乙型副伤寒沙门菌志贺菌属
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两个相邻胸腺嘧啶以共价键结合成二聚体，从而 干扰DNA的复制与转录导致细菌变异或死亡。对 病毒也有破坏作用。
特点：紫外线杀菌作用强，而穿透能力弱。普通
玻璃、纸张、水蒸气、尘埃等均能阻挡。 紫外线中波长为240-300nm者具有杀菌能 力，其中265-266nm的杀菌作用最强。
用途：常用于消毒物体表面，手术室无菌实验
（二） 化学因素对细菌的影响
1. 促进菌体蛋白质变性或凝固; 2. 干扰细菌酶系统和代谢; 3. 损伤细菌的细胞膜，影响细菌的化学组成， 物理结构和生理活动。
有些化学药品浓度高时能杀灭病原微生物，称 为化学消毒剂；浓度低时能抑制细菌生长，称为防 腐剂。（只能外用，对细菌的敏感性不同）
化学消毒剂分类
化学消毒剂对细菌的影响
（每个实验室18个平皿，2人/平板）） 方法：取一普通平皿 培养基，一部分写上 “前”，另一部分写 上“后”，然后将手 指在写有“前”的部 分沾一下，再将手指 用消毒液进行消毒， 在写有“后”的部分 沾一下。放入37℃温 箱培养24小时后观察。
肥皂 70% 酒精 碘伏
新洁儿灭
高压蒸气灭菌器
1) 构造 高压蒸气灭菌器是一个双层的金属圆筒，两层之间盛水， 外层坚厚，其上或前方有金属厚盖。盖旁附有螺栓，借以紧 闭盖门，使蒸气不能外溢。 高压蒸气灭菌器上装有排气阀、安全阀，以调节器内压 力，装有的温度计及压力表以示内部温度和压力。 器内装有带孔的金属搁板，用以放置欲灭菌对象。
二、肠道致病菌的分离培养
1. 肠道致病菌的生物学性状
2. SS培养基的特性及用途
3. 分离培养方法
肠道杆菌的生物学性状
肠杆菌科重要菌属及代表菌种
埃希菌属：大肠埃希菌 沙门菌属：伤寒沙门菌 甲型、乙型副伤寒沙门菌 志贺菌属：痢疾志贺菌
肠道杆菌的生物学性状
1.相似的形态染色—从形态上无法区别
多 有 鞭 毛 、 菌 毛 中等大小的G-杆菌
高效消毒剂：杀灭细菌芽孢在内的所有微生物，适用于 不耐热力灭菌但要进入人体内部的物品，如内窥镜等。 如：次氯酸钠、过氧化氢、甲醛、环氧乙烷等 中效消毒剂：不能杀灭芽孢，但能杀灭繁殖体（包括结 核杆菌），真菌和大多病毒，适用于喉镜，麻醉器材等。 如：碘酊、乙醇等
低效消毒剂：能杀灭大多细菌繁殖体，但不能杀灭芽 孢，结核杆菌及某些抵抗力强的真菌和病毒。 如：新洁尔灭、洗必泰、高锰酸钾等
室，传染病房的空气消毒及不耐热物品消毒。
紫外线对细菌的影响 方法：取一个平皿，用密涂法将细菌涂布于培养皿中，
然后按图所示揭开平皿盖，置于紫外线下照射30分钟， 然后盖好盖子，置37℃培养24h后取出观察结果。
纸片
（每2个同学1个平板） 滤纸片用后需要用火烧掉
平皿盖
密涂接种
分三次接种， 每次取一环。第 一次密涂接种后 旋转60度二次密 涂接种，然后同 方向旋转60度后 再次密涂接种。
高压蒸汽灭菌法
压力：1.05kgห้องสมุดไป่ตู้㎡
或103.425KPa 温度: 121.3℃ 时间：15-20min 完全杀灭细菌的繁殖体和芽孢
用途：适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品， 如敷料、 手术器械、药品、细菌培养基等。
2)使用方法
①加水至锅内达规定的水平面，放入欲灭菌物品， 把锅盖按对称的螺旋先后对称用力（切勿单个依次） 扭紧，使锅盖确实均匀密闭。 ②用电炉加热，同时打开排气阀门，使器内冷空气 逸出，待空气全部排出后，关闭排气阀。 ③继续加热并观察压力表，器内压力又逐渐升高， 直到压力表指在所需数字（例如15磅）即调节热源， 维持20～30min．可完全杀死细菌的繁殖体和芽胞。 ④灭菌时间到达后，停止加热，待压力自行下降至 零时方可徐徐开放排气阀，排尽余气，打开锅盖，取 出灭菌物品。
大肠杆菌等
PH下降
指示剂变红色 红色大菌落
大肠杆菌
痢疾杆菌
SS培养基的特性及用途
SS平板 大肠杆菌 痢疾杆菌 伤寒杆菌 粉红色大菌落 无色细小 半透明菌落 无色细小 半透明菌落
牛肉浸粉 蛋白胨 乳糖 硫代硫酸钠 枸橼酸钠 煌绿 胆盐 中性红 琼脂 胆盐抑制G+,枸橼酸钠和煌绿能部分抑制大 肠杆菌,致病的沙门菌和志贺菌能大量生长。 中性红指示剂和乳糖,中性红遇酸变粉红。
常用于培养肠道致病菌。
Salmonella -Shigella Medium
主要成分 基础营养 乳糖 指示剂 抑制剂 不分解乳糖 无明显变化 志贺菌、沙门菌 无色半透明小菌落 分解乳糖 产酸
实验材料
1.抗酸染色：玻片每人1张；卡介苗（加蛋清）（1套/班）。 2.肠道致病菌的分离培养：SS培养基（2个平板/组，18个 /室）。 细菌：大肠、伤寒混合物(1个/组，8个/室)。 3.消毒灭菌： 物理：紫外线（2个平板/组，18个/室；无菌三角纸片及 镊子等1套/室）。 化学：化学消毒剂碘伏、新洁尔灭、70%酒精三种消毒 剂各1瓶/室；平板（2个平板/组， 18个/室） 4.胶布，记号笔，1套/室。
实验二
一. 消毒灭菌 二. 肠道致病菌的分离培养 三. 抗酸染色
一、消毒灭菌
1. 物理因素对细菌的影响
2. 化学因素对细菌的影响
（一） 物理因素对细菌的影响
高压蒸汽灭菌法 紫外线对细菌的影响
高压蒸气灭菌法
原理：蒸汽被限制在密闭容器内，随着热力 的作用压力不断升高，蒸汽的温度也 相应升高，在103.4kPa蒸汽压力下 时，温度可达121.3℃。维持15-20分 钟后可杀死细菌包括芽孢在内的所有 微生物。
全 自 动 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅
台式蒸汽灭菌器 BA-30
Systec D-200 2D 双门高压灭菌器
电热卧式圆形压力蒸汽灭菌器(型号YXQ-WY21-600)
全自动喷淋式高温高压调理杀菌锅
电 脑 全 自 动 水 浴 式 串 联 杀 菌 锅
紫外线对细菌的影响
原理：紫外线主要作用于DNA，使一条DNA链上的
肠道杆菌的生物学性状
2.活泼的生化反应 乳糖发酵试验
初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌
肠道致病菌 多数不发酵乳糖
肠道非致病菌
多数发酵乳糖
肠道杆菌的生物学性状
2.活泼的生化反应
菌名
大肠杆菌
葡萄糖
乳糖
硫化氢
-
⊕
+
+
⊕
-
痢疾杆菌
伤寒杆菌
-/+
SS培养基的特性 （Salmonella -Shigella Medium）
特点：紫外线杀菌作用强，而穿透能力弱。普通
玻璃、纸张、水蒸气、尘埃等均能阻挡。 紫外线中波长为240-300nm者具有杀菌能 力，其中265-266nm的杀菌作用最强。
用途：常用于消毒物体表面，手术室无菌实验
（二） 化学因素对细菌的影响
1. 促进菌体蛋白质变性或凝固; 2. 干扰细菌酶系统和代谢; 3. 损伤细菌的细胞膜，影响细菌的化学组成， 物理结构和生理活动。
有些化学药品浓度高时能杀灭病原微生物，称 为化学消毒剂；浓度低时能抑制细菌生长，称为防 腐剂。（只能外用，对细菌的敏感性不同）
化学消毒剂分类
化学消毒剂对细菌的影响
（每个实验室18个平皿，2人/平板）） 方法：取一普通平皿 培养基，一部分写上 “前”，另一部分写 上“后”，然后将手 指在写有“前”的部 分沾一下，再将手指 用消毒液进行消毒， 在写有“后”的部分 沾一下。放入37℃温 箱培养24小时后观察。
肥皂 70% 酒精 碘伏
新洁儿灭
高压蒸气灭菌器
1) 构造 高压蒸气灭菌器是一个双层的金属圆筒，两层之间盛水， 外层坚厚，其上或前方有金属厚盖。盖旁附有螺栓，借以紧 闭盖门，使蒸气不能外溢。 高压蒸气灭菌器上装有排气阀、安全阀，以调节器内压 力，装有的温度计及压力表以示内部温度和压力。 器内装有带孔的金属搁板，用以放置欲灭菌对象。
二、肠道致病菌的分离培养
1. 肠道致病菌的生物学性状
2. SS培养基的特性及用途
3. 分离培养方法
肠道杆菌的生物学性状
肠杆菌科重要菌属及代表菌种
埃希菌属：大肠埃希菌 沙门菌属：伤寒沙门菌 甲型、乙型副伤寒沙门菌 志贺菌属：痢疾志贺菌
肠道杆菌的生物学性状
1.相似的形态染色—从形态上无法区别
多 有 鞭 毛 、 菌 毛 中等大小的G-杆菌
高效消毒剂：杀灭细菌芽孢在内的所有微生物，适用于 不耐热力灭菌但要进入人体内部的物品，如内窥镜等。 如：次氯酸钠、过氧化氢、甲醛、环氧乙烷等 中效消毒剂：不能杀灭芽孢，但能杀灭繁殖体（包括结 核杆菌），真菌和大多病毒，适用于喉镜，麻醉器材等。 如：碘酊、乙醇等
低效消毒剂：能杀灭大多细菌繁殖体，但不能杀灭芽 孢，结核杆菌及某些抵抗力强的真菌和病毒。 如：新洁尔灭、洗必泰、高锰酸钾等
室，传染病房的空气消毒及不耐热物品消毒。
紫外线对细菌的影响 方法：取一个平皿，用密涂法将细菌涂布于培养皿中，
然后按图所示揭开平皿盖，置于紫外线下照射30分钟， 然后盖好盖子，置37℃培养24h后取出观察结果。
纸片
（每2个同学1个平板） 滤纸片用后需要用火烧掉
平皿盖
密涂接种
分三次接种， 每次取一环。第 一次密涂接种后 旋转60度二次密 涂接种，然后同 方向旋转60度后 再次密涂接种。
高压蒸汽灭菌法
压力：1.05kgห้องสมุดไป่ตู้㎡
或103.425KPa 温度: 121.3℃ 时间：15-20min 完全杀灭细菌的繁殖体和芽孢
用途：适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品， 如敷料、 手术器械、药品、细菌培养基等。
2)使用方法
①加水至锅内达规定的水平面，放入欲灭菌物品， 把锅盖按对称的螺旋先后对称用力（切勿单个依次） 扭紧，使锅盖确实均匀密闭。 ②用电炉加热，同时打开排气阀门，使器内冷空气 逸出，待空气全部排出后，关闭排气阀。 ③继续加热并观察压力表，器内压力又逐渐升高， 直到压力表指在所需数字（例如15磅）即调节热源， 维持20～30min．可完全杀死细菌的繁殖体和芽胞。 ④灭菌时间到达后，停止加热，待压力自行下降至 零时方可徐徐开放排气阀，排尽余气，打开锅盖，取 出灭菌物品。
大肠杆菌等
PH下降
指示剂变红色 红色大菌落
大肠杆菌
痢疾杆菌
SS培养基的特性及用途
SS平板 大肠杆菌 痢疾杆菌 伤寒杆菌 粉红色大菌落 无色细小 半透明菌落 无色细小 半透明菌落
牛肉浸粉 蛋白胨 乳糖 硫代硫酸钠 枸橼酸钠 煌绿 胆盐 中性红 琼脂 胆盐抑制G+,枸橼酸钠和煌绿能部分抑制大 肠杆菌,致病的沙门菌和志贺菌能大量生长。 中性红指示剂和乳糖,中性红遇酸变粉红。
常用于培养肠道致病菌。
Salmonella -Shigella Medium
主要成分 基础营养 乳糖 指示剂 抑制剂 不分解乳糖 无明显变化 志贺菌、沙门菌 无色半透明小菌落 分解乳糖 产酸
实验材料
1.抗酸染色：玻片每人1张；卡介苗（加蛋清）（1套/班）。 2.肠道致病菌的分离培养：SS培养基（2个平板/组，18个 /室）。 细菌：大肠、伤寒混合物(1个/组，8个/室)。 3.消毒灭菌： 物理：紫外线（2个平板/组，18个/室；无菌三角纸片及 镊子等1套/室）。 化学：化学消毒剂碘伏、新洁尔灭、70%酒精三种消毒 剂各1瓶/室；平板（2个平板/组， 18个/室） 4.胶布，记号笔，1套/室。
实验二
一. 消毒灭菌 二. 肠道致病菌的分离培养 三. 抗酸染色
一、消毒灭菌
1. 物理因素对细菌的影响
2. 化学因素对细菌的影响
（一） 物理因素对细菌的影响
高压蒸汽灭菌法 紫外线对细菌的影响
高压蒸气灭菌法
原理：蒸汽被限制在密闭容器内，随着热力 的作用压力不断升高，蒸汽的温度也 相应升高，在103.4kPa蒸汽压力下 时，温度可达121.3℃。维持15-20分 钟后可杀死细菌包括芽孢在内的所有 微生物。
全 自 动 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅
台式蒸汽灭菌器 BA-30
Systec D-200 2D 双门高压灭菌器
电热卧式圆形压力蒸汽灭菌器(型号YXQ-WY21-600)
全自动喷淋式高温高压调理杀菌锅
电 脑 全 自 动 水 浴 式 串 联 杀 菌 锅
紫外线对细菌的影响
原理：紫外线主要作用于DNA，使一条DNA链上的
肠道杆菌的生物学性状
2.活泼的生化反应 乳糖发酵试验
初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌
肠道致病菌 多数不发酵乳糖
肠道非致病菌
多数发酵乳糖
肠道杆菌的生物学性状
2.活泼的生化反应
菌名
大肠杆菌
葡萄糖
乳糖
硫化氢
-
⊕
+
+
⊕
-
痢疾杆菌
伤寒杆菌
-/+
SS培养基的特性 （Salmonella -Shigella Medium）