂萃取 ❖ 安全，全自动 ❖ ASE建立了环境, 药物, 聚合物, 食品, 和化妆品
工业的大量应用
实用文档
组分发生化学变化或丢失
实用文档
3、样品处理的原则（续）
（7）样品处理中，若进行待测定组分的化学反 应，则反应应是已知的和定量完成的。
（8）样品制备过程中，要防止和避免待测定组 分受到污染，减少无关化合物引入制备过程。
（9）处理过程应简单易行，所用样品处理装置 的尺寸应与处理样品的量相适应。
（10）采用后应尽可能快的进行分析样品的制备 和分析，或使用适当的方法消除可能产生的干 扰，做好样品的保存。实用文档
实用文档
（4）采集储存中待测组分不应有损失或发生化学变 化。 损失—包括挥发、在储存容器上的吸附等物理原因 化学变化——包括被氧化、微生物引起的分解、各 组分间的化学反应等
（5）避免样品受到外界污染。 （6）采集后要尽快进行分析样品的制备和分析。
实用文档
三、样品预处理常用的方法
❖ 高速离心 ❖ 过滤、超滤 ❖ 选择性沉淀 ❖ 萃取 ❖ 索氏抽提 ❖ 衍生反应 ❖ 新样品处理技术—加速溶剂萃取（ASE） ❖ 浓缩样品 液-固萃取 / 液-液萃取
加样品 加溶剂 (min) 加热 加压 静态萃取
新溶剂冲洗
氮气吹扫
ASE工作流程
时间 0.5–1
5
5 循环
0.5
1–2
溶剂
泵
吹扫阀
炉体
萃取池
静态阀
萃取结束
(min) 准备分析
Total 12–18
实用文档
氮气瓶
收集瓶
食品安全评价中ASE的应用
• 水果和蔬菜中的农药 • 动物组织中的二噁英和多氯联苯 • 粮食中的农药 • 粮食中的毒枝菌素 • 熏肉中的多环芳烃 • 葡萄干中的杀真菌剂 • 咸肉中的硝酸盐/亚硝酸盐 • 一些正在发展的方法
❖ 目的
根据分子量的不同把分子、细胞及病毒等分为不 同的馏份
除去小分子样品中的大分子蛋白 脱盐
实用文档
选择性沉淀
❖ 常用于生化样品中除蛋白 有机溶剂 ❖乙腈，甲醇 强酸 ❖三氯乙酸，过氯酸 盐 ❖50% 硫酸铵 ❖10% TCA
实用文档
样品衍生
❖ 提高检测的灵敏度 增加紫外基团以增强紫外检测的灵敏度 增加荧光基团使样品用高灵敏度荧光检测器
❖加速样品的制备时间
❖降低样品前处理的成本
❖提高分析的准确性及回收率
❖更容易自动化
❖减少样品处理步骤
❖降低对不稳定样品的影响
❖提高安全性
实用文档
SPE小柱
❖ SPE 小柱的应用领域 除去杂质及干扰组份 把样品分成不同极性的组进行分析 富集微量的组份
分富集，如吸附采样中选择合适的吸附材料， 在吸附的同时使待测材料在吸附材料上富集
实用文档
使用采集方法的注意事项
（1）采集的样品应具有代表性，要注意采 样的时间、地点及采样位置的选择。
（2）所有样品都要采集双份，一份分析样 品，一份保存样品，备复查时使用。
（3）样品的采集和储存过程要作记录，详 列采样时间、地点、准确位置等。
实用文档
ASE的应用领域
环境
农业、食品
聚合物
实用文档
制药
浓缩样品
❖ 浓缩样品的方法 萃取/吹干 沉淀/再溶解 色谱法 液固抽提/固相萃取小柱
实用文档
固相萃取（SPE）技术
❖ 固相萃取技术是基于同液相色谱同样技术开发的产 品，分离复杂样品中的不同组份
❖ 固相萃取技术（SPE）的重要性
实验室中60~80%的成本及工作量在样品制备上
固相萃取样品小柱 实用文档
样品预处理的过程
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去除微粒
❖ 过滤 过滤膜/过滤装置 ❖有机(0.5m)/无机(0.45m) ❖膜片可更换 一次性使用的膜 ❖使用方便简单，交叉污染小 ❖有更小内径，可用于微量样品的处理
❖ 高速离心 ❖大于：10,000g
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超滤
❖ 机理
超滤是一种基于分子量分离的技术
实用文档
❖ 占样品分析时间的比例（ > 60%） 样品预处理所用时间远大于色谱分离的时间
❖ 占分析的消耗总成本最大 消耗大量的溶剂及其他化学品 是决定性的步骤
❖ 实验的重复性及准确性最差的环节 影响实验结果好坏的最重要因素
实用文档
3、样品处理的原则
（1）样品中可能存在的物质组成？浓度水平？ （2）样品中的主要组分？ （3）采样方法是非破坏性的还是破坏性的？ （4）收集的样品必须有代表性。 （5）采用方法必须和分析目的保持一致。 （6）样品制备过程中尽可能防止和避免待测定
第二章 样品预处理方法
一、概述：Fra Baidu bibliotek1、样品处理的目的
色谱分析技术 气相色谱 高效液相色谱 高效毛细管电泳 平面色谱
气相色谱—质谱
联用技术 液相色谱—质谱
液相色谱—核磁 实用文档气相色谱—红外
石化过程分析 工业卫生调查和评价 药物动力学和毒理学研究 食品分析 法庭取证分析
色谱法应用 医疗诊断 核能和燃料分析 制药过程监测 化妆品和香料组成分析 商品质量检验
实用文档
样品预处理的目的
除去微粒 减少干扰杂质 浓缩微量的组份 提高检测的灵敏度及选择性 改善分离的效果 有利于色谱柱及仪器的保护
实用文档
2、样品处理的必要性和重要性
❖ 色谱分析的全过程包括：样品采集、 样品制备、色谱分析、数据处理与结 果表述
❖ 样品种类繁多，其组成、浓度、物 理形态等均是色谱分析测定的影响因 素。样品处理技术就成为提高分析测 定效率、改善和优化色谱分析的重要 环节。
❖ 典型的例子 氨基酸分析
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加速溶剂萃取（ASE）
ASE 是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取的技 术.
ASE 的原理是选择合适的溶剂、通过增加温度和压 力来提高萃取过程的效率.
ASE 可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振摇、 煮沸法和其他萃取方法
二、样品的采集
气体（包括蒸汽） 涉及的样品形式 液体（包括乳液）
固体（包括气体悬浮物、 液体悬浮物）
主要采集方法
直接采集 富集采集 化学反应法采集
实用文档
❖ 直接采集：只需将样品直接引进容器中，所
用容器最好是新的或洗净后干燥的，以防止 其他样品的残留影响。
❖ 富集采集：是在采集过程中，同时将待测组
实用文档
三种不同型号的ASE
ASE100↑
ASE200 ↓
实用文档
ASE300 ↑
ASE的突出优点
❖ 快速，15分钟 ❖ 溶剂用量少 ❖ 萃取效率高 ❖ 样品基体影响小 ❖ 可同时选用四种溶剂萃取 ❖ 安全，全自动 ❖ ASE建立了环境, 药物, 聚合物, 食品, 和化妆品
工业的大量应用
实用文档
组分发生化学变化或丢失
实用文档
3、样品处理的原则（续）
（7）样品处理中，若进行待测定组分的化学反 应，则反应应是已知的和定量完成的。
（8）样品制备过程中，要防止和避免待测定组 分受到污染，减少无关化合物引入制备过程。
（9）处理过程应简单易行，所用样品处理装置 的尺寸应与处理样品的量相适应。
（10）采用后应尽可能快的进行分析样品的制备 和分析，或使用适当的方法消除可能产生的干 扰，做好样品的保存。实用文档
实用文档
（4）采集储存中待测组分不应有损失或发生化学变 化。 损失—包括挥发、在储存容器上的吸附等物理原因 化学变化——包括被氧化、微生物引起的分解、各 组分间的化学反应等
（5）避免样品受到外界污染。 （6）采集后要尽快进行分析样品的制备和分析。
实用文档
三、样品预处理常用的方法
❖ 高速离心 ❖ 过滤、超滤 ❖ 选择性沉淀 ❖ 萃取 ❖ 索氏抽提 ❖ 衍生反应 ❖ 新样品处理技术—加速溶剂萃取（ASE） ❖ 浓缩样品 液-固萃取 / 液-液萃取
加样品 加溶剂 (min) 加热 加压 静态萃取
新溶剂冲洗
氮气吹扫
ASE工作流程
时间 0.5–1
5
5 循环
0.5
1–2
溶剂
泵
吹扫阀
炉体
萃取池
静态阀
萃取结束
(min) 准备分析
Total 12–18
实用文档
氮气瓶
收集瓶
食品安全评价中ASE的应用
• 水果和蔬菜中的农药 • 动物组织中的二噁英和多氯联苯 • 粮食中的农药 • 粮食中的毒枝菌素 • 熏肉中的多环芳烃 • 葡萄干中的杀真菌剂 • 咸肉中的硝酸盐/亚硝酸盐 • 一些正在发展的方法
❖ 目的
根据分子量的不同把分子、细胞及病毒等分为不 同的馏份
除去小分子样品中的大分子蛋白 脱盐
实用文档
选择性沉淀
❖ 常用于生化样品中除蛋白 有机溶剂 ❖乙腈，甲醇 强酸 ❖三氯乙酸，过氯酸 盐 ❖50% 硫酸铵 ❖10% TCA
实用文档
样品衍生
❖ 提高检测的灵敏度 增加紫外基团以增强紫外检测的灵敏度 增加荧光基团使样品用高灵敏度荧光检测器
❖加速样品的制备时间
❖降低样品前处理的成本
❖提高分析的准确性及回收率
❖更容易自动化
❖减少样品处理步骤
❖降低对不稳定样品的影响
❖提高安全性
实用文档
SPE小柱
❖ SPE 小柱的应用领域 除去杂质及干扰组份 把样品分成不同极性的组进行分析 富集微量的组份
分富集，如吸附采样中选择合适的吸附材料， 在吸附的同时使待测材料在吸附材料上富集
实用文档
使用采集方法的注意事项
（1）采集的样品应具有代表性，要注意采 样的时间、地点及采样位置的选择。
（2）所有样品都要采集双份，一份分析样 品，一份保存样品，备复查时使用。
（3）样品的采集和储存过程要作记录，详 列采样时间、地点、准确位置等。
实用文档
ASE的应用领域
环境
农业、食品
聚合物
实用文档
制药
浓缩样品
❖ 浓缩样品的方法 萃取/吹干 沉淀/再溶解 色谱法 液固抽提/固相萃取小柱
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固相萃取（SPE）技术
❖ 固相萃取技术是基于同液相色谱同样技术开发的产 品，分离复杂样品中的不同组份
❖ 固相萃取技术（SPE）的重要性
实验室中60~80%的成本及工作量在样品制备上
固相萃取样品小柱 实用文档
样品预处理的过程
实用文档
去除微粒
❖ 过滤 过滤膜/过滤装置 ❖有机(0.5m)/无机(0.45m) ❖膜片可更换 一次性使用的膜 ❖使用方便简单，交叉污染小 ❖有更小内径，可用于微量样品的处理
❖ 高速离心 ❖大于：10,000g
实用文档
超滤
❖ 机理
超滤是一种基于分子量分离的技术
实用文档
❖ 占样品分析时间的比例（ > 60%） 样品预处理所用时间远大于色谱分离的时间
❖ 占分析的消耗总成本最大 消耗大量的溶剂及其他化学品 是决定性的步骤
❖ 实验的重复性及准确性最差的环节 影响实验结果好坏的最重要因素
实用文档
3、样品处理的原则
（1）样品中可能存在的物质组成？浓度水平？ （2）样品中的主要组分？ （3）采样方法是非破坏性的还是破坏性的？ （4）收集的样品必须有代表性。 （5）采用方法必须和分析目的保持一致。 （6）样品制备过程中尽可能防止和避免待测定
第二章 样品预处理方法
一、概述：Fra Baidu bibliotek1、样品处理的目的
色谱分析技术 气相色谱 高效液相色谱 高效毛细管电泳 平面色谱
气相色谱—质谱
联用技术 液相色谱—质谱
液相色谱—核磁 实用文档气相色谱—红外
石化过程分析 工业卫生调查和评价 药物动力学和毒理学研究 食品分析 法庭取证分析
色谱法应用 医疗诊断 核能和燃料分析 制药过程监测 化妆品和香料组成分析 商品质量检验
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样品预处理的目的
除去微粒 减少干扰杂质 浓缩微量的组份 提高检测的灵敏度及选择性 改善分离的效果 有利于色谱柱及仪器的保护
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2、样品处理的必要性和重要性
❖ 色谱分析的全过程包括：样品采集、 样品制备、色谱分析、数据处理与结 果表述
❖ 样品种类繁多，其组成、浓度、物 理形态等均是色谱分析测定的影响因 素。样品处理技术就成为提高分析测 定效率、改善和优化色谱分析的重要 环节。