不同加工形式茶叶茶多酚含量及抗氧化活性比较研究_王万方

大理学院学报JOURNAL OF DALI UNIVERSITY 第13卷第10期2014年10月Vol.13No.10Oct.2014

［DOI］10.3969/j.issn.1672-2345.2014.10.005

茶（Camellia sinensis Kuntze）在我国有着悠久的饮用历史，茶中含有大量的酚类物质不仅能够保护体内的抗氧化酶系统，而且还可以促进其活性，从而保护细胞膜中的脂质过氧化〔1〕。目前研究证明茶叶提取物具有抗癌、抗衰老、抗辐射、清除人体自由基、降低血糖血脂等重要的药理功能，其主要功能性成分是茶多酚（Tea-polyphenols，简称TP），是茶叶主要抗氧化物质，约占茶叶干重的18%~36%〔2〕。由于产地、采摘季节及采摘要求，加工方式等的不同，茶叶的种类不下千种。从大类上可以分为白茶、绿茶、黄茶、红茶、黑茶等。本文以普洱绿茶、普洱黄茶、普洱蒸酶茶、普洱黑茶、普洱红茶、大栗树碧螺春、大栗树磨锅茶等不同品种及不同加工方式的茶叶为原料，对其中的茶多酚含量及抗氧化活性进行比较研究。茶多酚含量采用福林酚比色法进行测定，多酚类物质可以被福林酚试剂中的钨钼酸定量氧化，钨钼酸自身被还原（使W6+变为W5+），生成蓝色化合物，颜色的深浅跟茶多酚含量呈正相关〔3〕。铁还原力的测定通常用来评价天然抗氧化剂的供电子能力，提取物中的抗氧化成分将Fe3+还原

不同加工形式茶叶茶多酚含量及抗氧化活性比较研究

王万方1，2，张怀令1，陈丽1，史彩艳1，肖怀1*

（1.大理学院药学与化学学院，云南大理671000；2.云南西力生物技术有限公司，昆明650204）

［摘要］目的：比较不同加工形式茶叶中茶多酚含量及其抗氧化活性，为不同需求人群提供选择依据。方法：茶叶粉碎后用95%乙醇超声提取，以没食子酸作为对照品，采用福林酚比色法在波长765nm处测定各种茶叶中茶多酚的含量。抗氧化活性通过紫外分光光度法测定茶叶提取物对Fe3+的还原能力进行评价。结果：不同加工形式茶叶中茶多酚含量及抗氧化活性差异较大，其中绿茶茶多酚含量最高，其抗氧化活性也最好。结论：茶叶中多酚含量与茶叶发酵程度密切相关，发酵程度越大，茶多酚含量越低；茶叶提取物的抗氧化活性与茶多酚含量呈现良好的量效关系，说明茶叶的抗氧化能力主要与其中的茶多酚含量有关。

［关键词］茶叶；茶多酚；含量测定；抗氧化活性

［中图分类号］R28［文献标志码］A［文章编号］1672-2345（2014）10-0018-04

A Comparative Study on the Content of Tea-Polyphenols and Antioxidation Activity in Different Teas

WANG Wanfang1,2，ZHANG Huailing1，CHEN Li1，SHI Caiyan1，XIAO Huai1*

（1.College of Pharmacy and Chemistry，Dali University，Dali，Yunnan671000，China;2.Yunnan West Biological Technology co.,

LTD.,Kunming650204,China）

〔Abstract〕Objective:To compare the tea polyphenols(TPs)content and antioxidant activity in different processed Chinese teas. Methods:The TPs was extracted with95%ethanol though ultrasonic after crushing.The content was determined by spectrophotometry at the wavelength of765nm using Folin-Ciocalteu as the chromogenic agent and gallic acid as the reference.The antioxidant activity was also tested by UV spectrophotometry though adding the Fe3+ion as the oxidant.Results:The sequence of content of TPs and its antioxidant activity were consistency.Green teas and the not fermented teas contained the highest TPs and had the most powerful reducing capacity.While the fermented teas such as red teas and black teas had the lower polyphenols and antioxidant activity. Conclusion:The content of TPs is negatively related with the fermented degree of teas and the antioxidant activity shows a good dose effect relationship with the TPs.

〔Key words〕teas;tea polyphenols;content determination;antioxidant activity

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总第130期第13卷王万方，张怀令，陈丽，等不同加工形式茶叶茶多酚含量及抗氧化活性比较研究

成Fe2+，使溶液颜色发生变化。颜色变化的程度取决于溶液组分的还原力，吸光度值越大，表明还原能力越强〔4〕。

1材料与方法

1.1材料、试剂与仪器

1.1.1材料7种不同品牌及加工形式的茶叶（普洱绿茶、普洱黄茶、普洱蒸酶茶、普洱黑茶、普洱红茶、大栗树碧螺春、大栗树磨锅茶）均购自大理泰兴市场云南绿茶总经销店，均为普通散茶，商家未提供厂家及批号。

原料于45.5℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥至恒重，粉碎，过50目筛，保存于干燥器中备用。1.1.2试剂没食子酸标准品（国药集团化学试剂有限公司，No.20130812）；95%乙醇；10%福林酚试剂；

7.5%碳酸钠溶液；磷酸缓冲液（0.2mol/L pH6.6）；

0.2mol/L磷酸二氢钠（≥99.0%）；0.2mol/L磷酸氢二钠（≥98.0%）；1%铁氰化钾；10%三氯乙酸（≥99.0%）；0.1%三氯化铁；钨酸钠（Na2WO2·2H2O）；钼酸钠（≥99.0%）；去离子水；85%的磷酸；浓盐酸；硫酸锂（Li2SO4）。除标准品外，其他试剂均为分析纯。

1.1.3仪器T6型紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；DHG-9075A型电热恒温鼓风干燥箱（上海-恒科技有限公司）；SSY型电热恒温水浴锅（北京泰克仪器有限公司）；FA2004N电子天平；SY3200-T型超声波清洗器（上海声源超声波仪器设备有限公司）；SHZ-DⅢ型循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）；DX-208型低温冷却液循环泵（北京长流科学仪器公司）；R-210旋转蒸发器。

1.2实验方法及方法考察

1.2.1样品溶液的制备精密称取3份茶叶粉末1.0g于100mL圆底烧瓶中，加20mL95%的乙醇超声提取30min，过滤，滤渣继续以95%乙醇提取2次，每次15mL，合并提取液，用95%乙醇定容至50 mL得茶多酚总提取液，冷藏备用。精密量取总提取液1mL于50mL容量瓶中用超纯水定容，摇匀，得样品溶液。1.2.2对照品溶液的配制精密称取没食子酸对照品50mg于50mL容量瓶中用超纯水定容，摇匀，得浓度为1.0mg/mL的对照品储备液。分别精密移取储备液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 于50mL容量瓶中，向各容量瓶中加入1mL95%乙醇，用超纯水定容，摇匀，即得。

1.2.3吸光度测定精密移取“1.2.1”或“1.2.2”项下配制的溶液1mL于25mL三角瓶中，分别加入10%的福林酚试剂5.0mL，摇匀。反应3~8min，加入7.5%的碳酸钠溶液4mL，摇匀，室温放置1h。以“1.2.2”项中第一份溶液加入相应显色剂为空白对照，于765nm波长处测定吸光度A值〔5〕。

1.2.4显色时间考察样品溶液按“1.2.3”项操作至加入全部显色剂，摇匀。从10min开始测定其吸光度，每10min测定1次至120min。结果显示加入显色剂后，样品吸光度值在不断增加，开始的30 min内变化较大，30min以后，每10min的增加值较低，并基本为一恒定常数，故显色时间定为30min。

1.2.5线性关系考察精密量取“1.2.2”项下各溶液1mL，按“1.2.3”处理，以没食子酸的浓度（C）为横坐标，吸光度为（A）纵坐标作图，得回归方程A= 0.1061C+0.0675（r=0.9998）。结果表明没食子酸在1.110～11.10μg/mL之间呈良好的线性关系。1.2.6精密度试验精密移取5份“1.2.2”项下浓度为0.0222mg/mL的标准品溶液1mL，按“1.2.3”项操作，测得吸光度分别为0.2993、0.2983、0.3023、0.3063、0.3123，RSD为1.89%，结果表明仪器的精密度良好〔6〕。

1.2.7重复性试验精密称取6份普洱绿茶粉末1.0g，按“1.2.1”、和“1.2.3”项操作，测得吸光度值并带入回归方程后的茶多酚含量分别为：182.46、181.35、185.15、176.53、179.34、181.53mg/g，RSD为1.61%。

1.2.8稳定性试验精密称取普洱绿茶粉末1.0g，按“1.2.1”项操作得样品溶液，分别于1、2、4、8、12、24h密移取1mL样品溶液，按“1.2.3”项操作，测得吸光度分别为0.8300、0.8523、0.8593、0.8647、0.8717、0.8747，RSD为1.90%，表明提取物溶液在

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