尿中砷的原子荧光光度法1原理

尿中砷的原子荧光光度法

1 原理

尿样经微波消解后，在酸性条件下，加入硫脲使五价砷预还原为三价砷，再加入硼氢化钠或硼氢化钾使其还原生成砷化氢，在193.7nm下用原子荧光光度法测定。

2 仪器

2.1 塑料瓶，50mL。

2.3 容量瓶，25mL。

2.4 具塞比色管，25mL。

2.5 分析天平，感量：0.1mg。

2.6 微波消解仪，配10mL消解罐，电热消解赶酸装置。

2.7 原子荧光光度计，砷空心阴极灯。

3 试剂

3.1 盐酸（ρ20=1.19g/mL），优级纯。

3.2 硝酸（ρ20=1.42g/mL），优级纯。

3.3 氢氧化钠（NaOH），分析纯。

3.4 硼氢化钾（KBH4），优级纯。

3.5 硫脲（CH4N2S），分析纯。

3.6 抗坏血酸（C6H8O6），分析纯。

3.7 盐酸溶液，5%（v/v）。

3.8 氢氧化钠溶液（5g/L）。

3.9 硼氢化钾溶液（30g/L）：称取3g硼氢化钠，溶解于氢氧化钠溶液中，加至100mL。

3.10 硫脲-抗坏血酸混合液（50g/L）：称取5g硫脲加约80mL纯水，加热溶解，待冷却后加入5g抗坏血酸，稀释至100mL，存储在棕色瓶中，可保存1个月。

3.11 砷标准贮备溶液：砷单元素标准溶液。

3.12 砷标准应用溶液［ρ(As)=100μg/L］：用盐酸溶液将砷单元素标准溶液稀释成100μg/L 砷标准应用溶液。

4 样品的采集、运输和保存

按《职业卫生生物监测总则》进行样品采集。尿液按1%（v/v）的比例加入盐酸后保存。在4℃条件下样品有效期为14d。

5 分析步骤

5.1 仪器操作参考条件

波长：193.7 nm

原子化器温度：200℃

原子化器高度：8 mm

载气流量：300 mL/min

屏蔽气流量：900 mL/min

进样体积：1mL

延迟时间：0.5s

读数时间：13s

5.2 标准曲线的配制和测定

取6支25mL容量瓶，各加入不同体积的标准应用溶液和5.00mL硫脲-抗坏血酸混合液，用盐酸溶液定容至刻度，配制成浓度为0μg/L~30μg/L的标准系列溶液，室温反应30min后，

参照仪器操作参考条件测定，以标准系列溶液的荧光强度值与相应的砷浓度（μg/L）计算线性回归方程。

5.3 样品处理和测定

将尿样放至室温混匀，取5.00mL尿样于样品消解罐中，加入3mL硝酸，微波消解后，冷却卸压后取出样品罐，置于电热消解仪上于120℃赶酸约90min~120min；将赶酸后的液体定量转移到25mL比色管中，同时加入5.00mL硫脲-抗坏血酸混合液，用盐酸溶液定容至25mL，室温反应30min后测定；用测定标准系列溶液的操作条件，测定试剂空白（消解后）、样品空白、容器空白、运输空白和样品溶液，由回归方程计算样品溶液及样品空白溶液中砷浓度（μg/L）。

6 计算

6.1 按下式计算样品中砷的浓度：

C = 5C1

式中：

C —样品中砷浓度，μg/L；

C1 —由回归方程计算所得样品溶液中砷的浓度，μg/L；

5 —样品预处理体积转换倍数。

6.2 按照肌酐或比重校正方法对样品结果进行校正。

7 说明

7.1方法检出限为0.3μg/L；方法定量下限为1.0μg/L；方法测定范围为1.0μg/L~150μg/L（以取尿样5.00mL计）；方法精密度范围为0.87%~1.75%；方法加标回收率范围为95%~105%（加标浓度10.0μg/L ~ 80.0μg/L）。

7.2硼氢化钾的浓度对测定结果有较大的影响，本法采用浓度为30g/L硼氢化钾溶液。硼氢化钾水溶液的稳定性较差，必须加入一定量的氢氧化钠或氢氧化钾以提高其稳定性。

7.3 5倍砷浓度以下的锑离子、20倍砷浓度以下的铅离子、25倍砷浓度以下的锡离子对测定无干扰；钾和钠离子对测定无干扰。

7.4通常室温条件下，硫脲30min可将五价砷还原为三价砷，故样品消化定容后30min即可进行测定。

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