木耳菌种制备方法
怎样制备黑木耳菌种
怎样制备黑木耳菌种
黑木耳菌种制作包括母种、原种、栽培种的制作三个程序。
一、母种的分离和培养
1.母种培养基。
配方为马铃薯葡萄糖琼脂。
配制成试管斜面，经常规灭菌，即可使用。
2.母种分离和培养。
分离方法有孢子分离法、耳木分离法和组织分离法，无论哪种方法，都可获得菌种。
①孢子分离法：这种方法获
得的菌种变异较大，适合于育种采用。
②耳木分离法：成功率高，种性较稳定，生产中多用此法。
③组织分离法：选片大、肉厚、成
丛生长的鲜耳或当年生长经晒干的干耳再经清水泡胀，洗净，进行无菌操作分离。
以上方法均在28℃下培养。
分离得到的母种必须经过转管纯化，质量评定，出耳试验，才能作进一步扩大生产。
二、原种制作
培养基配方：木屑78%，米糠20%，蔗糖1%，石膏粉1%，水65%，pH为6。
把各种培养料拌匀，调至适当水分，装瓶，灭菌。
灭菌后
待瓶温降至30℃送入接种室，无菌操作，接入母种块。
在28℃下培养。
三、栽培种制备
栽培种是直接在生产中使用的菌种，由原种进一步扩大生产而得到。
黑木耳的栽培种有几种类型。
木耳菌种培育技术
木耳菌种培育技术木耳是一种非常受欢迎的食用菌，它不仅味道鲜美，而且营养丰富。
在中国，木耳的种植历史已有数千年，而现在，木耳的种植技术已经得到了很大的发展。
本文将介绍木耳菌种培育技术，帮助读者更好地了解木耳的生长过程和种植技巧。
一、木耳菌种的选取在木耳菌种的选取方面，我们应该选择生长稳定、营养丰富、菌丝生长迅速的菌株。
同时，我们还应该注意避免选择虚弱、病害较多的菌株，以免影响后续的种植效果。
二、木耳菌种的制备木耳菌种的制备是木耳种植的重要环节之一。
通常，我们可以采用两种方法来制备木耳菌种：一是利用菌丝体进行制种，二是利用孢子进行制种。
1. 利用菌丝体进行制种利用菌丝体进行制种是一种比较简单的方法。
具体操作步骤如下：（1）将新鲜的木耳菌丝体分离出来。
（2）将分离出来的菌丝体接种到含有木耳菌丝体生长所需的营养物质的培养基上。
（3）将培养基培养于适宜的温度和湿度下，待菌丝体生长到一定大小后，即可用于制种。
2. 利用孢子进行制种利用孢子进行制种是一种比较复杂的方法。
具体操作步骤如下：（1）将新鲜的木耳菌盖采摘下来，放置于培养皿中。
（2）将木耳菌盖放置于含有适宜营养物质的培养基上，待孢子成熟后，即可用于制种。
三、木耳菌种的培养木耳菌种的培养是木耳种植的关键环节之一。
在培养过程中，我们应该注意以下几点：1. 温度控制木耳生长的适宜温度为20℃-25℃，因此，在培养过程中，我们应该控制好温度，以确保木耳的正常生长。
2. 湿度控制木耳生长需要一定的湿度环境，因此，在培养过程中，我们应该注意保持适宜的湿度，以促进木耳的正常生长。
3. 通风控制通风对于木耳的生长也非常重要，因此，在培养过程中，我们应该注意通风，以保持适宜的氧气浓度和二氧化碳浓度。
四、木耳菌种的保存为了保证木耳菌种的质量和数量，我们应该采取适当的措施进行保存。
通常，我们可以采用以下两种方法来保存木耳菌种：1. 冷冻保存将木耳菌种放置于低温环境中，以达到冷冻保存的目的。
木耳液体菌种制作规程讲解
液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
黑木耳菌种制作方法
入２ ５～ ２ ８ ℃培养箱 （ 室 ）内培养 。培养
过程 中 ，要 每天 检查 菌丝 生长 发 育情
况 。 如 发 现 菌种 瓶 内有 杂 菌 污 染 ，应 及
时清除处理。黑 木耳 菌丝纯 白色 ，先端
菌 丝 整 齐 一 致 向 下生 长 。 如菌 丝 颜 色 不
纯 ，或虽 为 白色但 却杂乱无 章地生 长 ，
１ ． 培养基的配制。（ １ ）培 养基配方 。木屑培养基 ：锯木
屑７ ８ ％ ，麸 皮 （ 或米糠 ）２ ０ ％， 蔗糖 １ ％ ，石 膏 粉 １ ％ ，水 适
量 ，ｐ Ｈ值 ６ ． ５ 。棉 籽 壳 培 养 基 ：棉籽壳 ９ ８ ％，蔗糖 ０ ． ８ ％， 石膏粉 １ ％，过磷酸钙 ０ ． ２ ％， 水适量 ，ｐ Ｈ值 ６ ． ５ 。（ ２ ）配制 方法 。选用 上述任 一种 培养 基 ，按配料 比例 ，将各种 原 料称 好 ，拌 匀 。将 蔗糖放 入 容 器 内 ，加 少量 清 水 溶解 ， 倒入 原料 中充分 翻拌 。再 徐 徐加 水 ，边 加边 翻拌 ，直至 用 手紧握原料 ，指缝有水渗 出而不滴下 为 止 。最 后 用 ｐ Ｈ试 纸 调 试 酸 碱 度 至
三 、注 意 事 项 １ ． 培 养 基 木 屑一 定 要 选 用 杂 木 屑 ，
１ ８ ／ＮＯ ＮＧ Ｃ Ｌ 』 Ｎ Ｘ Ｉ Ｎ ｛ Ｉ Ｓ Ｉ 扼 Ｊ／袭村新 技术
培养基 、棉籽壳培养基 、枝条及木块培 养基等制作 。木屑及棉籽壳培养基的配
方及制作方法 同原种一样 ，下面介绍枝 条种 的制作方法。 枝条培养基配方 ：枝条 ５ Ｏ 千克 ，木
屑９ 千克 ，麸皮 （ 或米糠 ）５ ． ４ 千克 ，蔗
食药用菌
木耳菌种制备方法
（一）母种的制备用试管制成斜面培养基，并接种原始试管种（保留种，并用于生产的母种即为生产母种，可用于扩接原种。
1.培养基配方配方一综合马铃薯培养基马铃薯200克葡萄糖20克磷酸氢二钾2克硫酸镁0. 5克维生素B110毫克琼脂20克水1000亳升PH值自然配方二合成培养基马铃薯20克葡萄糖20克磷酸二氢钾2克蛋口腺10克牛肉膏5克酵母膏5克硫酸镁0. 8克水1000毫升PH值自然2.培养基制作方法先将马铃薯洗净去皮切成簿片，称取200克加水1000毫升，煮沸15-20分钟, 用4层纱布过滤,取其滤液并补足水至1000毫升，加入琼脂20克,再加热，琼脂溶化后,再加入其它配方中的药品。
培养基的分装，应在培养凝固前进行（琼脂培养基40°C凝固）一般用漏斗，或分装瓶，下端连接一段软橡皮管，橡皮管下面再连接一水段玻璃管，在橡皮管上安装一个止水弹簧夹，分装时将玻璃管细口插入试管内，但不要碰到管壁，每支试管装入量为度管长度1/4o装好后塞上棉塞，每10支试管扎一捆，棉塞上用塑料纸封扎好，用线绳捆扎起来。
3.灭菌将分装后的试管扎捆好,放入高压蒸气灭菌锅，在1公斤/厘米压力下（锅入温度达121°C）灭菌20分钟，使微生物包括芽子色全部杀死。
待压力降到0度时，慢慢放出锅内气体，趁培养基没有凝固时，将试管摆成斜面。
4.接种、培养通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上，置28°C、3天后将温度降至24°C 继续培养,12-15天左右，菌丝长满整个试管斜面，即成（生产）母种。
（二）原种、制备母种接种到原种培养基上，进行扩大繁殖育种即为原种,原种一般采用广口瓶或袋装。
1.培养基配方配方一木屑隸皮培养基阔树木78%鉄皮20%糖1%石膏粉1%水65% PH值自然配方一•棉籽壳木屑混合培养基棉籽壳90%糖1%隸皮5%过磷酸钙3%石膏粉1% PH值自然2.拌料与装袋选用新鲜无霉变原料，根据生产所需的数量，汁算配料总量，将荻皮、石膏粉均匀的混合在培养料里，糖和过磷酸钙溶于水解后，按上述干料量加入水，比例为1:1、3拌匀,培养料含水量60%为宜，含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。
木耳的栽培实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在通过实践操作，了解木耳的栽培技术，掌握木耳的生长周期和条件要求，同时验证不同栽培条件下木耳的生长状况和产量，为木耳的规模化生产提供科学依据。
二、实验材料1. 菌种：紫木耳菌种（编号：ZM-2018）2. 栽培基质：稻草、河沙3. 设备：电子秤、温度计、湿度计、喷雾器、灭菌锅、无菌操作台、接种针、菌袋、沙床等4. 工具：剪刀、铁锹、筛子、塑料薄膜、绳子等三、实验方法1. 菌种制备：将菌种在无菌操作台中按照比例接种到预先制备好的菌袋中。
2. 菌袋培养：将接种后的菌袋放入恒温培养箱中，控制温度在25-28℃，湿度在60-70%，培养至菌丝满袋。
3. 沙床准备：选择干净无菌的河沙，晒干后铺设在栽培场地，厚度约为10厘米，距离墙两侧80厘米用砖铺设两排人行采耳走道。
4. 菌袋转接：将培养好的菌袋脱去袋筒，按照一定的间距栽植在沙床上。
5. 水分管理：采用喷雾器定期喷水，保持沙床湿润，使空气相对湿度达到85-95%。
6. 温度控制：通过开闭门窗和覆盖薄膜等方式，控制室内温度在20-25℃之间。
7. 光照管理：白天盖膜、夜间揭膜，模拟自然光照条件。
8. 病虫害防治：定期检查，发现病虫害及时采取措施进行防治。
四、实验步骤1. 菌种制备：按照菌种制备步骤，将菌种接种到菌袋中。
2. 菌袋培养：将接种后的菌袋放入恒温培养箱中，培养至菌丝满袋。
3. 沙床准备：按照沙床准备步骤，准备沙床。
4. 菌袋转接：将菌袋脱去袋筒，按照一定的间距栽植在沙床上。
5. 水分管理：定期喷水，保持沙床湿润。
6. 温度控制：通过开闭门窗和覆盖薄膜等方式，控制室内温度。
7. 光照管理：白天盖膜、夜间揭膜。
8. 病虫害防治：定期检查，发现病虫害及时采取措施进行防治。
五、实验结果与分析1. 菌丝生长情况：经过一个月的培养，菌丝生长旺盛，菌袋内菌丝呈白色，质地均匀。
2. 木耳生长情况：在适宜的条件下，木耳生长迅速，耳片肥厚，产量较高。
木耳液体菌种制作规程
液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
黑木耳母种培养基配制后的接种与培养
黑木耳母种培养基配制后的接种与培养1.固体菌种生产固体菌种是菌丝体生长在固体培养基中而形成的固体形态菌种。
试管母种（1级种）菌种通常被分为3级。
1级种也叫母种或试管种，可用组织分离法或孢子分离法获得母种。
2级种也叫原种，是利用母种的菌丝体接入木屑培养基中所产生的菌种。
3级种也叫栽培种，是利用原种再扩繁一次所产生的菌种，它直接用于生产，因此也叫生产种。
经过母种—原种—栽培种的不断扩大繁殖后，菌丝体的数量越来越多，越来越强壮，利用这样的菌丝体投入生产就可以生长出优良的子实体。
母种培养基的配制：（1）常用配方：马铃薯200克、白糖20克、琼脂20克、水1000毫升。
为了强化营养，有条件的生产者可在上述培养基中添加蛋白胨3.0克、磷酸二氢钾3.0克、硫酸镁1.5克。
（2）配制方法：首先把马铃薯削皮、切片、水煮，八分熟后取其汁液，再将汁液小火加热，放入琼脂、白糖。
溶化后把培养基装入规格为18毫米×180毫米的试管中，装入高度为管长的1/4或1/5为适宜。
分装后试管塞紧棉塞，每7支捆成1捆，用牛皮纸包扎，准备灭菌。
（3）培养基灭菌：用手提式高压蒸汽灭菌锅或家用高压锅灭菌，在0.12兆帕压力下（锅内温度121℃）灭菌40分钟。
待温度降至60℃时取出摆斜面，斜面长度最好占管长的2/3左右比较合适。
2.菌种分离与扩大培养菌种分离方法有孢子分离法、组织分离法、耳木分离法。
孢子分离法是选用当年生无杂菌污染的鲜耳片，以黑、厚、大为佳，经无菌水冲洗几次，用丝线将耳片腹面向下吊挂，另一端吊挂在装有培养基的三角瓶口部，加棉塞封口，在25～28℃温箱中接收孢子并培养成菌丝体。
组织分离法是选用优质耳片，表面用75%酒精棉球擦拭2～3遍，用酒精棉包住耳片约2分钟，剪取远离耳基没有筋的部位约0.2平方厘米。
在无菌条件下，接入试管斜面培养基上，经28℃左右的温度培养长出菌丝体。
耳木分离法是从黑木耳的段木中分离菌丝体获得菌种的方法。
袋栽黑木耳菌种制作技术
３３接 茵 ．
培养基进行试管分装后及时 灭菌 。每 １ ０支试管捆绑在一 起， 并用牛皮纸或报纸包裹 ， 立放 入高压锅 内 ， 直 盖好锅 盖 ， 打 开排 气阀开始加 热 ， 当排气 阀急速排 出热气 时 ， 闭排气阀 ， 关
气 压 升 至 ０１ ａ 维 持 ３ ． Ｍｐ 时 ０分 钟 后 停 止 加 热 ，气 压 降 至 Ｏ０Ｍｐ 时打开排 气阀 ，气 压归零时拧开螺栓将锅盖错开缝 ， ． ５ ａ 以烘干棉塞 ， 几分钟之后打开锅盖 。
２母 种 制 作 ．
３１１ ． 锯木屑培养基 原料按 比例 称取 ， ． 先将 锯木屑 、 麦麸 、
石膏 混合 ， 将蔗糖 溶入 适量水 中后拌入 混合料中 ， 使含水量达 到 ６ ％～６％，即 以手握紧培 养料后指 缝间见 水但不 下滴为 ０ ５ 宜。装瓶 （ ７ ０ 原 种瓶 或 ５０ 点滴瓶 ）用棉 塞封 口。 用 ５ｍｌ ０ ｍｌ ， ３１ ．． 米粒培 养基 将玉米 粒浸泡 １ ２玉 ２小时 以上 ，然后在 沸水 中煮半小时 ， 以玉 米粒变软膨大且不开 裂为度 ， 拌入玉米 粒干物质重的 １ ％的石膏 ， 装瓶 。
袋 栽 黑 木耳 菌种 制作 技术
文， 吕树 尧 黄 金 亮 刘 丹
（ 敦化市马铃薯开发繁育中心 １３ ０ ） ３７ ０
１选 择 适 宜 的 品 种 ． 长 满 斜面 。
３ 原 种 制 作 ． ３１原种 培 养 基 配 方及 制 作 ．
选择在本地经过栽培 试验且表现 良好的菌株 ，要求具备 高产稳产 ， 逆性强 ， 抗 产品质量好等特 点。在敦化市 表现 较好 的品种有长 自山 ７ 、 ２ 、 号 黑 ９丰收 ２ 号等 。
出的菌丝洁 白 、 健壮有 力 ； 勤通风 ， 以提高培 养室空气 中 ０： 含
黑木耳液体菌种的制备工艺及质量标准
黑木耳液体菌种的制备工艺及质量标准050000摘要：黑木耳作为食药两用真菌，在我国的国民经济、人类健康中展现出巨大的开发前景。
从药用角度来讲，主要是黑木耳天然药物活性成分的提取、分离纯化以及相关药品、保健品的开发等；然而，目前市场上的相关药品甚少，部分产品只是局限于动物试验测试。
从食用角度来讲，我国是世界黑木耳产量最多、食用最多的国家。
近年来，黑木耳已成为我国栽培量第二大的食用菌品种，但各个产地生产的黑木耳品质参差不齐，具有优良性状的黑木耳新品种更是少见。
关键词：黑木耳；液体菌种；工艺；质量引言多糖是木耳属真菌中一类重要的化合物，广泛存在于木耳子实体、菌丝体等组织中，近代研究表明，包括木耳在内的多种食用菌多糖是一类具有开发价值和利用潜力的天然化合物，对调节机体免疫力、抗氧化、抗肿瘤等方面表现出了良好的活性。
例如，黑木耳中的水溶性多糖通过调节小鼠肠道微生物群落来降低由葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎。
角质木耳、毛木耳、黑木耳胞内多糖能够显著促进细胞增殖，对抗炎和抑菌表现出了较好的活性，同时，黑木耳子实体中的吡喃糖多糖还具有调节血脂保护肝脏的作用。
以心脑血管病人为研究对象，进行不同阶段的黑木耳多糖摄入治疗，通过病人的康复自愈能力分析结果发现黑木耳多糖能够促进心脑血管人体的康复。
对黑木耳多糖进行了提取及结构解析并发现黑木耳多糖可以通过促进巨噬细胞的增殖和吞噬能力，该作用在人体免疫调节方面具有广阔的应用前景。
1.培养基固体培养基（ＣＰＤＡ）：液体母种培养基，为不添加琼脂的ＣＰＤＡ培养基；基础发酵培养基：马铃薯（去皮）２００．０ｇ／Ｌ、蛋白胨３．０ｇ／Ｌ、麦麸１０．０ｇ／Ｌ、葡萄糖２０．０ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ１．０ｇ／Ｌ，初始ｐＨ值自然。
2.母种培养基ADA培养基:马铃薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，琼脂粉20g，加水至1000ml。
1.1.3.2母种替换培养基在ADA培养基的基础上，分别用不同量的麦麸、稻杆和木屑替换ADA培养基中的马铃薯。
黑木耳的育种操作流程
黑木耳的育种操作流程东北黑木耳的育种备料,装瓶,各个操作流程都应按规范进行.一.黑木耳的菌种配料先将81%锯末称好,再将15%麦麸或稻糠,2%的黄豆粉或豆饼粉,1%石膏干拌拌均,再把1%红糖溶解在5升水中,将溶解的红糖水与麦麸,黄豆粉,石膏先干拌的混合物拌均,拌均后闷堆30分钟后,再与81%锯末掺和在一起干拌拌均,拌匀后加水翻3--4遍搅拌均匀,使含水量达到65%,用测水仪的指针扎入锯末,看表盘指针读数到65即可.用土法测,手紧握料,在手指间有水珠渗出稍滴水为宜.二.装瓶将拌好的料闷堆1--2小时后装瓶,用黑白铁制作能坐在葡萄糖注射液瓶子上的漏斗,将拌完的料用自制的6分盘圆钩将拌完的料装入瓶中.再用1厘米的木棍从瓶口中央到瓶底打个孔.再准备一盆清水将装好的葡萄糖注射液瓶子用手以45度的角度把瓶口放入水盆中转一圈,这样就把瓶口沾的料涮干净了,再塞好棉塞。
在生产过程中当天拌好的料必须当天装瓶当天灭菌.三.灭菌将装好的葡萄糖注射液瓶子放在常压或高压灭菌锅里灭菌,在15千克/平方厘米的压力下保持1.5--2小时,等压力降至零时,将锅盖打开三分之一,用锅内余热将瓶口及棉塞烘干,30分钟后将葡萄糖注射液瓶子趁热取出,立即放在接种箱内.若用常压灭菌灶灭菌,保持6--8小时,将锅盖打开1/2,用锅内余热将瓶口及棉塞烘干.20分钟后将葡萄糖注射液瓶子趁热取出,灭菌一定要彻底.四.接菌黑木耳在接菌时一定要按无菌操作进行,提高成品率,灭菌后出锅降温至30度以下的瓶可以接种,最佳接菌温度为25到30度之间.目前,黑木耳的接菌方法很多,可根据自已具体情况和条件定,要注意,连续接种时间不要太长,以免箱内温度过高;一个试管一级菌种接葡萄糖注射液瓶10瓶,先将试管一级菌种在无菌台式酒精灯前拔下棉塞,再将试管里的一级菌种分成10等份,把每份移接到灭菌的葡萄糖注射液瓶子里,一定注意一级菌种不能贴在瓶壁上,立即塞上棉塞缩短接种时间不给杂菌侵入的机会.五.养菌在黑木耳菌丝培养全过程中,要创造使菌丝体健壮生长,又能控制黑木耳的子实体正常发育的条件,其中温度是最重要的因素.培养室的第一周温度为18度到25度.最适温度为18--23度之间.培养室的温度不宜超过25度.培养室的空气相对湿度为50%--70%,湿度过高,易生杂菌.光线能诱导菌丝体扭结形成原基.为了控制培养菌丝阶段不形成子实体原基,培养室应保持黑暗或极弱的光照强度.培养室内四周撒一些生石灰,使之呈石破天惊生环境,减少霉菌繁殖的机会.瓶堆积在地面上培养菌丝时,要经常翻动.调换瓶子的位置,在检查杂菌时,一定要轻拿轻放,发现杂菌应及时取出,另放在温度较低的地方继续观察.30天基本就长好了,35天就可以接种栽培袋了.。
黑木耳菌种母种的生产技术
●食用菌栽培●黑木耳菌种母种的生产技术1母种培养基配方母种培养基用试管作培养容器，装入培养液并经过高压灭菌后摆成斜面，所以又称试管斜面培养基，常用于母种扩大培养及菌种保存。
1.1生产母种配方1.1.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA ）：马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂18~20克，水1000毫升。
1.1.2马铃薯葡萄糖蛋白胨琼脂培养基：马铃薯200克，蛋白胨10克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升。
1.1.3洋葱酱油琼脂培养基：洋葱煎汁100毫升，酱油50毫升，琼脂20克，水1000毫升。
1.1.4木汁麸皮琼脂培养基：阔叶树木片500克，硫酸铵1克，麸皮或米糠100克，蔗糖20克，琼脂20克，水1000毫升。
1.1.5木屑煮汁培养基：阔叶硬杂木屑40克，马铃薯200克，蔗糖20克，琼脂18~20克，水1000毫升。
1.2保藏菌种配方1.2.1玉米粉琼脂培养基：玉米粉30克，琼脂20克，水1000毫升。
1.2.2玉米粉酵母膏葡萄糖琼脂培养基：玉米粉50克，酵母膏10克，葡萄糖10克，琼脂15~18克，蒸馏水1000毫升。
1.2.3完全培养基：葡萄糖20克，蛋白胨2克，硫酸镁0.5克，磷酸氢二钾1克，磷酸二氢钾0.5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
2培养基制作2.1称量和配制先按配方准确称取易溶物质，置于烧杯或搪瓷杯等容器内（不用铜、铁器皿，以免铜、铁锈混入培养基），加入总量1/4~1/3的清水搅成糊状。
难溶物质按配方称取后加适量清水，加热并不断搅拌使其溶解；微量元素和生长素因需要量少难以准确称取，可称取一定量先溶解调成高浓度母液，再按比例换算后从中取出需要的用量。
去皮挖芽眼切块的马铃薯、阔叶树木片、阔叶硬杂木屑及洋葱等物质，按配方称后放入容器内，加清水1000毫升，文火煮沸20~30分钟，然后用4~6层湿纱布过滤取汁。
玉米粉称后加1000毫升清水搅拌均匀，并加热至70℃保持60分钟，再用湿纱布过滤取汁，最后补足水量至1000毫升。
黑木耳菌种生产
在原种培养过程中，培养基的背面会变成棕褐色或酱色，这是由于某些品种的木耳蔚丝会分泌一些色素而造成的，是正常现象。
无论采用上述哪一种方法，均可获得黑木耳原种。原种种性的好坏，直接影响母种、栽培种的质量，并与今后木耳产量的高低关系极为密切。尤其是孢子分离法获得的原种，其生产性能有可能比原有菌株好，也有可能比原有菌株差。因此，分离所得的原种或从外地引进的菌种都要进行出耳鉴定，从中选择出耳早、产量高、质量好的菌株进行扩大培养，应用于生产。
3.4 灭菌 原料分装完毕及时灭菌，不宜过夜。灭菌方式采用常压灭菌法，温度控制以灶内菌袋温度全部达到 100℃后，再持续灭菌16~24小时，确保灭菌完全彻底。
3.5 接种 待菌袋冷却后即可接种， 接种时不论采取何种接种方式， 首先应严格检查母种（二级种）质量，对菌丝老化，含有杂菌的母种予以清除。 二是严格检查接种环境，包括用具，接种箱或接种室及密封程度是否完全达到无菌标准和要求。 三是接种人员必须穿工作服，戴帽子，戴口罩，操作熟练。
配方乙：棉皮 10斤，木屑 70斤，，麸皮 18斤，蔗糖 1斤，石膏 1斤，水 适量。
配制方法：除枝条种先将枝条用70％的糖水浸泡12小时后，捞出木屑麸皮，倒在一块搅匀，再把余下的30％蔗糖 和石膏用水化开洒在上面，一面加水一面搅拌，其他操作方法与生产母种相同。
黑木耳菌种生产技术
(一)原种分离经常采用耳木分离法与孢子法，很少采用组织分离法。
1．耳木分离法耳木的选择关系到分离是否成功及菌种质量的好坏。要选择出耳早，耳片生长稀密适中或呈菊花状，色黑、朵大、肉厚、质量好、无杂菌的第一年或第二年的耳棒，将最好的一段锯下，充分晾干，并在准备分离的部位做好记号。分离时从该处锯下1 cm左右去皮的薄片，带入接种箱，以挤干后的酒精棉花消毒表面，用无菌解剖刀切去吸有酒精的表层，在菌丝蔓延的部位将菌材切成火柴梗大小，用无菌镊子取一根放入斜面培养基中部。如果用培养皿平板分离，每一平板可放4根。然后放在28—30~c下培养2—3天，就可看到白色绒毛状、生长缓慢的木耳菌丝。如果在24小时左右就长出菌丝，而且生长很快，通常都是杂菌菌丝，耳木分离的菌丝经过1—2次提纯，即可作为原种，
木耳种植_精品文档
木耳种植木耳种植篇(一):木耳的种植方法木耳含有丰富的蛋白质、脂肪、维生素和矿物质，具有非常高的营养价值，自古以来，就是我国重要的食用菌和药用菌。
下面要为大家分享的就是木耳的种植方法，希望你会喜欢！种植木耳的方法(1)菌种制备。
方法同段木栽培法。
(2)配制培养料。
培养料配方有：棉予壳90%，麸皮8%，白糖、石膏粉各1%;锯木屑78%，麸皮20%，白糖、石膏粉各l%;玉米蕊79%，麸皮20%，石膏粉1%;锯木屑40%，棉子壳43%，麸皮l 5%，石膏粉、白糖各l%。
配制时选用上述一种原料配方，加水拌匀调温至含水量65%左右即可。
(3)装袋灭菌。
拌好的料要及时分装。
一般用1 7厘米×30厘米×0.05厘米的低压塑料袋装料(用于常压灭菌)，每袋装料0.3公斤，料要松紧适当。
装好后要将袋口扎紧。
灭菌时采用常压灭菌(连续蒸煮lo—12小时，再闷一晚上.)，冷却后从锅中取出。
(4)接种培养。
接种在灭菌箱中进行(要事先用甲醛灭菌)，按无菌操作要求将菌种接入袋中央处，每瓶菌种接30一40袋。
接种后的袋子应放在24℃--27℃的避光条件进行培养，经40天左右菌丝长满料袋即可。
(5)出耳管理。
菌袋发好菌后10天左右，要及时移到出耳场地让其出耳。
耳袋进入耳房前，耳房要彻底消毒，进入耳房后要给予适当光照，提高耳房湿度至90%左右，温度控制在2l℃一26℃。
数天后即可开袋，开袋前要先将袋子没入0.1%的高锰酸钾溶液中消毒，稍千后用双面刀片(经火焰灭菌)在四周划3—4条口(长l o厘米左右，两端要留有余地)，注意适当通风，5—7天后形成耳基，此时要特别注意提高湿度，减少料内水分蒸发。
今后的管理主要是以提高湿度为主，向料袋适当喷水为辅。
切忌在高温季节，连续不断往料袋上喷水，以免污染杂菌或烂耳。
木耳的种植方法首先把温室或大棚的地趟平，然后用高锰酸钾和甲醛合在一起消毒，地面也可洒些白灰消毒，消毒后可以把培育好的食用菌黑木耳袋，按每平方米5—6袋摆放，在摆放前把食用菌袋随着圆型用刀划九个口，每个口大约5厘米左右，用于长出木耳用。
木耳液体菌种制作规程
液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
木耳菌种分离方法
木耳菌种分离方法近年来，随着山区开矿和城镇建没使木耳物种的数目日益减少，对木耳种质资源的收集、保存及研究成为一项必不可少的基础工作。
而一株优良的木耳菌株经过多年的扩大生产使用，其优良特性会出现严重的退化现象，也必须进行重新分离复壮，为了保证木耳产业的正常发展，不间断地选育优良菌株势在必行。
传统的选育菌种大多是通过组织分离方法，多用鲜耳直接分离或将干耳用水泡湿后再分离。
目前也有采用干耳进行分离的，但程序繁杂，所用药品较多，条件差的地方难以做到。
由于受多种药物的作用，即使分离成功，菌丝萌发和生长也很缓慢。
黑木耳的耳瓣薄，并富有胶质，所以在过去的分离法中很少采用耳片组织分离。
本方法克服现有的干耳菌种分离方法中所存在的操作复杂、成本高、菌丝分离成功率较低、质量差等缺陷，是一种操作简单，用材少（包括药品），成本低，菌丝萌发快，长势强，浓密，分离成功率高的干耳组织分离方法，以解决木耳的常规分离法所存在的一系列技术问题，为广大制种工作者提供方便。
1 供试材料1.1 耳片来源2008年将从江西省分宜县大岗山、海南省陵水县吊罗山、海南省昌江县霸王岭、重庆市重庆师范大学、湖北省武汉市黄鹤楼景区、河北省涞水县北辛庄等野外采集的黑木耳[Auricularia auricula（L.ex Hook.）Underw.]、毛木耳［Auricularia polytricha（Mont.）Sacc.]及皱木耳（Auricularia deli～cata（Fr.）Henn.）标本带回室内自然阴干或于28℃的烘箱烘干，干燥后即可用于组织分离菌种。
1.2 培养基制备①、分离培养基：麦芽浸粉20g，琼脂18g，水1000mL，pH自然。
将分离培养基煮好后趁热分装于5mL的离心管中，装液量为1.8mL，装于离心管架上，于121℃高压灭菌20min，灭菌后将离心管架倾斜摆放使培养基成一斜面备用。
②、纯化培养基：麦芽浸粉20g，葡萄糖20g，琼脂18g，磷酸二氢钾3g，水1000mL，pH自然。
一种木耳菌种的制作方法[发明专利]
![一种木耳菌种的制作方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/c592b946284ac850ac024239.png)
专利名称：一种木耳菌种的制作方法专利类型：发明专利
发明人：李秀文
申请号：CN200910103308.8
申请日：20090304
公开号：CN101822167A
公开日：
20100908
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种木耳菌种的制作方法，属木耳菌种制作领域，它能有效的避免在木材的表面上生长木耳的方法产量非常的低，不能提高木耳的产量的缺点。
一种木耳菌种的制作方法，将300克小麦去掉外壳，用水清洗干净，放入水中浸泡50小时，水的温度保持在27℃，等到小麦泡胀后取出来放入水中煮70分钟，然后取出来自然冷却，然后加入100克木耳菌种，将300克小麦和100克木耳菌种放在一起搅拌均匀，然后装入塑料袋内，制种完成，最后放入温室内即可生产木耳。
主要用于制作木耳菌种。
申请人：重庆市永川区永双科技有限公司
地址：402160 重庆市永川区中山路办事处汇龙大道
国籍：CN
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(一)母种的制备
用试管制成斜面培养基，并接种原始试管种(保留种，并用于生产的母种即为生产母种，可用于扩接原种。
1．培养基配方
配方一综合马铃薯培养基
马铃薯200克葡萄糖20克磷酸氢二钾2克硫酸镁0.5克
维生素B110毫克琼脂20克水1000毫升PH值自然
配方二合成培养基
马铃薯20克葡萄糖20克磷酸二氢钾2克蛋白胨10克牛肉膏5克
酵母膏5克硫酸镁0.8克水1000毫升PH值自然
2．培养基制作方法
先将马铃薯洗净去皮切成簿片，称取200克，加水1000毫升，煮沸15—20分钟，用4层纱布过滤，取其滤液并补足水至1000毫升，加入琼脂20克，再加热，琼脂溶化后，再加入其它配方中的药品。
培养基的分装，应在培养凝固前进行（琼脂培养基40℃凝固）一般用漏斗，或分装瓶，下端连接一段软橡皮管，橡皮管下面再连接一水段玻璃管，在橡皮管上安装一个止水弹簧夹，分装时将玻璃管细口插入试管内，但不要碰到管壁，每支试管装入量为度管长度1/4。
装好后塞上棉塞，每10支试管扎一捆，棉塞上用塑料纸封扎好，用线绳捆扎起来。
3．灭菌
将分装后的试管扎捆好，放入高压蒸气灭菌锅，在1公斤/厘米压力下(锅入温度达121℃)灭菌20分钟,使微生物包括芽子色全部杀死。
待压力降到0度时，慢慢放出锅内气体，趁培养基没有凝固时，将试管摆成斜面。
4．接种、培养
通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上，置28℃、3天后将温度降至24℃继续培养，12—15天左右，菌丝长满整个试管斜面，即成(生产)母种。
(二)原种、制备
母种接种到原种培养基上，进行扩大繁殖育种即为原种，原种一般采用广口瓶或袋装。
1．培养基配方
配方一木屑麸皮培养基
阔树木78% 麸皮20% 糖1% 石膏粉1% 水65% PH值自然
配方二棉籽壳木屑混合培养基
棉籽壳90% 糖1% 麸皮5% 过磷酸钙3% 石膏粉1% PH值自然
2．拌料与装袋
选用新鲜无霉变原料，根据生产所需的数量，计算配料总量，将麸皮、石膏粉均匀的混合在培养料里，糖和过磷酸钙溶于水解后，按上述干料量加入水，比例为1：1、3拌匀，培养料含水量60%为宜，含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。
堆闷30分钟后，装瓶(袋)。
用机械或人工装袋稍加压实。
(塑料袋规格通常为9*21*0、04即，而袋宽9厘米，长21厘米，单层厚4厘米)实，在袋口外套入塑料环，形成象瓶子一样，然后在袋口内塞松紧适宜棉塞、或用牛皮纸包扎好。
3．灭菌
原种灭菌方法有两种，高压灭菌和常压灭菌。
高压灭菌又称加压蒸气灭菌，灭菌
原理：在高温(120℃)、高压(1公斤/厘米2)条件下灭菌2~3小时，将芽孢在内的微生物全部杀死。
常压灭菌称流通蒸气灭菌，由于灭菌设备、条件和基本因素的不同，温度变动在90~103℃之间，其热力、穿透力不强，在一定温度下维持足够时间达到灭菌目的，通常在100℃下维持8~10小时。
4．接种与培养
不论用接种箱或接种室接种，在接种前，需对接种箱或接种室用0、2%的来苏水或漂白粉进行消毒处理，然后将灭菌过的料瓶(袋)放入接种箱内或接种室内，用紫外线灯照射30分钟后，在无菌条件下进行接种，或在接种前用烟雾剂密闭薰蒸消毒。
即烟雾剂点燃消毒时应关闭门窗。
接种室消毒，一间房需点燃3盒50克规格烟雾剂；接种箱消毒每次仅用重量为40克，但又细分为20包的其中2包点燃即可(每包2克)。
一般18×180厘米，母种试管每支可接4—6瓶(袋)原种。
将接种后的菌种瓶(袋)放入发菌室培养。
以培养室温度22~26℃，相对湿度为80%以下，光线为弱散射光，发菌期间应保持良好的通风条件。
原种从接种到菌丝长满瓶(袋)需30—40天。
(三)栽培种制备
原种进一步扩繁，即为栽培种。
栽培种一般采用塑料袋制备，规格为15×33×0、05，用无棉盖体封口。
一瓶原种可接50瓶(袋)栽培种。
栽培种培养基配方及拌料、装袋、灭菌、接种、发菌管理与原种用塑料袋制备时一致。
(四)、菌种质量鉴定
菌种质量不仅与能否成功发菌有关，也关系到产量和效益，从事木耳栽培必须严把质量关。
菌种的质量鉴定有两个方面的含义：一是分离培养的菌种是否是栽培所需种类。
二是菌种是否为优良菌株。
黑木耳菌种正常菌丝应洁白，生活力旺盛，发菌培养45天后，瓶(袋)间自上而下会出现菊花状或梅花型胶质原基，颜色明褐至黑褐色。
如果瓶(袋)底积淡黄色液体，或上半部出现黄色粘液，培养基收缩，为过期老化菌种，应予淘汰。
如果菌种菌丝仅发至瓶(袋)1/3~1/2处时出现淡黑色的胶状耳基，说明菌种早熟，或扩大次数太多，或由于培养室光线过强。
若菌丝只长一个角落而不蔓延，可能是培养基太干、过湿或干湿不均引起。
若菌丝蔓延停止不前，并有一明显抑制线，多为杂菌所致。
在发菌过程中，发现杂菌应及时检出不用。