AA-2G 的分离纯化工艺
蛋鸡血清载脂蛋白AⅡ的分离纯化及其抗血清的制备
７０ ． 电点 为 ５ ５ Ａ ｏ 是 由 制 Ｌ Ａ ０ｕ 等 ． ｐＡＩ ０ １ Ｃ Ｔ活 性 的功能 ．从 而 阻碍 细 对 照者 进行 了 比较 ．发 现 Ｍ２等位 两 条各 含 ７ ７个氨基 酸 的肽链 组成 ． 胞 内胆 固醇的运 出 ． 化 和转移 。 酯 亦 基因的频率在冠心病组明显高于对
维普 第 ｌ 期
一２ ４一
文 章编 号 ：０ ５ ９４ ２ ０ ）１ ０２ — ５ １０ — ４ Ｘ（０ ７ ０ — ０ ４ ０
蛋鸡 血清载脂 蛋 白 Ａ Ｉ 的分 离纯化 ｌ 及其抗血清的制备
于 ａ ｏ Ｉ （ ． — ．０￣ ） 和 因 组 ５ 非 翻 译 区 ： 内 含 子 Ⅱ长 Ｃ Ｄ 和 Ａ ｐＡ １ ０ １ ￣ ０ ５ Ｌ Ｈ ｓ的发 生率 呈显 著 负 相关
７ ａｏ １ ０ （． ～ ． ｇ ｐＢ０ ０８ １ ０ ／ 为 ：－ ２３ｐ 插入紧邻信号肽基因酶切位 １１ ０ Ｌ） ０３ ５— ９ ｂ ，
７ 氨基 酸 组成 的单 链 多肽 ． 以 目前 为止还 没有完 全 阐 明 ．除参 与 心病 患 者 进 行 了 ａｏ ７个 常 ｐＡＩ １的多 态 性
Ｄ 可 二 聚体 形式存 在 ，分子 量大 概 为 ８ 维持 Ｈ Ｌ的 结构外 ． 能还 具有 抑 研究 。 ， 并与 ２ ５名年龄 、 别 匹配 的 ５ 性
为 ８７ ｕ ６３ 。本方 法的优 点是 通过使 用 易行 的磷钨 酸镁 沉淀 法代 替 了超速 离心的复 杂过程 。不 需特殊仪 器 ， 缩短
了制备 时 间且 分 离效果 理 想，
关 键词 ： 密度 脂蛋 白 ； 高 载脂蛋 白 ＡＩ； Ｉ磷钨 酸镁 沉 淀法 ； 析 ； 层 电泳
载 脂 蛋 白 Ａ Ｉ ａｏｉｏ ｒｔｉＡ 分 子 量 为 １ ｋ 。 人 ａ ｏ Ⅱ 的 三酯脂 肪酶 的激 活 同时 还有 助于 ｐ ｌ ｐ ｅｎ １（ ｐ ｏ ７ ｕ ｐＡ Ｉ ａｏ １，ｐ ＡＩ １）的研 究 程度 不 如 ａ ｏ ｃ Ｎ ｐ Ａ Ｄ Ａ序 列 已经 确 定 人 ａｏ Ｈ Ｌ受 体 的识 别 和 Ｌ Ｌ受 体 的调 ｐＡ Ｉ １ Ｄ Ｄ
双氨基聚乙二醇的制备及分离纯化
收稿日期：２００６—０７－３ｌ 基金项目：国家自然科学基金（３０６７２５４５）和上海市纳米科技专项基 金（０６５２ｎｍＯｌｌ） 作者简介：刘敏（１９６９），女，硕士，讲师，从事高分子药物载体 和脂质体给药系统研究。 Ｅ—ｍａｉｌ： ｌｉｕｒｎｉｎ＠ｓｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ 通讯联系人：陆伟跃（１９６０），男，教授，博士生导师，从事药物靶 向传释系统研究。 Ｔ色ｌ：０２１．５４２３７０４０：Ｆａｘ：０２１—６４１７８７９０ Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｙｌｕ＠ｓｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
１６００ １２００ ８００ ４００
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１０
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３０
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１—１
图２ １纯品的色谱图
等强度；１１ １４ｃｍ。１处出现强的尖吸收带为ｕ。．。．。特征 峰。
图３ ＰＥＧ ２０００（Ａ）和１（Ｂ）的红外图谱
１ＨＮＭＲ：溶剂为重水，样品浓度为１ Ｏｍｇ／ｍ１， 结果见图４。１纯品，一ＮＨ２：６２．９（２Ｈ，三重峰），
聚乙二醇修饰干扰素_2b的分离纯化和制备
中 国 药 科 大 学 学 报Jo ur nal of China Pharm aceutical University 2001,32(3):310～312聚乙二醇修饰干扰素 2b的分离纯化和制备林碧蓉,姚文兵*,沈子龙,吴梧桐(中国药科大学生物制药学院,南京210009)摘 要 目的 建立聚乙二醇修饰干扰素 2b的分离纯化方法。
方法 运用Superdex75Hig hlo ad制备型凝胶色谱柱,以含0.15mo l/L N aCl的0.01mo l/L磷酸盐缓冲液进行洗脱,流速为1.5ml/min,检测波长为215 nm。
结果 各洗脱组分经SDS-P A GE检测呈单一条带。
聚乙二醇修饰干扰素 2b的蛋白回收率为36.5%,抗病毒活性回收率为4.3%,比活度为4.74×107IU/mg,是原形干扰素 2b的10.4%。
结论 这种方法可以用于制备聚乙二醇修饰干扰素 2b。
关键词 干扰素 2b;聚乙二醇修饰干扰素 2b;分离纯化中图分类号:Q503 文献标识码:A 文章编号:1000-5048(2001)04-0310-19 干扰素是人或动物细胞在病毒或其他抗原诱导下产生的一类糖蛋白。
目前,临床上应用最为广泛的是干扰素 2b,主要用于治疗慢性肝炎和毛细胞性白血病等病毒性疾病和肿瘤[1]。
但是,人重组干扰素 2b不具有天然干扰素的糖基化结构,生物半衰期短,产生中和抗体高,大大限制了其临床应用。
聚乙二醇修饰技术能够增强蛋白质类药物的稳定性,提高生物利用度,降低免疫原性。
目前,应用这项技术进行修饰的蛋白质类药物有天冬酰胺酶,超氧化物歧化酶,白介素-2等[2]。
本文利用制备型高效液相色谱技术,对单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯( -methoxy-po lyethy lene gly col- -N-succinim idyl carbonate,SC-mPEG)修饰干扰素 2b反应液进行分离、纯化,获得聚乙二醇修饰干扰素 2b。
丹参酮ⅡA分离纯化工艺的研究
丹参酮ⅡA分离纯化工艺的研究
刘春晓
【期刊名称】《中国民族民间医药》
【年(卷),期】2012(021)016
【摘要】丹参为唇形科鼠尾草属植物,具有广泛和较高价值的药理活性.丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA,有抗菌、消炎、治癌等作用,对心血管疾病的治疗效果尤其显著.本文主要研究了丹参酮ⅡA的分离纯化工艺,采用硅胶柱分离,选用石油醚(60-90℃)一乙酸乙酯作为洗脱剂系统,通过薄层色谱定性分析,选择不同梯度.通过高效液相跟踪检测,丹参酮ⅡA纯度可达93.89％,且重现性良好,准确度和精密度较高,适合工业化生产.
【总页数】2页(P52-53)
【作者】刘春晓
【作者单位】天津市安定医院,天津300222
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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发酵法生产α-熊果苷及其分离纯化的开题报告
发酵法生产α-熊果苷及其分离纯化的开题报告1. 研究背景α-熊果苷是从熊果树的根、茎、叶等部位提取出来的一种天然二苷类化合物，具有多种药理活性，如降血脂、抗氧化、抗炎等作用。
由于其良好的药理作用，因此引起了人们的广泛关注。
目前，α-熊果苷的生产方法主要有体外合成、萃取提取和发酵法。
其中，发酵法是一种更加经济有效的生产方法，已得到了广泛的应用。
2. 研究目的本研究旨在建立一种高效的发酵法生产α-熊果苷的方法，并对其进行分离和纯化。
3. 研究内容本研究包括以下内容：（1）建立适合α-熊果苷生产的菌种筛选方法，选取高效产生α-熊果苷的菌株。
（2）针对选定的菌株，优化其培养条件，如培养基成分、温度、pH值等。
通过研究生物量和α-熊果苷产量的变化，确定最佳发酵条件。
（3）利用色谱等技术对α-熊果苷进行分离和纯化，得到高纯度的α-熊果苷。
4. 研究方法（1）菌种筛选：选取具有高效产生α-熊果苷能力的菌株，通过对多种菌株的培养和分析研究，筛选出最佳菌株。
（2）发酵条件的优化：通过对菌株的培养条件进行优化，确定最佳发酵条件，包括选用合适的培养基、温度、气氛、pH值等。
（3）分离和纯化α-熊果苷：利用柱层析、高效液相色谱等技术，对发酵液中的α-熊果苷进行分离和纯化，获得高纯度的α-熊果苷。
5. 预期结果本研究预计将得到以下结果：（1）选取出最佳的α-熊果苷生产菌株，并确定其最佳发酵条件。
（2）通过分离和纯化技术，得到高纯度的α-熊果苷。
（3）建立一种高效稳定的发酵法生产α-熊果苷的方法。
6. 研究意义本研究将建立一种高效稳定的发酵法生产α-熊果苷的方法，有助于逐步实现α-熊果苷的规模化生产，提高其利用价值。
此外，本研究对于发掘熊果树的药理活性成分、深入研究其药理作用等具有重要的现实意义和应用价值。
化学拆分α-联苯二酸的工艺流程
化学拆分α-联苯二酸的工艺流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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融合蛋白_GLP_1_A2G_2_HSA的分离纯化及其活性评价
药 物 生 物 技 术Pharm aceutical Biotechno logy 2010,17(6):487~492融合蛋白(GLP-1A2G)2-H SA的分离纯化及其活性评价*李现丽1,窦文芳1,张晓梅1,许泓瑜1,邱丽颖1,金坚1,许正宏1,2*(1 江南大学医药学院制药工程研究室,江苏无锡 214122;2 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122)摘 要 建立简便、快速、高效的重组人血清白蛋白与胰高血糖素样肽-1(GL P-1)突变串联体融合蛋白(GL P-1A2G)2-H SA(G GH)的分离纯化方法。
重组毕赤酵母菌株发酵产生的融合蛋白GG H的上清液通过超滤、染料配体亲和层析、凝胶过滤层析、离子交换层析获得高纯度的样品,终回收率为33 1%,12%SDS-P AG E和HP LC检测纯度达到98%。
体内活性测定结果表明,融合蛋白GGH在小鼠皮下给药8h后仍能发挥显著的降血糖作用。
结果表明建立的分离纯化方法较好的保留了融合蛋白(GL P-1A2G)2-H SA的生物活性。
关键词 胰高血糖素样肽-1;融合蛋白;纯化;活性测定中图分类号 Q51 文献标志码 A 文章编号 1005-8915(2010)06-0487-06胰高血糖素样肽-1(Glucag on-like peptide-1, GLP-1)由肠道L细胞合成和分泌的一个30个氨基酸的多肽,是生理浓度下作用最强的肠促胰岛素,不仅能刺激胰 细胞增殖和胰岛再生,而且能够抑制胰 细胞凋亡和促进胰岛素合成,显著降低血糖水平[1-3],因此,GLP-1已经成为糖尿病治疗药物研究的一个热点。
但是,机体本身产生的活性GLP-1极易被二肽酰肽酶 (Dipeptidyl peptidase ,DPP- )降解而失活,同时很容易从肾脏排出,故其生物半衰期仅2~6min,在很大程度上限制了其临床应用[4-5]。
为了提高GLP-1的生物活性,实现其在体内的长效作用,利用白蛋白融合技术[6]和基因工程的手段,将GLP-1突变体GLP-1A2G串联后和人血清白蛋白(H SA)进行融合,成功构建了重组Pichia p astoris GS115/pPIC9K/(GLP-1A2G)2-H SA菌株,成功表达胞外分泌融合蛋白GGH,初步药代动力学显示小鼠体内吸收半衰期为26 6h,体内消除半衰期约为57 8h[7],即保留了GLP-1的生物活性,又延长其半衰期。
生物转化液中分离纯化2'-脱氧腺苷的方法[发明专利]
![生物转化液中分离纯化2'-脱氧腺苷的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/6cb27d6d6529647d262852a5.png)
专利名称：生物转化液中分离纯化2＇-脱氧腺苷的方法专利类型：发明专利
发明人：王洪钟,张荣庆,谢丽萍,张文权
申请号：CN201010263106.2
申请日：20100825
公开号：CN101962397A
公开日：
20110202
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种从生物转化液中分离纯化2′-脱氧腺苷的方法。
该方法，是将制得的生物转化液离心除去菌体，得到上清液，上清液经过离子交换树脂柱吸附，吸附完毕后，先用NaCO水溶液洗脱，再用有机溶剂的混合液洗脱，用乙醇结晶后得到2′-脱氧腺苷。
该方法将生物转化液中的2′-脱氧腺苷与其它杂质分离和提取出来，产品纯度达99％以上；而且提高了分离和提取速度，降低了成本、减少环境污染，具有重要的应用价值。
申请人：清华大学
地址：100084 北京市海淀区清华园1号清华大学
国籍：CN
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代理人：关畅
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L-抗坏血酸-2-葡萄苷（简称AA-2G）的分离纯化工艺如下：
公司生产AA-2G采用生物酶转化方法，所用原辅料为VC及β环糊精或淀粉、酶。
当生物转化结束后的反应液中除了含有产物AA-2G外, 还含有反应剩余的L-抗坏血酸和寡聚糖类。
分离纯化方法主要有离子交换树脂法和电渗析法两种。
若反应产物中含A-寡聚糖基-L-抗坏血酸, 可先用葡糖淀粉酶水解成AA-2G 和D-寡聚糖, 再用以下方法纯化。
离子交换树脂法
主要过程如下：
吸附AA-2G 和VC 的阴离子交换树脂可以是凝胶体、大网络树脂( MR-型) 或大孔结构中的任一种作为母体, 强性基团或弱性基团的苯乙烯或丙烯酸的阴离子交换树脂都可以作为基本材料。
具有吸附阴离子能力的任一种强、中、弱碱都可以使用。
如今已经商业化生产的阴离子吸附剂有美国宾夕法尼亚州的Rohm & Haas 公司生产AMBERLITE 类和日本东京三菱化学工业有限公司生产的DIAION类产品。
其中AMBERLITE IRA411S, DIAIONWA30, AMBERLIT E IRA478RF 和AMBERLITEIRA910CT 使用最佳, 因为它们具有相当高的吸附和分离AA-2G 的能力。
阴离子交换树脂的形式可以是OH-、Cl- 、CH3COO- 型。
洗提和富集AA-2G 和VC 的洗提液（应该是0.1%-0.3%的盐酸）可以是: 盐酸、硫酸、硝酸、柠檬酸、氯化钠溶液、氯化钾溶液、硫酸钠溶液、硝酸钠溶液、柠檬酸钠溶液、柠檬酸钾溶液等。
其中盐酸溶液价廉, 而且柱
子再生方便, 浓度应小于0. 5molPL, 最好为0. 2 ~ 0. 3molPL, 否则,AA-2G 和VC 因都很容易被洗脱而同时流出, 不易分离。
洗脱液浓度不一定要恒定, 可逐步改变其浓度, 以梯度形式洗脱。
已去矿物质的溶液装柱( 阴离子交换树脂) 流速为SV( space velocity) 小于或等于5cmPmin, 最好为1~ 3 cmPmin。
洗提液流速为SV 小于或等于1 cmPmin, 最好为0. 3~ 0. 7 cmPmin。
通过改变阴离子交换树脂的类型, 特别是其母体结构或功能基团, 可以改变AA-2G 和VC 洗脱时流出的次序。
柱温最好在15 e ~ 25 e 之间。
以上离子交换树脂法是从国外文选上查阅的资料得知，
2012年，在中试物料液六月份生产出来，通过四种树脂的验证，证明这种方法可行性不大，吸附量低，而且离子层析效果不好。
可以认为文献只是一种想法，不是一种工艺。
带着固体样品回来后，采用涂层复合吸附剂进行有效分离，可靠性和经济性都远高于离子层析.。