酵母RNA的分离与组分鉴定
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酵母RNA的分离与组分鉴定
【实验目的】 • 掌握提取RNA的原理及操作方法 • 熟悉台式离心机的使用 • 了解RNA的组分，并掌握鉴定方法
实验原理
稀碱法提取RNA：酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶
于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使 解聚的核糖核酸沉淀，由此即得到RNA的粗制品。
30分钟 → 冷却 → 离心(3000r／min)15分钟 → 将上清
液倾入10 mL酸性乙醇溶液中（注意要一边搅拌一边
缓缓倾入）→ 离心(3000r／min)3分钟 → 弃去清液。 • 用95％乙醇洗涤沉淀1次。
2、制成水解液并进行组分的鉴定
于大试管中，提取的核酸+3 mol／L硫酸溶液10mL →沸水浴中加热10分钟→过滤→取滤液。
【实验结果与讨论】
பைடு நூலகம்
核糖核酸含有核糖、碱基和磷酸各组分。加硫酸煮沸
可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。
RNA核糖的测定:苔黑酚法
DNA脱氧核糖的测定：二苯胺法
操作步骤
1. 提取 • 5 g酵母 + 30 mL 0.04 mol／L氢氧化钠溶液 → 研磨 均匀。
• 将悬浮液转移至150毫升锥形瓶中 → 沸水浴上加热
组分鉴定：
（1）嘌呤碱：水解液1 mL + 过量浓氨水，+ 约1 mL 0.1 mol／L硝酸银溶液，观察。 （2）核糖：水解液1 mL + 三氯化铁浓盐酸溶液2mL + 苔黑酚乙醇溶液0.2 mL。放沸水浴中2-10分钟， 观察。 （3）磷酸：水解液1 mL + 定磷试剂1mL → 水浴加 热，观察。
【实验目的】 • 掌握提取RNA的原理及操作方法 • 熟悉台式离心机的使用 • 了解RNA的组分，并掌握鉴定方法
实验原理
稀碱法提取RNA：酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶
于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使 解聚的核糖核酸沉淀，由此即得到RNA的粗制品。
30分钟 → 冷却 → 离心(3000r／min)15分钟 → 将上清
液倾入10 mL酸性乙醇溶液中（注意要一边搅拌一边
缓缓倾入）→ 离心(3000r／min)3分钟 → 弃去清液。 • 用95％乙醇洗涤沉淀1次。
2、制成水解液并进行组分的鉴定
于大试管中，提取的核酸+3 mol／L硫酸溶液10mL →沸水浴中加热10分钟→过滤→取滤液。
【实验结果与讨论】
பைடு நூலகம்
核糖核酸含有核糖、碱基和磷酸各组分。加硫酸煮沸
可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。
RNA核糖的测定:苔黑酚法
DNA脱氧核糖的测定：二苯胺法
操作步骤
1. 提取 • 5 g酵母 + 30 mL 0.04 mol／L氢氧化钠溶液 → 研磨 均匀。
• 将悬浮液转移至150毫升锥形瓶中 → 沸水浴上加热
组分鉴定：
（1）嘌呤碱：水解液1 mL + 过量浓氨水，+ 约1 mL 0.1 mol／L硝酸银溶液，观察。 （2）核糖：水解液1 mL + 三氯化铁浓盐酸溶液2mL + 苔黑酚乙醇溶液0.2 mL。放沸水浴中2-10分钟， 观察。 （3）磷酸：水解液1 mL + 定磷试剂1mL → 水浴加 热，观察。