蛹虫草培养基配方
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蛹虫草培养基配方
2.4.1斜面培养基
PDA培养基:去皮马铃薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、琼脂18g、水1000mL,pH自然。
2.4.2液体种子培养基
去皮马铃薯200g(煮汁)、葡萄糖20 g、MgSO4;1.0 g、KH2PO4;1.0 g、定容至1000mL,pH自然。
2.5实验方法
2.5.1蛹虫草固体培养
2.5.1.1固体培养基配制
固体培养基为大米培养基,即每瓶分别加入40 g大米与50mL营养液,然后于压力0.12MPa、温度121℃下灭菌20min。原营养液成分如下:葡萄糖5g/L、黄豆8g/L、奶粉5g/L、柠檬酸三铵 1.0g/L、磷酸二氢钾 1.0g/L、硫酸镁 1.0g/L、维生素B110mg/L。
2.5.1.2菌种的活化
将保存的原始菌株接种到PDA培养基上,23℃暗培养7d,得到活化的菌种。
2.5.1.3制备液体菌种
将活化的菌种块(lcm-1cm)接入液体培养基中,静止培养24h后置于摇床上进行悬浮培养(转速为110r/min),在23℃的条件下暗培养6d,得到液体菌种,将液体菌种用磁力搅拌器打碎后即可用于接种。
2.5.1.4接种
在无菌条件下,往每瓶大米培养基中接种15ml稀释了250倍的液体菌种。
2.5.1.5菌丝体培养
将接种好的培养瓶置于温度22℃、湿度55一60%条件下暗培养6d左右,直至菌丝体长满整个培养基表面和吃透整个培养基。
2.5.1.6子实体培养
将菌丝体已长好的培养瓶置于有光照的适宜环境下培养至形成原基及子实体成熟。
2.5.1.7子实体采收
待子实体成熟后,进行采收并称取每瓶子实体鲜重,然后于45℃条件下烘干至恒重,称每瓶子实体干重。