三种基质测定血清胆碱酯酶活力的比较

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(收稿日期:2006-11-27)
文章编号:1007-4287(2007)04-0490-02
三种基质测定血清胆碱酯酶活力的比较
谢　萍1,潘洪涛2,刘国良3
(1.吉林出入境检验检疫局,吉林长春130062;2.中国人民解放军第二○八医院,吉林长春130062;
3.吉林大学公共卫生学院卫生检测教研室,吉林长春130021)
人的血液胆碱酯酶(Cholinesterase)有两类。

一类是真性胆碱酯酶(AChE EC.3.1.1.7),或胆碱酯酶Ⅰ。

它分布于红细胞和中枢神经系统的灰质内,支配肌细胞的交感神经节的运动神经终板。

此酶仅水解胆碱酯类,不水解芳基或烷基酯类。

另一类是拟胆碱酯酶(PChE EC.3.1.1.8)亦称胆碱酯酶Ⅱ,或特异性胆碱酯酶,分布于肝、血浆、肠粘膜和中枢神经系统的白质内。

乙酰胆碱酰基水解酶可分解胆碱酯类,还包括苯甲酰胆碱、丁酰胆碱和烷基酯类。

与其它酶活力增高反映病理改变的情况相反,血清胆碱酶测定的临床意义在于酶活力降低。

肝脏合成PChE,肝实质细胞损害时酶活力降低。

有机磷毒剂是两类胆碱酯酶的激烈抑制剂,测定血清胆碱酯酶与测定全血一样,是临床诊断有机磷农药中毒及予后评价重要手段[1]。

测定血清胆碱酯酶(SChE)活力的方法有多种,传统的pH法、羟胺比色法比较成熟。

近年出现了新方法,如:表面光伏传感器法[2]、膜电位分析法[3]、流动注射动力学光度法[4]等。

这些新方法都需要特殊设备,而且操作比较麻烦。

1990年以后,许多国外厂家SChE测定试剂盒的引入,应用Ellman’s试剂,使测定方法简化,而且可以很方便地使用生化分析仪测定血清胆碱酯酶活力。

据文献介绍用乙酰、丙酰、丁酰硫代胆碱的碘化物作基质均可测定SChE,但最好选用碘化丙酰硫代胆碱[5,6]。

但是,现国内外试剂厂家提供的测定SChE试剂盒均使用碘化丁酰硫代胆碱。

为此,我们应用乙酰、丙酰、丁酰三种硫代碘化物测定SChE,并对其结果进行了比较。

1　材料和方法
1.1　材料来源　血清样本为健康人体检查,肝功能正常,H BS Ag阴性,年龄25-50岁,均为男性。

1.2　检测方法　COU LTER2Beckman CX9全自动生化分析仪测定胆碱酯酶活力,试剂均为SIG M A公司产品。

A.碘化乙酰硫代胆碱(Acethlthiochaline iodide)、
B.碘化丙酰硫代胆碱(Propionylthiocholine iodide)、
C.碘化丁酰硫代胆碱(S2Butyzylthiocholine iodide)、
D.5, 5’2二硫代双(22硝基)苯甲酸(DT NB)
参照资料[7]自配试剂,连续监测法进行测定。

1.3　统计学处理　所有数据用x—±s表示,组间差异应用t检验。

2　结果
2.1　3种基质对同一分血清样品测定　结果见表1。

2.2　3种基质对不同病理样本的测定
分别用A、B、C3种基质按上述条件对57例疾病患者测定SChE活力,结果见表2。

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—Chin J Lab Diagn,April,2007,V ol11,N o.4
表1　3种基质测定SChE活力的比较substrate n RANGE x—±s A30 3.26-6.15 4.6147±0.90693
B30 1.14-5.968.5883±1.636933
C30 1.09-5.858.3429±1.6719 3P<0.01:The serum cholinesterase activity dem onstrated statistics significant difference between the A and B,C;33P>0.05:The B and C make no difference.
表2　3种疾病SChE活力测定的数值
SChE Activity (ku/L)
Hepatocirr
hosis n=15
Renal
syndrome n=18
Diabetes
n=24
A 2.151±0.752 6.743±1.282 5.453±1.665
B 3.154±1.3928.945±1.9637.524±1.842
C 3.652±1.4519.457±2.2157.846±2.113
3　讨论
血清胆碱酯酶是一种肝脏合成酶,其血清活性取决于所有肝实质细胞的正常功能。

在健康人群有一较大的参考值范围。

由于SChE其半衰期短(约10天),较白蛋白15-19天短,可以从患者SChE活性过程的监测获得肝脏功能更多的信息[8]。

肝脏对白蛋白和SChE的合成是偶联的,与肝脏无关的原因引起的SChE改变时,血清白蛋白浓度不会出现相同的变化,所以SChE活力测定是一项诊断治疗肝脏疾病敏感而有价值的指标[9]。

在评价肝硬化病人SChE活性过程监测时,SChE持续下降提示病情恶化,升高则为病情改善或治疗有效的标志。

血清胆碱酶活力的测定可用于:①可疑肝实质受损,并有器官功能受损;②农药中毒及接触农药工人的监护;③评估病人对麻醉药琥珀酰胆碱的敏感性,为临床能否应用此类药物提供依据。

自Ellman’s试剂应用,使测定SChE的方法简化,并且可适用于全自动生化分析仪。

现许多医院已将其组合为肝功能项目之一。

由于其测定方法使用乙酰、丙酰、丁酰硫代胆碱的碘化物均可,加之各厂家的基质浓度的差别,参考值各不相同。

现国内厂家提供SChE试剂盒均以碘化丁酰硫代胆碱为基质。

我们应用三种基质测定SChE活力结果表明,三种基质均可应用,仅测定值有所不同,碘化乙酰硫代胆碱与碘化丁酰硫代胆碱有差别,碘化丁酰硫代胆碱与碘化丙酰硫代胆碱基本无差别,碘化乙酰硫代胆碱数值低,碘化丙酰硫代胆碱结果最高。

肝硬化、肾病综合症、糖尿病等病例(见表2)结果显示,由于数值不同,用碘化乙酰硫代胆碱测定结果低,用碘化丙酰硫代胆碱和碘化丁酰硫代胆碱测定结果高。

其中,用碘化丙酰硫代胆碱测定值最高。

这与健康组(表1)测定结果的变化一致。

SChE活力测定在临床除用于肝脏功能检测外还主要用于急诊检验有机磷农药中毒的诊断观察。

作者简介:谢萍(1961-),女,吉林长春人,博士研究生,高级工程师。

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(收稿日期:2007-02-13)
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中国实验诊断学　2007年4月　第11卷　第4期。