总磷的测定(钼锑抗分光光度法)

总磷的测定（钼锑抗分光光度法）

实验目的

１、了解磷（总磷、溶解性正磷酸盐和溶解性总磷）的测定方法

２、掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及计算方法

３、熟悉水样预处理的方法

４、熟悉钼锑抗分光光度法测定总磷的原理和过程

实验原理➢水中磷的测定，通常按其存在的形式不同，分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和可溶性总磷酸盐，下图为测定水中各种磷的流程图

可溶性正磷酸盐可溶性总磷酸盐总磷

水样

消解

用0.45μm 过滤

消解

１、消解的目的：将其他形式的磷转化为正磷酸盐

磷

有机磷

无机磷不溶性（呈胶体、颗粒状）可溶性

PO

3

2-

PO43-

+K2S2O8消解

HPO42-

H

2

PO

4

-

PO

4

3-

P

2

O

7

4--

P

3

O

10

5--

２．钼锑抗分光光度法的原理

PO 43-+ 钼酸盐+ 抗坏血酸H+

蓝色络合物（磷钼蓝）

实验步骤

１、预处理

（１）水样

取适量的进水和出水于50mL具塞比色管＋蒸馏水于25mL 标线＋4mLK 2S2O8加塞后管口包一小块双层纱布并用线扎紧，置于高压蒸汽消毒器中消解

（２）标准曲线

取七支50mL具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0mL，加蒸馏水至

25ml＋4mLK 2S2O8，加塞捆纱布后，同样放在高压蒸汽消毒器中消解

锅内压力达0.11Mpa或蒸汽相对温度为121℃开始计时，

30min后停止加热，待压力指针降至零后，取出放冷。

２．标准曲线的绘制

将冷却后的校准系列＋蒸馏水至50mL+1mL抗坏血酸+2mL钼酸盐充分混匀,放置15min显色后，用10mm比色皿，于700nm处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度绘制以磷含量（µg）对吸光度的校准曲线。

...

.

.

.

A

ug

721分光光度计

３、水样的测定

将冷却后的水样＋蒸馏水至50mL+1mL抗坏血酸混匀+2mL钼酸盐充分混匀，放置15min显色。用10mm比色皿，于700nm波长处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度。从校准曲线上查出含磷量。

A

A X

m

m

X

数据处理

C(PO 43-,mg/L)= m x / V

m x —由校准曲线查得的磷含量（ug ）V —水样体积（mL ）

五、注意事项

１、如试样中浊度或色度影响测量吸光度时，需做补偿校正２、室温低于13℃时，可在20～30℃水浴中，显色15min ３、操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h ，或用不含磷酸盐的洗涤剂刷洗

４、比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附的磷钼蓝显色物

六、思考题

１、过硫酸钾消解的作用？

２、用分光光度计测吸光度时，如果比色皿中有气泡对结果有什么影响？