实验一 果蝇的形态、生活周期及饲养

实验一果蝇的形态、生活周期及饲养

一、实验目的

1、了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；

2、区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；

3、掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。

二、实验原理

1、果蝇的生活史

果蝇属于昆虫纲，双翅目，果蝇属，与家蝇是不同的种。

果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适温度为20-25℃。

从表中可以看出，25℃时，从卵到成虫约10天；在25℃时成虫约活15天。

卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天后才能产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，在背面的前断伸出一对触丝，它能使卵附着在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。

幼虫：从卵孵化出来后，经过两次蜕皮，发育成三龄幼虫，此时体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头部，上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透明的唾液腺，透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧，精巢较大，外观上是一明显的黑点，而卵巢则较小，可以此作为鉴别。幼虫活动力强而贪食，它们在培养基上爬行时，留下很多条沟，沟多而且宽时，表明幼虫生长良好。

蛹：幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出，附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹.在蛹前部有两个呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，表明即将羽化了。

成虫：幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳前端爬出。刚

从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长，翅膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，故呈半透明的乳白色。透过腹部体壁，可以看到黑色的消化系统。不久，变为短粗圆形，双翅展开。体色加深。如野生型初为浅灰色，然后呈灰褐色。

2、形态构造

头部有一对复眼，三个单眼和一对触角；胸部有三对足，一对翅和一对平衡棒；腹部背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有许多体毛和刚毛。

3、成虫雌雄的鉴别

4、果蝇常见的几种突变形状特征

5、果蝇的性别决定

（1）染色体组成

果蝇为二倍体2n＝8。核内有丝分裂：不涉及细胞分裂和核分裂的染色体分裂方式。体联会：一些特殊的体细胞中（如果蝇唾腺细胞）的染色体经多次复制却不分开，依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。染色体组：来自二倍体生物的正常配子的所有染色体。连锁群：来自配子中的每条染色体及其携带的基因。雌雄基因平衡理论：对果蝇而言，X染色体上有决定雌性的基因，常染色体上有决定雄性的基因存在，其比值决定果蝇的雌或雄，Y染色体只与育性有关，而与性别无关。

（2）果蝇的性别决定

果蝇的性别决定为XY型，Y染色体在性别决定上不起作用，只与育性有关。含有Y染色体，可产生正常的配子，不含Y染色体，则配子不育。性别决定与性比值（性指数）有关。

X/A=1 则为雌性；X/A=0.5 则为雄性。

X/A＞1，为超雌；X/A＜0.5，则为超雄；0.5＜X/A＜1则为中间性。

雌雄基因平衡理论：果蝇X染色体上有很多雌性基因，常染色体上有很多雄性基因，Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因，因此性别决定于基因的平衡。

（3）果蝇的连锁群

X染色体上有141个基因；第2染色体上有228个基因；第3染色体上有156个基因；第4染色体上有12个基因。

（4）同源染色体：来源相同、结构相似、控制的形状相同，在减数分裂中配对的一对染色体。

三、材料和器材

1、实验材料：黑腹果蝇。

2、实验仪器及用具：双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、新毛笔等。

3、药品和试剂：果蝇培养基、乙醚等。

四、实验方法和步骤

1、培养基的配制

A：蔗糖6.2 g，加琼脂条0.62 g，再加水38 ml。煮沸溶解。

B：玉米粉8.25 g，加水38 ml，搅拌均匀，加热。

A、B混和加热成糊状后，冷却，50℃左右加0.5 ml丙酸，充分混匀后，再加0.7 g酵母粉，搅拌均匀后，趁热分装至指型管中，每管约2 cm厚。待培养基冷却凝固后，用棉花吸干内管壁上的水分。每个瓶子准备一白色有空瓶塞，中间的小孔用棉花塞住。

配制好的培养基进行高压灭菌，121℃，20min，待用。

2、果蝇培养

将每3-5对雌雄果蝇转入待用培养基中，进行培养，根据其生长周期，隔一定时间观察其生长情况（见生活史图）。

3、果蝇的性状观察

对果蝇进行检查时，可用乙醚麻醉，使它保持静止状态。因为果蝇对乙醚很敏感，易麻醉，麻醉的深度看实验的要求而定（作种蝇以轻度麻醉为宜，做观察

可深度麻醉，致死也无妨。果蝇翅膀外展45度角表示已死亡）。

麻醉的操作步骤如下：

1) 轻摇或轻拍培养瓶使果蝇落到培养瓶底部。

2) 右手两指取下培养瓶塞中间的棉花，迅速将麻醉瓶口于培养瓶口对接严密。

3) 左手握紧两瓶接口处，倒转使麻醉瓶在上。

4) 用黒纸或双手遮住培养瓶，使果蝇趋光自动飞入麻醉瓶中。

5) 当果蝇进入麻醉瓶后，迅速分开，将两瓶各自盖好。然后再将麻醉瓶的果蝇拍到瓶底，迅速拔开棉花塞子，在塞子上滴几滴乙醚，重新塞上麻醉瓶。

6) 观察麻醉瓶中的果蝇，约半分钟后果蝇便不再爬动，转动瓶子，果蝇在瓶壁上站不稳，麻醉就算成功了，即可倒在白色滤纸上进行观察。

7) 果蝇麻醉状态通常可维持5～10 min，如果观察中苏醒过来，可进行补救麻醉，即用一平皿，内贴一带乙醚的滤纸条，罩住果蝇形成一临时麻醉小室。

4、记录观察结果

将麻醉后的果蝇倒在白色滤纸上检查，分辨雌雄蝇，观察各种突变形状特征。观察完毕，将全部果蝇倒入酒精瓶中（死蝇盛留器），统一处理。