微生物的分离与培养技术原理及其应用ppt课件

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方法一、平板划线法
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单菌落
甲乙
丙
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方法二、稀释涂布平板法 （一）系列稀释操作 移液管
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移液管吸取菌液稀释时，轻压橡皮头，吹吸三次
的目的是？ 使菌液与水充分混匀
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（二）涂布平板操作
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【例题2】 微生物的分离和培养是现代生物工 程应用中的重要环节。据此回答：
则说明符合要求。
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土壤“纤维素分解菌”的分离与筛 选 土壤“尿素分解菌”的分离与计数
稀释涂布平板法
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【实验设计】
（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算称量 溶化(调节PH) 灭菌 倒平板（50℃）
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倒平板（50℃）
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倒平板（50℃）
打开一条缝隙
平板倒置 平板冷凝
防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；
使培养基表面的水分精更选ppt好地挥发
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大肠杆菌的分离纯化培养
（二）分离纯化大肠杆菌 方法一、平板划线法
子）、氧气
以及温度、 用途 PH要求。 功能
天然
成分不明确的 工业生产
培养基 天然物质
合成培养基成分明确已知
分离、纯化、 鉴定、计数
选择培养基加物入质某种化学
分离筛选特定 微生物
鉴别培养基加入某种指示 鉴别不同微生
精选ppt 试剂
物
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需分离 选择培 鉴别培养 微生物 养基 基
鉴定原理
尿素 尿素作 酚红指 细菌合成的脲酶将尿素分解
上一次划线的末端开始划线，原因是
_末_端__细__菌__数__目_比__起__始__端__少_，多次划线的目的
是 使细菌数目随划线次数增加逐渐。减少，
以便分离得到单菌落
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（7）右图是某同学修正丙操作后的正确的“微生物平 板划线”示意图。划线顺序为1→2→3→4→5。下列有
关叙述中正确的是（ D）
灼烧灭菌
3、锥形瓶、培养皿： 干热灭菌和高压蒸 汽灭菌（湿热灭菌）
4、培养基：高压蒸汽灭菌
(不能采用干热灭菌)
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【例题1】为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开 展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。 请回答下列问题：
（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是
干热灭菌和高压蒸 汽灭菌（湿热灭菌）
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大肠杆菌的分离纯化培养
（三）分离纯化后培养
无菌落产生
有菌落产生
未接种培养基 接种培养基
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（三）分离纯化后培养
1、对照培养方法：将
未接种培养基和已接种培养基都放入适。 宜温度恒温箱中培养适宜时间观察结果
2、对照培养结果：
若未接种培养基上 无菌落产，生
接种培养基上 有菌落产生，且菌落颜色、 形状、大小基本一致并符合 大肠杆菌菌落特，点
× × 的菌落（ ）
口
②打开含菌种的试管需通过火焰灭菌（ ）
③溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上直接倒入
× 烧杯（ ）
连同称量纸一同
④熔化琼脂时，需要用玻璃棒不断搅拌以防止
√ 糊底（ ）
（4）分散细菌得到单菌落 稀释涂布平板法 法
比 平板划线法 法效果更好。
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平板划线法
稀释涂布平板法
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研究者得到一个经培养后菌落分布如图所 示的平板，推测接种时可能的操作失误？
涂布不均匀
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（5）每次划线前和划线后，接种环都要通过
灼烧灭菌，完成右图丙的划线操作，
共需灼烧接种环____6____次。灼烧接种环之
后，要冷却后再进行划线操作的原因
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是 以免接种环温度过高，杀死菌。种
（6）第二次以及其后的划线操作时，总是从
伊红美 大肠杆菌菌落呈现黑色,， 蓝培养 带有金属光泽 基
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四种纤维素分解菌 在刚果红培养基上 形成的透明圈
大肠杆菌在伊红美蓝琼 脂培养基上的黑色带金 属光泽的菌落
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二、 无菌 操作技术
——微生物分离培养成功关键（消毒与灭菌）
1、实验操作者双手： 70%酒精消毒
2、接种环、接种针或试管口、瓶口：
(3)右图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图
中甲、乙、丙依次是 ① 。(填序号)
①安全阀、放气阀、压力表 ②放气阀、安全阀、压力表 ③安全阀、放气阀、温度表 ④放气阀、安全阀、温度
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【例题1】为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开 展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。 请回答下列问题：
（4）为了将分离到菌株纯化,挑取菌落在3块
2016届高三生物二轮复习
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一、培养基的营养构成与类型划分
营养构成 划分依据 培养基 制备方法 用途
水、无机 物理 盐、碳源 性质 和氮源
种类
分离、纯化、
固体培养基加凝固剂如：鉴定、计数
半固体 培养基
琼脂
观察微生物运 动
液体
不加凝固剂 工业生产
还要满足特
培养基
殊营养物质 化学 （生长因 成分
（1）甲操作称为 倒平板，指出乙、丙操作的
错误：乙未在酒精灯火焰附，近（旁）划线
丙 最后一区域划线与。第一区域相连
（2）判断：固体培养基上由一个细胞繁殖而 来的肉眼可见的子细胞群体叫做 菌落 ，属于
生命系统的 种群 层次。精选ppt
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（3）判断： 稀释度足够高的
①不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个
；为了防止冷凝水渗入
及减少灭菌后器皿或培养基被污染，灭菌前应
该 牛皮纸或几层报纸包扎。紧
(2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素 ，其目的是 抑制细菌生长 。
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安全阀 压力表 放气阀
排气软管
高压蒸汽灭菌锅
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灭菌桶
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【例题1】为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开 展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。 请回答下列问题：
相同平板上划线,结果其中一块平板各划线区均 未见菌生长，最可能原因是 菌接被种杀环死温度过。高，
（5）为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母
细胞时，添加石英砂的目的是 研磨充分；研
磨时 不需要(填“需要”或“不需要”)
添加CaCO3，理由是β-胡萝卜素较耐酸。
精（选p较pt 稳定）
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大肠杆菌的分离纯化培养
分解菌 为唯一 示剂 生成氨。使培养基的碱性增
氮源
强，pH升高，指示剂变红
纤维素 纤维素 刚果红 分解菌 作为唯 染色法
一碳源
刚果红与培养基中的纤维素形成红 色复合物。当纤维素被纤维素酶分 解后，刚果红—纤维素复合物不能 形成（或红色消失），培养基中出
现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
大肠 杆菌
一般 培养 基