丹参水溶性成分与脂溶性成分抑菌作用的考察

丹参水溶性成分与脂溶性成分抑菌作用

的考察

（作者： _________ 单位：___________ 邮编： ___________ ）

作者：周静李惠芬王洪志骆达杜凡王宇歆吴咸中【摘要】目的考察丹参中水溶性成分与脂溶性成分的含量及其

抑菌作用。方法采用HPLC法测定丹参素、原儿茶醛和丹参酮H A含量；以平板二倍稀释法统计最小抑菌浓度（MIC），探讨其体外抑菌作用。结果丹参水溶性成分和脂溶性成分均对金黄色葡萄球菌标准株、临床株；大肠埃希菌标准株；铜绿杆菌标准株；大肠杆菌临床株1、临床株2有抑菌作用，两种抑菌药液均对金黄色葡萄球菌标准株、临床株作用最强，对大肠埃希菌标准株作用相对较弱；水溶性成分的抑

菌作用强于脂溶性成分。结论丹参水溶性成分与脂溶性成分均具有一定的抑菌活性，提示该作用可进一步开发利用。

【关键词】丹参丹参素原儿茶醛丹参酮H A抑菌

Abstract:ObjectiveTo inv estigate the content of liposoluble and hydrosoluble con stitue nts in Salvia miltiorrhiza Bge. and its antibacterial effect . MethodsThe

contents of dan she nsu,protocateehualdehyde and salviol H A were determined by HPLC and the antimicrobial effect was obseved accord ing to MIC by the method of plate

doubling-dilution . ResultsThe liposoluble and hydrosoluble constituents of Salvia miltiorrhiza Bge. had some inhibition on all bacterial species in our experiments, especially the strongest on Staphylococcus aureus , the weakest on Bacillus coli; moreover, the hydrosoluble constituent had stronger effect tha n the liposoluble on e.C on clusi on The an tibacterial active comp onents of Salvia miltiorrhiza Bge. n eed to make better use.

Key words : Salvia miltiorrhiza Bge.; Dan she nsu; Protocateehualdehyde; Salviol II A; Antibacterial effect

丹参Salvia miltiorrhiza Bge. 属唇形科植物，其药用部

位为干燥根及根茎，味苦，性微寒［1］,归心、肝经，具有祛淤止痛、

活血通经、清心除烦等功效［2］,临床广泛用于活血化瘀、宁心安神、

抗菌消炎和心脑血管疾患等症，是国内外现代化中药研究的热点品种之一］3］。丹参的化学成分主要为水溶性成分和脂溶性成分两部分。本文比较了多种提取方法，建立了从同一样品中分步先后提取脂溶性与水溶性成分，并应用高效液相色谱法优化筛选了色谱条件，使之在同一梯度条件下完成丹参中3种活性成分丹参素、原儿茶醛和丹参酮I A 的定量分析。丹参有关心血管方面的药理研究已相当深入，但其

抑菌方面的研究报道较少，多为水煎液或对照品丹参酮H A的抑菌报道，未见丹参的抑菌有效部位及其成分的抑菌研究。本实验先于定量之后，准确把握抑菌浓度再行相关抑菌研究，以期为临床应用其抗菌消炎作用提供科学依据。

1仪器与材料

美国SSI高效液相色谱仪，分析之星色谱工作站，乙腈为色谱纯、水为双蒸水、磷酸为分析纯。丹参素钠对照品，原儿茶醛对照品，丹参酮H A对照品（中国药品生物制品检定所）。丹参药材购自天津中药饮片厂（经天津中医药大学第一附属医院尚英和药师鉴定）。

金黄色葡萄球菌标准株，临床株；大肠埃希菌标准株；铜绿杆菌标准株；大肠杆菌临床株1,临床株2（均由天津医科大学微生物教研室提供）。

2方法和结果

2.1水溶性成分丹参素、原儿茶醛和脂溶性成分丹参酮H A的测疋

2.1.1 色谱条件色谱柱（250 mn¥ 4.6 mr，5卩m）,流动相A:0.4% 磷酸水溶液，流动相B：乙腈，流速为1.0 ml/min，检测波长为275 nm 柱温40C ,梯度洗脱：0〜10 min，4%B 10〜16 min，10%B 16〜20 min,15%B 20〜30 min,20%B 30〜50 min,70%B; 50〜58 min,100%B

2.1.2对照品溶液的制备精密称取一定量原儿茶醛、丹参素钠对照

品，各置10 ml棕色容量瓶中，加70%甲醇定容，均配成1 mg/ml 溶液，后者相当于丹参素0.875 mg/ml，另称一定量丹参酮H A对照品，以甲醇溶解按上述方法配成0.232 2 mg/ml的溶液；分别吸取丹参素钠、原儿茶醛和丹参酮H A标准溶液各400, 25, 60卩l于1 ml 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得0.4 mg/ml丹参素钠、0.025 mg/ml 原儿茶醛和0.013 93 mg/ml丹参酮H A的混合对照品溶液(10 C以下保存)。

2.1.3供试品溶液的制备取丹参药材置烘箱中50C干燥，粉碎过60目筛。精密称取干燥粉末4 g，加95%乙醇100 ml于圆底烧瓶中,以索氏提取器提取1 h，控制温度75C，收集提取液于100 ml容量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，得脂溶性部位提取液。再加蒸馏水150 ml于圆底烧瓶中，在索氏提取器中继续提取16 h，注意控制温度保持微沸状态，浓缩提取液转至100 ml容量瓶中，加水稀释至

刻度，摇匀即得水溶性部位提取液，备用。各取以上提取液0.5 ml，混匀作为供试品溶液。

2.1.4标准曲线的制备精密吸取“ 2.1.2 ”项下混合对照品溶液3，4，6, 8，12，14卩l进样测定，以峰面积为纵坐标，质量为横坐标绘制标准曲线，计算丹参素、原儿茶醛、丹参酮H A三者的回归方程分别为Y=334 759X-55 813 (r=0.999 4 ) ; Y=4E+06X-49 201

(r=0.999 6); Y=5E+06X+1304.9 (r=0.999 4);知三者分别在 1.2 〜5.6卩g，0.075〜0.35卩g，0.042〜0.20卩g范围内与峰面积线性关系