消毒、灭菌技术.

消毒、灭菌技术
1、加热灭菌
(1)干热灭菌法
1)火焰灭菌法直接利用火焰把微生物灼烧死。

此法灭菌可靠，简便迅速，适用于接种环、接种针、玻璃棒、镊子、解剖刀等用具的灭菌。

在接种过程中，试管口、三角瓶口也都用火焰作短暂灼烧而达到灭菌的目的。

2)干热空气灭菌法在干燥箱内，通过加热使箱内空气温度上升，而达到灭菌的目的。

具体操作方法是：首先将包扎好的器皿放入干燥箱内，使其勿与箱壁接触，并保持箱内空气流通；然后接通电源加热，使温度升至160～170℃，恒温维持2～3小时；再切断电源停止加热，当箱内温度降至60℃以下时，方可打开箱门，取出被灭菌的物品。

此法只适用于玻璃仪器及金属用具。

(2)湿热灭菌法
湿热灭菌法是用煮沸或饱和水蒸气等湿热进行灭菌，此法适用于一切含水物品。

实验室常用高压蒸汽灭菌法灭菌。

高压蒸汽灭菌锅的使用方法：首先，在灭菌锅内加入适量的水，然后把欲灭菌的物品放入，盖上内盖，再对称拧紧外盖上的螺栓；打开锅盖上的放气阀，开始加热；锅内产生蒸汽后，放气阀即有蒸汽排出，约3～5分钟后，待冷湿空气排尽，再关闭放气阀；待压力升到0.1兆帕（121℃）时，维持此压20～30分钟；停止加热，自然冷却，待压力降为零后，打开放气阀，排出残留蒸汽；打开锅盖，取出灭菌的物品，无菌放好。

2、过滤除菌
不适于加热灭菌的物质，可以采用过滤法除菌。

过滤除菌就是利用特别的细菌过滤器，以及活性炭、超细纤维等，将液体或空气中的细菌滤掉。

一般以细菌过滤器为常用。

3、化学药剂消毒与灭菌
化学药剂消毒是利用化学药剂来杀死微生物。

实验室和生产中常用的消毒剂有：5%苯酚溶液常用于实验室、无菌室和无菌操作箱中的空间消毒；10%的福尔马林溶液常用于容器消毒；70～75%酒精是最常用的消毒剂，可用于一般器皿、器械、皮肤、玻片等表面消毒；0.1%次氯酸钠溶液可用于粮粒表面消毒，5%次氯酸钠溶液可用于霉菌毒素的去毒；3～5%的来苏儿常用于桌面地面及皮肤的消毒。

4、紫外线灭菌法
紫外线灭菌法主要应用于无菌室和无菌操作箱的空气灭菌。

通常在10～15㎡空间容积内，采用30瓦紫外光灯照射5～15分钟即可。

为了加强灭菌效果，在开灯之前，可以在无菌室内喷5%苯酚溶液或2～3%的来苏儿溶液，使空气中微生物随雾滴和尘埃降落，以便有效地杀死微生物。

紫外线对人体有伤害，应注意防护。