专题1_基因工程复习PPT幻灯片
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同一种
一个切口
两个黏性末端
表
DNA连接酶 达
因 表
目的基因 限制酶切割
两个切口
载 体
达
目的基因
载 体
2.基因表达载体的组成
的
目的基因
构 建
启动子
它们有什么作用?
终止子
标记基因
(复制原点)
练习
2、下列关于基因表达载体的叙述不正确的是 A
A.启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位,是起 始密码
B.启动子和终止子都是特殊结构的DNA短片段,对 mRNA的转录起调控作用
C.标记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因 从而便于筛选
D.基因表达载体的构建视受体细胞及导入方式不同 而有所差别
(三)将目的基因导入受体细胞
1.转化 —目—的基因进入_受__体__细__胞__内,并且在 受体细胞内维持_稳__定__和_表__达__的过程
将目的基因导入 植物细胞
农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法
答案:C
练习
2. (双选)有关基因工程的叙述中,错误的是 A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状,
培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 答案:BD
练习
3.下列四条DNA分子,彼此间具有黏性末端的一组是
A.①② B.②③ C.③④ D.②④ 答案:D
练习
1、有关基因工程的叙述正确的是 ( D )
A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
2.下列叙述符合基因工程概念的是 B
A、B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B 淋巴细胞中的抗体基因 B、将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌, 获得能产生人干扰素的菌株 C、用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛 选获得青霉素高产菌株 D、自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA 整合到细菌DNA上
2.方法
将目的基因导入 动物细胞
——显微注射法
将目的基因导入 微生物细胞
——氯化钙法
(四)目的基因的检测与鉴定
双链DNA (即目的基因)
DNA探针—DNA杂交 分
转录
子
水
目的基因的mRNA DNA探针—mRNA杂交 平
翻译
检
测
蛋白质的氨基酸序列 抗原—抗体杂交
参与代谢
表现出特定性状
个体生物学水平鉴定
真核细胞的基因结构
非编码区
编码区
非编码区
启动子
终止子
外显子 内含子
非思编考码:序编列码:包相括同非数编目码氨区基和酸内的含蛋子白质, 原核生物与真核生物基因结构一样长吗?
(一)目的基因的获取
1、从基因文库中获取(鸟枪法) 2、利用PCR技术获取和扩增目的基因
3、人工合成
( 1.过程 二 ) 质粒 基
1、20世纪中叶,基础理论取得了重大突破
DNA是遗传物质的证明
•
DNA双螺旋结构和中心法则的确立
•
遗传密码的破译
2、技术发明使基因工程的实施成为可能
基因转移载体的发现
•
工具酶的发现
•
DNA合成和测序技术的发明
•
DNA体外重组的实现
•
重组DNA表达实验的成功
•
第一例转基因动物问世
•
PCR技术的发明
练习
“
分 子
2)在受体细胞内对目的基因进行大量复制 运
2、作为载体的必要条件:
输
• 能自我复制 • 有切割位点
车 ”
——
• 有遗传标记基因
• 对受体细胞无害、容易分离等
载
3、载体的种类:
体
1)细菌质粒
2)λ噬菌体的衍生物
3)动植物病毒
练习
1、关于限制酶的说法中,正确的是( ) A.限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列 B.EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C.限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA D.限制酶只存在于原核生物中
缝 2、作用原理: 催化磷酸二酯键形成
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
合 针
3、作用结果: 获得重组DNA分子
” 4、用途:
1)构建基因表达载体(基因工程)
2)基因修复(微生物细胞)
——DNA
5、种类:
连
1)E.coli DNA连接酶 黏性末端
接 酶
2)T4 DNA连接酶 黏性末端和平末端
DNA聚合酶与DNA连接酶
1、载体的用途: 1)运载工具
聚合酶”或“DNA连接酶”)。
(3)找出能连接的对应片段并写出连接后形成的DNA分
子:
…CTGCAG…
…GACGTC…
(一)目的基因的获取 目的基因主要是指___编__码__蛋__白__质__的__结__构__基__因_
原核细胞的基因结构
非编码区
编码区
非编码区
启动子 与RNA聚合酶结合位点
终止子
(CpTI基因)。科学家将其转移到水稻体 内后,却发现效果不理想,主要原因是CpTI 蛋白质的积累量不足。经过在体外对 CpTI基 因进行了修饰后,CpTI蛋白质在水稻中的积 累量就得到了提高。修饰和表达过程如图所示:
请根据以上材料,回答下列问题:
(1)CpTI基因是该基因工程中的 目的 基因,“信号肽”序列及
4.以下是几种不同限制性核酸内切酶切割DNA分子后形 成的部分片段。完成下列问题:
①…CTGCA
②…G
③ …TG
…G ④ …G
…CTTAA ⑤ …GC
…AC
…CTGCA
…CG
(1)以上DNA片段是由 4 种限制性核酸内切酶切割后
产生的。
DNA连
(2)若要把相应片段连接起来,应选用 接酶 (填“DNA
1. 科学家们经过多年努力,创立了新兴生 物技术——基因工程,实施该工程的最终 目的是 D A.定向提取生物体的DNA分子 B.定向地对DNA分子进行人工“剪切” C.在生物体外对DNA分子进行改造 D.定向地改造生物的遗传性状
基本工具 练练
限制性核酸内切酶 DNA连接酶 运载体
目的基因的获取
基因工程
3.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过
程中,下列操作错误的是 A
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组DNA分子导入烟草原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
豇豆对多种害虫具有抗虫能力,根本原因
是豇豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因
操作程序 练练
基因表达载体的构建 目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定
转基因植物 生产应用 转基因动物
练练 工程菌 基因治疗和基因诊断
蛋白质工程
“
——
分 子 手 术 刀 ” 限 制 性 核 酸 内 切 酶
“
——
分 子 手 术 刀 ” 限 制 性 核 酸 内 切 酶
“
分 子
1、DNA连接酶的作用: 连接DNA片段