志贺氏菌属的生物危害评估报告

志贺氏菌属的生物危害评估报告

一、细菌的传播与致病

志贺菌属是主要的肠道病原菌之一，也是引起人类细菌性痢疾的病原体。本属细菌分布于全世界,是炎症性痢疾的典型病原菌,很多地区5%~10%的腹泻性疾病是由该菌属所致。弗氏志贺菌和宋内志贺菌比鲍氏志贺菌和毒力特别强的痢疾志贺菌分布更广。美国犹他州所有临床实验室工作者志贺菌病的年发病率为0.7/1 000，而临床微生物学工作者的年发病率为5.4/1 000。在英国临床实验室，沙门菌病和志贺菌病的年发病率分别为0.137/1 000和0.322/1 000，大多数感染者为微生物学工作者。

感染者和恢复期带菌者的排泄物是传染源,经粪-口途径直接传播,经污染的食物或物体可间接传播。苍蝇可作为机械性媒介,水源性传播不常见。卫生条件差的拥挤人群中最易发生流行,流行区的幼儿志贺菌病特别常见,而成人得病较轻。

恢复期和亚临床带菌者是重要传染源,但真正的长期带菌者罕见。感染很少或不诱导产生免疫性,因此同一菌种的再感染是可能的。

志贺菌可穿入低位肠段的粘膜,引起粘液分泌,充血,白细胞浸润,水肿,并常有表浅粘膜溃疡。志贺菌感染相关的水泻由内毒素介导所致,因这种内毒素可引起肠道分泌增多。

由志贺菌感染所导致的症状包括：（1）急性细菌性痢疾经潜伏期1~4日,幼儿的起病突然,表现为发热,烦躁不安,嗜睡,厌食,恶心或呕

吐,腹泻,腹痛和腹胀以及里急后重。3日内大便中出现血液,脓液和粘液.大便次数可增加到≥20次/d,体重下降和失水严重。若不治疗,患儿可在12日内死亡；若患儿存活,则在第2周急性症状消退.成人可表现为无发热的非血性,非粘液性腹泻,很少有或完全没有里急后重.但其最初的症状可为发作性腹绞痛,急于排便,起初排出成形大便并在排便后可缓解腹

痛.以后反复发作,并且日趋严重和频繁.腹泻变得明显,系软便或

含有粘液,脓及常

有血液的水泻。严重的里急后重可造成直肠脱垂和大便失禁。成人患病常可自愈：轻者4~8日,重者3~6周。伴有循环虚脱的明显脱水和电解质丧失及死亡主要发生于＜2岁的婴儿和衰弱的成人；（2）慢性细菌性痢疾主要是因急性菌痢治疗不彻底，造成反复发作迁延不愈，病程超过两个月以上者；若是有病史、无症状，结肠镜检或粪便培养阳性者称为隐匿型菌痢，在流行病学上亦具有重要的意义；（3）携带者是指恢复期带菌、慢性带菌者和健康带菌者三种类型，尤其是健康带菌者是主要的传染源。

除此以外，还可发生继发性细菌感染,特别是衰弱和脱水的病人。严重的粘膜溃疡可引起明显的急性失血.其他并发症虽不多见,但可有中毒性神经炎,关节炎,心肌炎和罕见的肠穿孔。小儿志贺菌病可并发溶血性尿毒症综合征。本病不会变成慢性,也不会成为溃疡性结肠炎的病因学因素。但有HLA-B27基因型的病人在志贺菌病后常常比较容易发生关节炎或明显的Reiter综合征。

二、细菌的生物学特性

志贺菌（Shigella）隶属于肠杆菌科，分为A,B,C,D4个亚群——A群痢疾志贺菌、B群福氏志贺菌、C群鲍特志贺菌和D群宋内志贺菌，而各亚群又可分各种血清决定型。它们均为革兰氏阴性杆菌，菌体短小、无芽胞无鞭毛，有菌毛，在胞质中存在着大小两种质粒，与该菌的侵袭性和耐药性有关。

志贺菌为兼性厌氧菌，对理化因素的抵抗力较弱，对酸敏感，在1%的石炭酸中15~30min可被杀死，因此运输时必须采用含有缓冲剂的培养基。它们最适的生长温度为37℃，pH为7.2~7.4，对营养的要求不高，可在普通培养基上生长。在肠道培

养基上可形成不发酵乳糖的无色半透明菌落，而宋内志贺菌还常形成粗糙型的菌落，也因此可发生S-R变异。

志贺菌属没有H抗原，但有O抗原以及部分菌种的K抗原。O 抗原可耐热，100℃60min不被破坏，它是分类的依据，具有群特异性以及型特异性两种抗原。正是依据O抗原的不同以及生化反应的结果将志贺菌分成了4个血清群和32个血清型；而K抗原存在于A 群和C群的全部菌型以及B群种的部分菌种中，不耐热，对分类无意义，但它的存在将阻断O抗原与相应抗血清的凝集作用，故可先以100℃60min破坏之。

志贺菌的致病因素主要有：

1.菌毛的侵袭作用；

2.内毒素：各群志贺菌都能形成强烈的内毒素，其作用机制包括：破坏肠粘膜上皮,造成粘膜下层炎症,并有毛细血管血栓形成,以致坏死,脱落,形成溃疡,出现粘液脓血便；使肠壁通透性增高,促进毒素吸收,引起一系列毒血症的症状,如发热,神志障碍,甚至中毒性休克；作用于肠壁植物神经,使肠蠕动失调并痉挛,尤以直肠括约肌受累明显,因而发生腹痛,腹泻,里急后重等症状；

3.外毒素：A群志贺菌Ⅰ型和Ⅱ型能产生志贺外毒素(ST), ST能引起Vero细胞病变,故也称Vero毒素(VT)。ST的组成是由1个A 及5个B亚单位组成.B亚单位是毒素与靶细胞表面糖脂受体结合的单位; A亚单位链为毒性部分能抑制蛋白质的合成。ST具有细胞毒素,肠毒素和神经毒素3种生物学活性：肠毒素性，此毒素有类似E.coli 和霍乱肠毒素的作用能引起腹泻与呕吐；细胞毒性，它可以阻止小肠上皮细胞对糖和氨基酸的吸收；神经毒性，在痢疾志贺菌引起的重症感染者可作用于中枢神经系统,造成昏迷或脑膜炎；ST在体外还可加重对血管内皮细胞的损伤。

ST和内毒素的持续存在的联合作用可能与志贺菌感染的溶血性尿毒综合征等并发症有关。

二、细菌的实验室检查及其它检查

主要根据暴露史、临床特征与实验室检查诊断。急性期有发热、腹痛、腹泻、里急后重及黏液脓血便，左下腹明显压痛。粪便镜检有多数白细胞或脓细胞及红细胞即可诊断。确诊则依赖于粪便培养出痢疾杆菌。

1.血常规急性期白细胞总数轻至中度增高，多在（10~20）×109/L，中性粒细胞亦增高。

2.直肠镜检查可见粘膜表面弥漫性充血并有大量小溃疡。可用拭子从溃疡处取材作涂片检查或培养。这些拭子及大便标本均应立即镜检及培养，标本接种于肠道杆菌选择培养基或鉴别培养基上,常用S-S 培养基.37℃培养18-24h,取可疑菌落进行生化反应和血清鉴定,以确定菌群和菌型；如不能立即培养,可放于30%甘油缓冲盐水保存液中。

3.粪便检查外观多为黏液脓血便，无粪质。镜检有大量脓细胞或白细胞及红细胞，如有巨噬细胞有助于诊断。粪便培养病原学检查有利于确诊，同时可做药物敏感试验以指导临床合理选用抗菌药物治疗。粪便免疫学检查与细菌培养比较具有早期快速诊断的优点，但由于粪便中抗原成分复杂，易出现假阳性，故目前临床上尚未广泛应用。

4.湿片或经甲基蓝或赖特染色的涂片可见大片白细胞,这点可鉴别细菌性和阿米巴痢疾(因阿米巴可破坏白细胞)。

5.毒力试验Senery毒力试验：将受试菌37℃18-24h 制备菌液(109/ml) 接种豚鼠结膜：发生炎症,则Senery试验阳性,说明受试菌有毒力

6.免疫染色法将粪便与志贺菌抗血清混匀,在显微镜观察有无凝集现象。

7.免疫荧光菌球检查法在含有荧光素标记的志贺菌属免疫血清的液体培养基中接种标本,培育4-8h后发现带有荧光的菌球为阳性。