微生物学重点2

1、氧化酶实验：检测细菌是否具有氧化性特征。具有氧化酶特征的细菌能将二甲苯基对二甲胺氧化，是试剂分子中氢脱出与氧结合，试剂被氧化成红色的醌类化合物。

2、触酶试验：检验细菌是否具有触酶的特性。具有触酶的细菌能催化过氧化氢生成水和新生态氧，继而形成分子氧出现水泡，为触酶阳性。

3、糖（醇）发酵实验：不同细菌含酶类不同，因而分解糖的能力亦各异。有的细菌能分解某些糖类产酸和产气，有的细菌分解某些糖类只产酸，还有些因缺乏某些分解糖的酶而不能分解某些糖类。

4、甲基红试验：：检测细菌分解葡萄糖后培养基中的酸碱度，以此区别肠道杆菌的种类。

5、七叶苷水解试验：有的细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素，七叶素与培养基中枸橼酸的二价铁离子反应，生成黑色化合物，使培养基呈黑色。

6、靛基质(吲哚)试验：检测细菌能否分解色氨酸而产生靛基质的特性。有些细菌含有色氨酸酶，能分解培养基中的色氨酸而生成靛基质，后者与对二甲基苯甲醛作用后形成玫瑰靛基质，此为靛基质阳性。

7、硫化氢（H2S）试验：有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。

8、尿素酶试验：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。

9、苯丙氨酸脱氨酶试验：细菌产生苯丙氨酸脱氨酶，使苯丙氨酸脱去氨基生成苯丙酮酸，与氯化铁作用形成绿色化合物。

10、氨基酸脱羧酶试验：细菌凭借其特异脱羧酶作用于氨基酸的羧基，产生胺和CO2的过程。

11、枸橼（柠檬）酸盐利用试验：检测细菌能否利用枸橼酸盐作为碳的唯一来源。其培养基含有枸橼酸钠和磷酸二氢铵，前者为碳唯一来源，后者为氮唯一来源，有些细菌利用枸橼酸盐为碳的唯一来源，在培养基上生长繁殖，使枸橼酸钠经三羧酸循环生成CO2→再转变为碳酸盐→培养基pH由酸性变成碱性→培养基（含溴麝香草酚蓝指示剂）由绿色变为深蓝色，为阳性。

12、丙二酸盐试验：某些细菌以丙二酸盐为唯一碳源，生成碳酸钠，使培养基变碱性。

13、血浆凝固酶试验：检测细菌是否产生可使新鲜动物血浆发生凝集的凝固酶，通常是有致病性的细菌均具有此酶，但是目前不产生血浆凝固酶的致病性细菌也有增多趋势。14、葡萄糖酸盐试验：某些细菌可氧化葡萄糖酸钾，生成α-酮基葡萄糖酸。α-酮基葡萄糖酸是一种还原性物质，可与班氏试剂起反应，出现棕色或砖红色的氧化亚铜沉淀。

15、CAMP试验：B群链球菌能产生CAMP因子，促进葡萄球菌的溶血素溶解红细胞的能力，故在交界处溶血增强，出现矢形的溶血区，

16、DN A 酶试验：DNA 酶可水解DNA 长链，形成数个单核苷酸组成的寡核苷酸链。长链DNA 可被酸沉淀，而寡核苷酸可溶于酸。在菌落平板上加入盐酸后，若在菌落周围出现透明环，而其他部位呈浑浊，表示该菌具有DNA 酶。

17、奥普托欣敏感性试验：几乎所有的肺炎链球菌都对奥普托欣敏感，而奥普托欣对于其他链球菌则无抑制作用。

18、杆菌肽敏感试验：A群链球菌对杆菌肽几乎是100%敏感，而其它群链球菌对杆菌肽通常耐药。故此试验可对链球菌进行鉴别。

19、培养基：将细菌生长繁殖所需的各类营养物质按照一定比例配制而成的营养基质。

20、卫星现象：流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培养，由于葡萄球菌生长时能合成较多V因子，可促进流感嗜血杆菌生长，于是在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌的菌落较少，即成为卫星现象。

21、MIC：最低抑菌浓度，能够抑制细菌生长的最低药物浓度。

22、MBC：最低杀菌浓度，是指能够是细菌减少99.9%以上的最低浓度。

23、霍乱红试验：霍乱弧菌有色氨酸酶和硝酸盐还原能力。霍乱弧菌分解色氨酸产生吲哚；还原硝酸盐为亚硝酸盐,亚硝酸盐与吲哚结合成亚硝基吲哚，滴加浓硫酸出现蔷薇色，即阳性

24、粘丝试验：将0.5％去氧胆酸钠水溶液与霍乱弧菌制成浓菌液，1min内悬液由混变清，并粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝，即阳性

25、神奈川现象：95％腹泻病人分离菌株，在含高盐（70g/L）甘露醇的人O型血或兔血琼脂平板（我萋血琼脂平板）上产生β溶血现象。

26、荚膜肿胀试验：特异性抗血清与相应细菌的荚膜抗原特异性结合形成复合物时，可使细菌荚膜显著增大出现肿胀的试验。

一、如何鉴定副溶血性弧菌？【答案】革兰阴性菌，呈弧状。为α溶血或不溶血。副溶血性弧菌可依据氧化酶阳性，对O/129敏感，发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇产酸，不发酵蔗糖、乳糖，吲哚试验阳性，大部分菌株脲酶阴性，V-P阴性，在不含NaCl和含10%NaCl 的蛋白胨水中不生长，在含1%~8%NaCl的蛋白胨水中生长，赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶阳性，精氨酸双水解酶阴性，神奈川现象阳性，作出鉴定。

二、葡萄球菌属的鉴定程序：

1、标本采集；

2、检验程序

3、检验方法与鉴定：a直接涂片镜检——取标本涂片，革兰染色镜检，如为革兰阳性球菌呈葡萄状排列，则可初步报告：“找到革兰阳性葡萄状排列球菌，似葡萄球菌”。b分离培养——挑取可疑菌落行涂片染色镜检。c鉴定要点——本菌特征：致病性葡萄球菌在血平板上的菌落一般呈金黄色，革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，血浆凝固酶试验和耐热核酸酶试验均呈阳性，发酵甘露醇。

4、药敏试验

三、金黄葡萄球菌鉴定

金黄色葡萄球菌革兰染色阳性，镜下大多葡萄状排列，有散在。触酶试验阳性，区别链球菌。氧化酶阳性，可与10%NaCl中生长，凝固酶阳性。作出判断。

四、霍乱弧菌鉴定

为革兰阴性杆菌，呈鱼群样排列。氧化酶阳性、发酵葡萄糖、不发酵乳糖。对O/129敏感、动力阳性，靛基质阳性、尿素酶阴性、在碱性蛋白胨水培养基形成菌膜，霍乱红试验阳性、粘丝试验阳性。

五、志贺菌属临床意义

(一)致病因素：1. 侵袭力：菌毛粘附在肠粘膜表面2. 内毒素：粘膜细胞发炎，毛细血管血栓，导致坏死脱落和溃疡，脓血便；全身中毒症状（发热、意识障碍，中毒性休克）3. 外毒素：A群志贺菌Ⅰ和Ⅱ型产生志贺毒素（Vero毒素），有细胞毒、肠毒素和神经毒等生物学活性

(二) 所致疾病：有以下3种临床类型：1.急性细菌性痢疾：腹痛腹泻，发热，里急后重,粘液脓血便，很少进血流，中毒性菌痢见于小儿，常无消化道症状，表现为全身中毒症状2. 慢性细菌性痢疾：菌痢治疗不彻底，造成反复发作、迁延不愈，超过2个月视为慢性菌痢；3.隐匿型菌痢4.携带者：有恢复期带菌、慢性带菌和健康带菌等3种，是主要的传染源。

六、伤寒沙门菌的鉴定

革兰阴性杆菌，不发酵乳糖和蔗糖，吲哚IND （－）、尿素URE （－）、VP（—），甲基红（＋）、枸橼酸盐利用CIT （＋/-）、大多硫化氢（＋）、发酵葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产气）、赖氨酸脱羧酶（＋）、鸟氨酸脱羧酶ORN（＋）。