蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验
生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定课件
D．由亮变暗，观察到的细胞多
8、将某种玉米子粒浸种发芽后研磨匀浆、过滤，得到提取液。取6支试管分别加入等量的淀 粉溶液后，分为3组并分别调整到不同温度，如图所示，然后在每支试管中加入等量的玉米 子粒提取液，保持各组温度30分钟后，继续进行实验（提取液中还原性物质忽略不）： （1）若向A、C、E三支试管中分别加入适量的班氏试剂或斐林试剂，沸水浴一段时间，观 察该三支试管，其中液体颜色呈砖红色的试管是___A__和_C_；砖红色较深的试管是____C__，颜 色较深的原因是___淀粉酶在40℃时活性相对较高，淀粉酶催化淀粉水解产生的还原_糖__多；不 变色的试管是___E_，不变色的原因是___酶__失__活__。 （2）若向B、D、F三支试管中分别加入等量的碘液，观察三支试管，发现液体的颜色是蓝 色，产生该颜色的原因是__剩__余__的__淀__粉_遇__碘_。变蓝 （3）以上实验的三种处理温度不一定是玉米子粒提取液促使淀粉分解的最适温度。你怎样 设计实验才能确定最适温度？（只要求写出设计思路）
A、产生气泡 B、溶液呈蓝色 C、溶液呈紫色 D、产生砖红色沉淀 2、用斐林试剂可以鉴定还原糖的存在，用双缩脲试剂可以鉴定蛋白质的 存在，在医学上，还常用上述两种试剂进行疾病的诊断。能够诊断的 疾病是（D ） A、糖尿病、肠炎 B、糖尿病、胃炎 C、肾炎、胃炎 D、糖尿病、肾炎 3、鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品,不需要用的化学试剂是( D )
A 斐林试剂 B苏丹IV染液 C 双缩脲试剂 D红墨水
4、在还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，最佳的一组实验材料是（ D）
①甘蔗的茎 ②油菜籽 ③花生种子 ④梨 ⑤甜菜的块根 ⑥豆浆 ⑦鸡蛋清
A、 ④ ② ⑥ B 、⑤ ③ ⑦
C、 ① ② ⑥ D、 ④ ③ ⑥
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验答案doc
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质学习目标：初步掌握鉴定生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的基本方法，尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。
重点、难点：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质知识链接：了解同种生物组织中有机物含量的差异和不同生物组织间有机物含量的差异，为本章第一节及第四节的学习打下基础。
学习过程实验原理：1、某些化学试剂能使生物组织中的有机化合物产生特定的_____________________________________2、糖类中的还原糖，如：________________与_________________发生作用，生成________________3、脂肪可以被_____________________染成橘黄色，或被__________________ 染成红色4、蛋白质与__________________发生作用，产生_______________反应5、淀粉遇_____________蓝色实验过程：一、还原糖的检测和观察1、制备生物组织样液（1）_________________（洗净、去皮、切块）取5克放入研钵中。
（2）____________________________（加少许Si02和5ml水）（3）_____________（将漏斗插入试管，漏斗上垫一层纱布）（4）_____________（组织样液备用）2、还原糖的检测和观察（1）试管+2ml__________________________________(2)加_______________1ml振荡（溶液呈蓝色）（3）_______________（将试管放入盛有50—600C温水的大烧杯中加热约2min）(4)观察颜色变化二、脂肪的检测和观察1、制备生物组织实验材料：花生种子（浸泡3-4小时）、作徙手切片、取极薄的一片移至载玻片中央。
2、_____：滴2—3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min(苏丹Ⅳ染色1min)3、______：吸取剩余染液，并滴1-2滴50%酒精溶液，洗取浮色4、______：吸取酒精，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖波片。
实验一 生物组织中还原糖
实验一生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验原理：该实验中，对三类化合物的鉴定都是根据它们的特定颜色反应进行的。
当质量浓度为0.1 g／ml的氢氧化钠溶液(氢氧化钾溶液亦可)与质量浓度为0.05g／m1的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。
Cu(OH)2与葡萄糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。
因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。
苏丹Ⅲ是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下可看到细胞内橘黄色的颗粒。
蛋白质分子中含有很多肽键，因而能与双缩脲试剂发生反应生成紫色的络合物。
若在组织样液中加入双缩脲试剂后，有紫色反应，则证明其中含有蛋白质。
二、实验目的：初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
三、实验材料：1、做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织中有色素会影响实验结果及其观察的最重要因素。
因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果、梨最好。
也可用白色的甘蓝叶、白萝卜替代(不能选西瓜)。
2、做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。
将花生种子经过3～4小时的浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。
3、做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量较高的大豆（豆浆）或鸡蛋清。
四、试剂配制：1、斐林试剂：甲液——质量浓度为0.1 g／ml的氢氧化钠溶液(10克的氢氧化钠加水至100ml即成)；乙液——质量浓度为0.05g／ml的CuSO4溶液(5g硫酸铜加水至100m1充分溶解即成)。
甲、乙试剂千万要分开放，不可混合。
在实验过程中，将4～5滴乙液滴入2ml甲液中现混现用。
2、苏丹Ⅲ溶液：将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100ml体积分数为95％的酒精溶液中，待全部溶解后即成。
3、双缩脲试剂：A液——质量浓度为0.1 g／ml的氢氧化钠溶液(可使用斐林试剂甲液)。
还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
四类有机化合物：糖类、脂质、蛋白质和核酸。
问：怎样检测生物组织中糖类、油脂、蛋白质和核酸? 淀粉 +碘液
蓝色
热水浴 2-3min 红黄色
还原糖（葡萄糖、果糖） +本尼迪
特试剂
油脂 +苏丹Ⅲ染液
橙黄色 紫色
蛋白质 +双缩脲试剂A +双缩脲试剂B
项目 试剂
时,溶液颜色变化过程 为
A.浅蓝色 B.无色 C.砖红色 D.棕色 棕色 浅蓝色 浅蓝色 绿色 砖红色 棕色 棕色 无色
4.鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，先向试 管内注入2mL黄豆组织样液；然后向试管 内加入2mL双缩脲试剂A，摇匀；再向试 管内加入3 4滴双缩脲试剂B，摇匀。为 什么只加入3 4滴双缩脲试剂B，而不能 过量？
材料 颜色
鉴定糖类 鉴定脂肪 鉴定蛋白质
本尼迪特试剂 苏丹Ш试剂 双缩脲试剂
苹果、梨 砖红色
花生中叶 大豆、卵白 桔黄色 紫色
1.鉴定可溶性还原糖、脂肪、
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
蛋白质的过程中哪一种需要 水浴加热？ 可溶性还原性糖 2.鉴定蛋白质时，双缩脲试剂A 液和B液应如何使用？。 先A液后B液
3.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖
如过量，CuSO4在碱性溶液中生成大 量兰色Cu（OH）2沉淀，遮盖了紫色。
5.鉴定蛋清组织中存在蛋白质时，为何充 分稀释？ 如稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后， 会粘固在试管内壁上，使反应不易彻底， 并且试管中也不易冲洗干净。 6.若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手 指挤压,白纸上会出现透明的油迹,说 明子叶含有脂肪
还原糖脂肪蛋白质的鉴定
还原糖脂肪蛋白质的鉴定教学目的初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
实验原理1．可溶性还原糖+本尼迪特试剂→（浅蓝-棕-）砖红色沉淀呈色反应 2．脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色（+苏丹Ⅳ染液→红色）3．蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应实验程序一、可溶性还原糖的鉴定选材：含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。
制浆制备组织液过滤（用一层纱布）取液呈色反应结论：可溶性还原糖与本尼迪特试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。
关键步骤：水浴加热。
二、脂肪的鉴定取材：花生种子（浸泡3-4小时）将子叶削成薄片（1）最理想的薄片（2）在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液（2-3min）制片（3）去浮色（4）制成临时装片观察：在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。
结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。
关键步骤：子叶削成理想薄片。
三、蛋白质的鉴定选材与制备组织样液：卵清或黄豆（浸泡1-2d）呈色反应结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
关键步骤：先加试剂A再加试剂B。
实验的注意事项1．还原性糖：分子中含有醛基的糖。
如葡萄糖、果糖、麦芽糖。
但是蔗糖不是。
2．双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（0．1g/ml的NaOH溶液），造成碱性的的反应环境后，再加试剂B（0．01g/ml的CuSO4溶液）。
否则，紫色会被Cu(OH)2的蓝色遮蔽。
实验二生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定班级姓名【同类题库】1．在还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，最佳的一组实验材料是①甘蔗的茎②油菜子③花生种子④梨⑤甜菜的块根⑥豆浆⑦鸡蛋清A．④⑦⑥ B．⑤①⑦ C．①②⑥ D．④③⑥2．从某生物体细胞中提取出物质A和B，分析其化学元素组成：A中主要含有C、H、O、N 等元素，B 中主要含有C、H、O、N、P等元素。
A与双缩脲试剂会产生颜色反应，B则易被碱性染料染成深色。
由此推断：A物质是，B物质是。
3．用本尼迪特试剂鉴定可溶性还原性糖时，溶液的颜色变化过程为A．浅蓝色→棕色→砖红色 B．无色→浅蓝色→棕色C．砖红色→浅蓝色→棕色 D．棕色→绿色→无色4．在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择，叙述错误的是A．甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定B．花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料C．大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料D．鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料5．鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是A．本尼迪特试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水6．（多选）鉴定脱脂淡．奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是A．本尼迪特试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水7．下列能与本尼迪特试剂反应生成砖红色沉淀的是①葡萄糖②果糖③蔗糖④麦芽糖⑤淀粉⑥纤维素A．①②⑤ B．②③④ C．①⑤⑥ D．①②④8．下列物质中，与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应最明显的是A．苹果组织样液 B．豆浆 C．浸软的油葵种子 D．马铃薯组织样液9．根据“生物组织中还原性糖的鉴定”的实验原理，设计一个鉴定淀粉酶对淀粉具有消化作用的实验。
生物实验1生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
在显微镜下观察，可观察到染色的脂肪颗粒。
蛋白质的鉴定原理
双缩脲试剂与蛋白质发生反应，生成紫色络合物。
该反应基于蛋白质分子中含有肽键的特性。
02
实验原理
还原糖的鉴定原理
还原糖与斐林试剂反应生成砖红色沉 淀：还原糖中含有醛基，能与斐林试 剂中的铜离子在加热条件下反应，生 成氧化亚铜的砖红色沉淀。
双缩脲试剂由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液混合而成， 使用时需先加A液（氢氧化钠溶液），再滴加B液（硫 酸铜溶液）。
03
实验步骤
还原糖的鉴定步骤
制备组织样液
将生物组织研磨成匀浆，然后 过滤制成组织样液。
加入斐林试剂
取两支试管，分别加入组织样 液和斐林试剂，混合均匀。
加热
将试管放入沸水中加热一段时 间，观察颜色变化。
脂肪鉴定
通过苏丹Ⅲ染色，待测组织中的脂肪颗粒被染成 橘黄色，说明组织中存在脂肪。
蛋白质鉴定
待测组织与双缩脲试剂混合后，呈现紫色反应， 说明组织中存在蛋白质。
分析实验结论与实际应用的联系
01
还原糖鉴定在实际应用中可用于食品质量检测，判 断食品是否符合安全标准。
02
脂肪鉴定可用于食品营养成分标注和营养学研究。
03
蛋白质鉴定在食品、生物医药等领域有广泛应用， 如蛋白质纯度检测、药物研发等。
对实验过程的反思与改进建议
反思
实验过程中，应严格控制实验条件，确保试 剂的新鲜度和准确性，以提高实验结果的可 靠性。
改进建议
建议在实验前对实验器材进行清洁，避免交 叉污染；在脂肪鉴定的过程中，应掌握好苏 丹Ⅲ染色的时间，以获得最佳染色效果；在 蛋白质鉴定的双缩脲试剂使用中，应控制好 试剂的浓度和pH值，以确保紫色反应的明 显性。
蛋白质、还原糖、脂肪和淀粉的鉴定
检测植物组织中的蛋白质、还原糖、脂肪及淀粉一、实验背景资料《生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定》该实验是一个验证性实验。
本实验设计为了让学生在完成常规实验的情况下，根据实验目的，自由选择，灵活运用，然后老师引导学生分析实验结果，选出最佳的实验材料和方案。
故添加了对照试验，增加了实验材料的选择范围。
糖类、脂肪、蛋白质作为三大营养物质，对其的学习是理论课的重点，通过实验让学生更直观的了解他们的性质，为后面的学习打下基础。
二、实验原理1.蛋白质鉴定将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。
双缩脲在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络化物。
蛋白质分子中含有的肽链与双缩脲结构相似，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
2.可溶性还原糖鉴定原理生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。
实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。
斐林试剂为一定浓度的氢氧化钠和硫酸铜配制而成的淡蓝色Cu (OH) 2沉淀的悬浊液，葡萄糖溶液在加入斐林试剂后，在加热条件下还原为砖红色的沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。
其反应式为：CH2OH－（CHOH）4－CHO＋2Cu（OH）2CH2OH－（CHOH）－COOH＋Cu2O＋2H2O4用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色棕色砖红色沉淀3.脂肪鉴定原理苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ为一种橙黄色脂肪染色剂，苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。
苏丹系列染料非常容易溶于脂肪，其次是乙醇等。
4.淀粉鉴定原理淀粉遇碘液变成蓝紫色。
加热又会使蓝紫色消失。
碘本来吸收较长波长的光，显棕色，淀粉吸附碘以后，它们的复合体则吸收较短波长的光，于是显蓝色。
除此之外直链淀粉螺旋链将碘包合在中间，包合物的颜色与淀粉的聚合度以及分子量有关，随着淀粉的聚合度以及分子量上升则颜色变化为：物色（即组织液原来的颜色）、橙色、淡红、紫色、蓝色。
还原糖脂肪蛋白质的鉴定实验
还原糖脂肪蛋白质的鉴定实验1. 还原糖的探秘说到还原糖，大家可能会想起甜甜的糖果，没错！其实，生活中很多美味的东西都跟它有关。
不过，咱们今天可不是要去做糖果，而是来进行一个实验，看看这些还原糖究竟是怎么回事。
还原糖其实就包括了葡萄糖、果糖等，它们可不简单哦，能参与到很多化学反应中呢。
1.1 实验准备首先，咱们得准备一些实验材料。
要想辨别还原糖，咱们可以用到斐林试剂，这可是个好东西，能帮助我们一探究竟！准备一个干净的试管，准备一些斐林试剂，再准备一小撮你想测试的样品，比如说葡萄、蜂蜜或者是牛奶，这些东西里可都有还原糖哦。
你要是问我，为什么牛奶也能算？嘿嘿，因为其中的乳糖也是一种还原糖。
1.2 开始实验现在，实验开始啦！先把样品放进试管里，然后加上几滴斐林试剂。
接下来，放到水浴中加热。
这个过程就像做饭一样，得耐心等待。
几分钟后，咱们就能看到试管里的颜色变化，红棕色的沉淀就说明你找到了还原糖！哇哦，是不是感觉像是发现了宝藏？这就是科学的魅力，嘿嘿！2. 脂肪的鉴定接下来，咱们要聊聊脂肪。
脂肪的鉴定可是个有趣的过程。
很多人可能觉得脂肪是个坏东西，但其实它也是咱们身体需要的营养素之一，适量摄入才能让身体健康。
2.1 实验准备准备脂肪鉴定实验，咱们需要一些实验材料。
首先是油，食用油、黄油都可以，反正能找到的都行。
然后，准备一个滤纸或是干净的白纸，记得选择那种容易吸油的哦。
接下来，咱们要准备一些酒精和水。
这些材料可不能少，不然实验就会泡汤。
2.2 开始实验把油滴在滤纸上，然后慢慢加一些酒精，等待片刻。
你会发现，纸上有一圈透明的油渍，没错，这就是脂肪的证明！像这样，咱们就能轻松辨别脂肪的存在了。
这个过程就像是在进行一次小小的侦探游戏，找到脂肪的“踪迹”。
每次看到那油渍，我都觉得特别有成就感，仿佛自己成了科学家，哈哈！3. 蛋白质的检验最后，咱们要进行蛋白质的鉴定。
蛋白质可是在生活中扮演着重要角色的营养素，像是鸡蛋、豆腐、牛肉等等，都富含蛋白质。
实验检验生物组织中的糖类脂肪和蛋白质
检测蛋白质：
对照1：蒸馏水2ml+双缩脲试剂1ml 对照2：牛奶2ml +蒸馏水1ml 对照3：稀蛋清2ml+蒸馏水1m （已做） 实验组：稀蛋清2ml+双缩脲试剂1m
1m
进行实验并完成实验报告
检测淀粉： 对照1：蒸馏水2ml+碘4滴 对照2：面粉糊2ml +碘液4滴 （已做） 对照3：土豆匀浆2ml+蒸馏水4 滴 实验组：土豆匀浆2ml+碘液4滴
操作流程
材料、仪器 试剂的选择
实验材料 的处理
设计检测 方法步骤
分工协作 进行实验
观察现象 记录结果
表达交流 结果汇总参Leabharlann 案例材料、仪器 试剂的选择
实验材料 的处理
设计检测 方法步骤
分工协作 进行实验
观察现象 记录结果
检测还原糖：
对照1：蒸馏水2ml+斐林试剂
1ml 对照2：葡萄糖溶液2ml +斐林 试剂1ml（已做） 对照3：梨匀浆2ml+蒸馏水1m 实验组：梨匀浆2ml+斐林试剂
请任选一例或你在实验过程中发现的 问题设计实验探究方案。设计好方案后， 我们共同实验，探寻真理。
检测脂肪： 对照1：蒸馏水2ml+苏丹III/IV4滴 对照2：脂肪与热水2ml +苏丹III/IV4滴 （已做） 对照3：花生子叶匀浆2ml+蒸馏水4滴 实验组：花生子叶匀浆2ml+斐林试剂
1m
表达交流 结果汇总
课堂小结
继续探究
1.可不可以用斐林试剂的乙液代替双缩脲 试剂的B液？ 2.斐林试剂能不能分开开使用呢？先加甲 液或乙液，再加乙液或甲液？
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定
1.实验原理
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
鉴定物质 还原性糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂 斐林试剂
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
实验现象
砖红色沉淀 橘黄色 红色 紫色 蓝色
方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
第二章组成细胞的分子 网络构建
蛋白质的结构和功能
细胞的分子组成
核酸的结构和功能
水和无机盐的作用
糖类的种类和作用
脂质的种类和作用
C、H、O、N 种类
20种
氨基酸 脱水缩合 多肽 化学键名称 肽键
氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构
蛋白质结构的多样性
蛋白质7~10%
显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察
现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪的检测结果
3.蛋白质的鉴定
选材与制备 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液） 组织样液：［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］
显 色 反 应 现象：
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
而后立即使用。
砖 红 色 沉
0.05g/mL
淀
在碱性
NaOH 浓度为
蛋白质 的鉴定
双缩脲试 剂NaOH和
CuSO4
环境下 的Cu2+
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量)
生物鉴定类实验报告
实验名称：生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验日期：2023年10月25日实验地点：生物实验室实验人员：张三、李四、王五一、实验目的1. 初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
2. 了解斐林试剂和双缩脲试剂的配制方法及作用原理。
3. 通过实验操作，提高对生物大分子鉴定的实践能力。
二、实验原理1. 还原糖的鉴定原理：生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
它们的分子内都含有还原性基团（游离醛基或游离酮基），因此叫做还原糖。
蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。
本实验中，使用斐林试剂可以检验生物组织中还原糖的存在与否。
斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成。
在加热条件下，斐林试剂中的Cu(OH)2与还原糖发生反应，生成砖红色的Cu2O沉淀，而还原糖本身则氧化成相应的酸。
反应式如下：\[ CH_2OH-(CHOH)_4-CHO + 2Cu(OH)_2 \rightarrow CH_2OH-(CHOH)_4-COOH + Cu_2O + 2H_2O \]用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。
2. 脂肪的鉴定原理：脂肪是一种非极性物质，不易溶于水，但可溶于有机溶剂。
在实验中，使用苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）可以将脂肪染成红色，从而在显微镜下观察到红色的脂肪颗粒。
3. 蛋白质的鉴定原理：鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法。
双缩脲试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液配制而成。
在碱性溶液中，双缩脲能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物。
反应式如下：\[ H_2NOC-NH-CONH_2 + Cu^{2+} \rightarrow [H_2NOC-NH-CONH_2]_2Cu^{2+} \]由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可以与双缩脲试剂发生显色反应。
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验教学体会与反思
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验教学体会与反思最近，随着研究生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验的深入研究，有关它们的研究取得了一定的进展。
鉴定实验的设计和实施，是从一定量的组织样本中提取还原糖、脂肪和蛋白质的主要方法，以便进一步研究他们在细胞内的合成和代谢特性。
本文对有关还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验进行了深入的思考，首先本文介绍了实验的基本情况及背景知识，然后分析了实验室中实验布置与操作，最后总结分析了实验教学活动中存在的不足及自身存在的可改进空间。
研究生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验，是当前生物学研究的一项重要手段。
这种鉴定实验可以识别特定的还原糖、脂肪和蛋白质的分布和数量，这对于了解植物细胞的合成和代谢特性至关重要。
因此，对于还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验的教学既是重要的也是必要的。
本文以《生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验教学体会与反思》为题，通过本篇中的思考，更好地理解、表达和探讨实验教学之体会，提出对实验教学中存在的不足及自身存在的可改进空间。
首先，本文介绍了实验的基本情况及背景知识。
研究中的还原糖、脂肪、蛋白质是汇集细胞结构和功能的基本成份，可以细分为三类：糖类包括果糖、葡萄糖等；脂肪类包括大豆油、植物油等；蛋白质类包括大豆蛋白精提等。
实验方案主要是对一定量的组织样本进行分离，可以选择不同抽提液，如醇乙醚溶液、丙酮乙醚溶液等。
经过蒸煮、过滤、脱水和干燥操作，可以提取出所需的还原糖、脂肪和蛋白质，最后，通过适当的理化指标比较，可以对结果进行定量分析。
其次，本文介绍了实验室中实验布置与操作。
本实验预先在实验室中准备好的实验器械和材料包括：蒸煮瓶、水浴锅、110℃干燥箱等；实验材料包括：醇乙醚溶液、丙酮乙醚溶液等。
具体实验操作如下：首先，将组织样本分离粉碎，然后量取抽提液，充分吸收组织细胞中的还原糖、脂肪和蛋白质，完成样本处理后，将抽提液用实验瓶装好，放入水浴锅中加热，完成抽提，之后把抽提液过滤，然后将其放入110℃干燥箱中脱水，最后将干燥的样本收集起来，用相应的理化指标比较，最后进行定量分析。
《还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验》
《生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的鉴定实验》教学设计一．教学目标1.知识目标①学会检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的基本方法，探讨细胞中主要化合物的种类.②说出生活中常见生物组织细胞中富含的有机物。
2. 能力目标①在理解实验原理，参照实验步骤介绍基础上,学生自行进行实验，培养学生的实验操作能力.②通过小组讨论、交流，培养学生的分析综合能力以及口头表达能力。
3。
情感目标①通过小组进行实验，培养学生团结协作的意识。
②通过如实地观察、记录和分析实验,培养学生认真求实的科学态度。
③培养学生在日常生活中科学的饮食习惯。
二．教学重点检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质.三．教学难点区分斐林试剂和双缩脲试剂的成分、配置和使用方法。
四．课前准备1.教师准备：材料的准备、试剂的配置.2。
学生准备：查阅相关资料，了解生活中常见食物中富含的有机物；预习糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理。
五．实验目的初步掌握用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的基本方法。
六．实验原理、材料及方法（一）还原糖的鉴定1。
实验原理生物组织中普遍存在着可溶性糖且种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，叫做还原性糖.蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基,叫做非还原性糖，不具有还原性.本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性还原糖的存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的Na0H溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，两者混合后，立即生成淡蓝色的Cu（0H）2沉淀。
Cu（0H)2与加入的还原糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu20沉淀。
斐林试剂很不稳定，故应将组成斐林试剂的甲液(0。
1g/mL的Na0H溶液)和乙液(0。
05g/mL的CuSO4溶液）分别配制、储存,实验时将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。
蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验
1、实验原理：
（1）斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化 为：由蓝色变成砖红色(沉淀)。斐林试剂只 能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能 鉴定非还原性糖。葡萄糖、麦芽糖、果糖是 还原糖。 （2）苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色， 苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。 （3）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应（肽 键）。
烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手指 挤压,白纸上会出现透明的油迹,说明子 叶含有脂肪。
试剂配制 A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
双缩脲试剂
B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
2、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 3、实验选材（1、材料应富含相关物质，使现象更加 明显；2、材料本身应无色，以免对结果产生干扰） （1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色 为白色的植物组织，如苹果、梨，也可用白萝卜替代。（因为 组织的颜色较浅，易于观察。） （2）做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花 生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时。 （3）做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆(可用 豆浆替代）或鸡蛋清。
用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴 上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处，可看到细胞中有染成橘 黄色或红色圆形小颗粒。
实验步骤
（1）切片制作
①去掉花生种皮 ②用左手的三个手指夹住花生的一片 子叶，使花生子叶高于手指之上（为 什么？）。右手持刀片，将子叶削去 一层，形成平面。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液） 斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
蛋白质,还原糖的鉴定实验报告.doc
蛋白质,还原糖的鉴定实验报告高一实验二还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定高一生物实验二生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验点拨1、生物学中物质的鉴定与化学中物质的鉴定,其原理是一致的。
化学中被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀, 在生物学中物质鉴定的理念是:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应. ①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀.(水浴加热)②脂肪小颗粒+ 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒.(要显微镜观察)③蛋白质+ 双缩脲试剂→紫色反应.(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液)2、可溶性还原糖的鉴定实验中：应选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织。
以苹果,梨为最好。
且先要制备组织样液。
研磨时，可加石英砂和水一起研磨。
3、斐林试剂要两液混合均匀且现配现用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。
斐林试剂的配制过程示意:斐林试剂甲液( 0.1 g/ml的NaOH 溶液) 斐林试剂乙液( 0.05 g/ml 的CuSO4 溶液)4.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。
注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。
如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，使试管底部离开大烧杯中的开水。
5.做鉴定还原糖的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比，这样可以增强说服力。
6、脂肪的鉴定实验中：实验材料应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。
实验前浸泡3h～4h（浸泡时间太短，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下来的薄片不易成形），最适宜切片。
7、实验中学生应分工合作。
在“还原糖的鉴定”实验中，当每组两个学生中的一个制备生物组织样液时，另一个学生可以用酒精灯将水煮开，以便缩短实验的等待时间。
在“脂肪的鉴定”实验中，一个学生制作临时装片时，另一个学生则可以调试显微镜。
蛋白质,还原糖,脂肪的检测
中央；在花生子叶薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3 min； 用吸水纸吸去染液，再滴加上2滴体积分数为50％的酒精溶液， 洗去浮色；用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精，滴一滴蒸馏水， 盖上盖玻片，制成临时装片。
④ 观察 在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处，移到视野
探究是否含有蛋白质？3组探究是否含有脂肪？4、5组探究是否含有可溶性
还原糖？6、7组探究是否含有淀粉？）
将以上两题的实验预测及结果填入课本P18 页的表 格中。
●请检察并熟悉材料用具
1．实验材料：（梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种 子匀浆，豆浆）——4个小烧杯，花生种子。
2．仪器：双面刀片，试管，试管架，试管夹， 大烧杯2个，温度计，载玻片，盖玻片，毛笔，吸 水纸，显微镜。
中央，将物像调节清楚；换高倍显微镜观察，视野中被染成橘 黄色的脂肪颗粒清晰可见。
5）实验现象
注意事项：
1.淀粉使用前需摇匀。
2.水浴加热试管底部不能接触烧杯底 部（用试管夹），且试管口不能对 准人。
3.斐林试剂及双缩脲试剂的使用。
拓展提升
以上实验是同学们根据生活常识，选择了富含该
化合物的植物组织进行检测。 1、该组织中还含有其它化合物吗？请各小组任选一 种组织样液探究是否含有另外一种化合物。 2、老师从超市购买的某品牌奶制品是否含有以上四 种化合物？请同学们设计实验探究。具体分工如下：1、2组
3．试剂：斐林试剂(甲液：质量浓度为0.1 g／ mL的Na0H溶液，乙液：质量浓度为0.05 g／mL 的CuSO4溶液)，苏丹Ⅲ染液，双缩脲试剂(A液： 质量浓度为0.1 g／mL的NaOH溶液，B液：质量 浓度为0.0l g／mL的CuSO4溶液)，体积分数为 50%的酒精溶液，碘液，蒸馏水。共7瓶
高考生物知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验
2019年高考生物知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验高考生物必备知识点：实验之还原糖、脂肪和蛋白的检测原理1.还原糖用斐林试剂或者班氏试剂，这两种试剂都是浅蓝色的，加入还原糖出现砖红色沉淀2.脂肪用苏丹红，可以发现被染成橘红色3.蛋白质有肽键，也就是有双缩脲结构，用双缩脲试剂，变成紫红色高考生物必备知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验材料用具：一、实验材料1、做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织(如苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等)。
2、做脂肪的鉴定实验，应选择富含脂肪的种子，以花生种子为最佳，实验前需浸泡3-4h。
3、做蛋白质的鉴定实验，可用鸡蛋蛋白或用浸泡1-2d的黄豆种子(或豆浆)。
二、仪器和试剂1、仪器水果刀、镊子、试管、试管夹、试管架、大小烧杯、量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、吸水纸、研钵、石英砂、纱布、显微镜2、试剂班氏试剂、苏丹III染剂、双缩脲试剂、体积分数为20%的酒精溶液、蒸馏水高考生物必备知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验方法步骤：一、可溶性还原糖的鉴定1、制备生物组织样液为节省实验时间，教师在上课之前准备好苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的组织样液(具体方法参照课本中有关内容)。
2、实验操作方法和观察(1)取A、B编号的2支试管，分别注入2ml组织样液和2ml 蒸馏水。
(2)向2支试管内分别加入5—6滴班氏试剂。
振荡试管，使溶液混合均匀，此时溶液呈蓝色。
(3)将2支试管放进盛有开水的大烧杯中，用酒精灯加热煮沸2min左右。
在对试管加热煮沸过程中，随时仔细观察并对比2支试管中溶液的颜色变化。
3、教学建议(1)将学生分成4个小组，分别选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的组织样液进行实验，比较这些植物组织中含糖量的高低，从而增加实验的探究性。
另外，也可选用同一种植物的不同品种的某器官作为实验材料，以比较它们含糖量的高低，如用不同品种的柑橘果实。
三大类物质鉴定实验
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、 纤维素都是非还原性糖。
（2）脂肪的鉴定 材料： 富含脂肪的花生种子 试剂： 苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液
（3）蛋白质的鉴定 材料： 富含蛋白质的大豆或蛋清（蛋清要稀释）
试剂： 双缩脲试剂
（ A液：0.1g/ml NaOH； B液：0.01g/mlCuSO4） （先加A液造成碱性环境，后滴加少量B液）
实验一、生物组织中还原糖、脂肪、 蛋白质的鉴定
1、实验原理：
还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀
脂 肪 + 苏丹III
脂 肪 + 苏丹IV 蛋白质 + 双缩脲试剂
橘黄色
红色 紫色反应
2、实验材料与实验试剂
（1）可溶性还原糖的鉴定 材料： 含糖量高、颜色较浅的生物组织 （苹果、梨） 斐林试剂：甲液：0.1g/ml NaOH；乙液：0.05g/mlCuSO4 试剂
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先加溶液，为2+与蛋白质反应提供一个 碱性的环境。A、B液混装或同时加入， 会导致2+变成 ( ) 2沉淀，而失效。 否则4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
再加入2刚配制的斐 林试剂
（２）脂肪的鉴定 （需要显微镜）
操作方法
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将 薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去 装片中的水。
注意问题
干种子要浸泡3~4小时，新 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间 过长，组织较软，切下的薄片不易 成形。切片要尽可能薄些，便于观 察。
蛋白质还原糖脂肪的 鉴定实验
1、实验原理： （1）斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：由蓝色变成砖红色(沉淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖
存在及否，而不能鉴定非还原性糖。葡萄糖、麦芽糖、果糖是还原糖。 （2）苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。 （3）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应（肽键）。
浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀）
朝向实验者。
防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 甲、乙液混合保存时生成 ( ) 2在70~90℃ 下分解成黑色和水；
.实验步骤 （1）制备组织样液（教师制备） （2）鉴定样液
先在试管中加入2组织样液
注意观察整个实验过程中， 溶液颜色的变化！！！
水浴煮沸2分钟
（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定 1.实验原理 当质量浓度为0.1的氢氧化钠溶液及质量浓度为0.05的硫酸铜溶液混合后，立即生成 淡蓝色的()2悬浊液。 ()2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的 2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。
R—2()2→R—2O↓+2H2O
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组 织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定，甲乙液分别加入时可 能与组织样液发生反应无 ( ) 2生成。
甲乙液 等量混合，现配先用，切不可分 开滴加，或者久置后才用。
4. 试管放在盛有50-65℃温水的大烧杯 最好用试管夹夹住试管上部，使试
中，加热约2分钟，观察到溶液颜色： 管底部不触及烧杯底部，试管口不
试剂配制 A液（0.1的氢氧化钠溶液）
双缩脲试剂 B液（0.01的硫酸铜溶液）
2、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
3、实验选材 （1、材料应富含相关物质，使现象更加明显；2、材料本身应无色，以免对结果产生干扰） （1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨，也可用白萝卜替代。（因为组织 的颜色较浅，易于观察。） （2）做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时。 （3）做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。
（３）蛋白质的鉴定
操作方法
制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。）
注意问题
解释
黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新 鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。加样液约2于试管中，加入双缩 脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试 剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制，储存。 鉴定时先加A液后加B液。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染 染色时间不宜过长。 色1分钟。
用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮 色，再用吸水纸吸去酒精。
苏丹Ⅲ中含有酒精，染色时间久了，把 脂肪全部溶解了，观察不到脂肪粒
酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影 响对橘黄色脂肪滴的观察。同时， 酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞 中的脂肪颗粒溶解成油滴。
4、实验试剂 斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1 溶液和乙液：质量浓度为0.05 4溶液）、 苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、 双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1 溶液 B液：质量浓度为0.01 4溶液）、 体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。
5、方法步骤： （１）可溶性还原糖糖的鉴定 （水浴加热）
试剂配制 斐林试剂
甲液（0.1的氢氧化钠溶液） 乙液（0.05的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。
（二）生物组织中蛋白质的鉴定
1 实验原理 在碱性溶液（）中，双缩脲（H22）能及 2+作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩
脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多及双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生 颜色反应。
操作方法
1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤）
注意问题 苹果或梨组织液必须临时制备
解释
因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被 氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。
2. 取1支试管，向试管内注入2组织样 液。
3. 向试管内注入1新制的斐林试剂，振 荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分 别配制，使用前才将甲、乙液等量 混匀成斐林试剂；
（3）镜检鉴定 在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（最好只有1-2层细胞），移至视野的中心→
换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。 若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。
脂肪检测实验的实验结果
若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手指挤压,白纸上会出现透明的油迹,说明子叶含有 脂肪。
用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水， 盖上盖玻片。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到 装片不宜久放。 细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。
实验步骤 （1）切片制作 ①去掉花生种皮 ②用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手指之上（为什么？）。 右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。
③刀口向内，及花生断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切 片（注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连续动作，切下一些薄片。
（2）染色 用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上
→2-1后，吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片， 制成临时装片。