原花青素的含量测定方法

中易被氧化的成分，在人体内的抗氧化和清除自由基的能力是 V-E50 倍，并且还具有保护心血管、预防高血压、抗肿瘤、抗辐射、抗突变及 美容等作用． 1. 实验原理 朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律，俗称光吸收定律， 是分光光度法定量分析的依据和基础。当入射光波长一定时，溶液的吸 光度 A 是吸光物质的浓度 C 及吸收介质厚度 l(吸收光程)的函数。 比耳的结论是，当用适当波长的单色光照射一固定液层厚度的均匀溶液 时，A 与 C 成正比，其数学表达式为:
3. 实验步骤
a. 标准曲线的制备:准确称取原花青素标准样品0.0504g，用95% 乙醇
溶解并定容于100mL 容量瓶中，所得浓度为5.04mg/mL 作标样。吸
取标样溶液0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3mL分别于
25mL 具塞试管中，加95%乙醇定容为3mL, 然后分别加入0.2mL 2％
原花青素含量 思路：主要采用紫外分光光度法测定火棘果提取液中原
花青素含量。通过在特定的波长或某一范围的波长下，
测定待测物品的吸光度，近而对原花青素进行定量分
析。
原花青素(procyanidins，简称 PC)是植物中广泛存在的一类属于双黄 酮衍生物的天然多化合物，原花青素具有极强的抗氧化特性，一般存在 于植物的果实、种子、花和皮中，在葡萄、山楂、花生、银杏、白桦树、 松树等植物中的含量都很丰富。在原花青素各种不同聚合体中以二聚体 的抗氧化能力最强．原花青素具有多种生物活性，能防治多种疾病，具 有高效、低毒、高生物利用率等特点，在植物中的主要作用是保护植物
NH4Fe(SO4)2 溶液和6mL盐酸正丁醇溶液，盖塞，摇匀，于95℃的水
浴中加热反应40min 取出，于冷水中迅速冷却，溶液显红色，以0mL
溶液作为空白对照，于546nm 处测定其吸光度。采用最小二乘法作
原花青素浓度(C)与吸光度( A ) 线性回归方程。
结果见表
取得标样体 积（/ml）
0
0.5
(此即称为比耳定律，k 称为比例系数） 当 C 采用摩尔浓度 mol/L 时，吸收定律表达为:
Байду номын сангаас
(ε 称摩尔吸光系数，单位为
)
2. 材料和仪器
主要试剂：火棘果提取液，原花青素标样，盐酸正丁醇溶液（量取95mL
正丁醇，加入5mL 浓盐酸，混匀）、NH4Fe(SO4)2、95% 乙醇。
主要仪器：UV2100 型紫外分光光度计、恒温水浴锅。
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
对应标样浓
度（mg/ml)
测的吸光度
值A
b. 样品测定 分别精确吸取10mL 样品，用95%乙醇定容于50mL 容量瓶。吸取上述样 品待测液3mL 于25mL 具塞试管中，按标准曲线制作项下的操作步骤， 依次分别加入0.2mL 2％NH4Fe(SO4)2 溶液、6mL 盐酸正丁醇溶液（注 释：NH4Fe(SO4)2 溶液， 盐酸正丁醇溶液在这里都是分析纯。是大孔 树脂对原花青素的纯化食盐中的分析纯部分）加热，测其吸光度。根据 标准曲线计算出结果，按其稀释倍数求得各样品中原花青素含量。 4. 结果与分析