实验八、九 微生物的生理生化反应PPT幻灯片

❖ 微生物对大分子的淀粉不能直接利用，必须靠产生的胞 外淀粉酶将其分解后才能吸收利用。淀粉遇碘液呈蓝色， 但在淀粉被细菌水解的区域，遇碘不再呈蓝色，这可作 为细菌产生淀粉酶的证据。
结果：
❖ 有水解圈—淀粉水解实验阳性； ❖ 无水解圈—淀粉水解实验阴性.
用接种环取少量枯草杆菌在平板的一边划“+”字形 接种（或点种），另取少量大肠杆菌在平板的另一 边接种，在各培养皿底部标明菌名和组别。置37℃ 温箱中培养16～20小时。
4、淀粉水解试验：打开皿盖，滴加少量碘液于培养基上，轻轻旋转培养皿，使 碘液均匀铺满整个平板。如果在菌周围出现无色透明圈，说明淀粉被水解。 透明圈大小说明该菌水解淀粉能力的大小。
5、甲基红试验（M·R试验）：沿管壁加入甲基红指示剂3～4滴上层呈红色者为 阳性。
试验名称 糖发酵
大肠杆菌
自备大肠 杆菌
接种方案
被接菌种2
被接菌种3
1. 糖发酵 大肠杆菌 自备大肠杆菌 枯草杆菌
2. H2S试验 大肠杆菌 自备大肠杆菌 变形杆菌
3. 甲基红 大肠杆菌 自备大肠杆菌 试验
4. 淀粉水 解实验
5. 吲哚试 验
大肠杆菌 自备大肠杆菌 大肠杆菌 自备大肠杆菌
枯草杆菌 枯草杆菌 枯草杆菌
空白对照 不接种 不接种 不接种
微生物的生理生化反应原理
5．吲哚试验（含氮化化合物的分解利用）
吲哚试验是用来检测吲哚的产生。有些细菌能产生色 氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸。吲 哚与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成红色的玫瑰吲哚。
四人一组操作
配制各类培养基 用无菌操作技术接种
37℃培养24h 观察并分析实验结果
试验名称 被接菌种1
三、实验原理及方法
由于各种微生物的新陈代谢类型不同，因此，对各种物质 利用后所产生的代谢产物也不同，我们可以用化学反应来测定 微生物的代谢产物，这种反应称为生化反应。
生化反应常用来鉴别在形态或其它方面不易区别的微生 物，例如：肠道细菌中，大肠杆菌和伤寒杆菌，二者在形态上 不易区分，但前者能发酵乳糖，后者不能。因此可以从它们能 否发酵乳糖来区别它们，所以微生物的生化反应是微生物分类 鉴定的重要依据之一。
不接种
１.糖发酵试验：经培养后，指示剂呈黄色者表示为性，同时观察小套管中 有无气泡产生。“+”表示产酸；“⊕”表示产酸产气；“-”表示阴
性。 2.H2S试验：培养后取出观察，看有无黑色沉淀产生.有“+” 3.吲哚试验：在培养液中先加入乙醚约1毫升（使呈明显的乙醚层），充分振 荡，使吲哚溶于乙醚中，静置片刻，使乙醚层浮于培养基的上面，这时再沿 管壁慢慢加入吲哚试剂5~10滴，观察有无红色出现。有红色环出现者为阳 性，黄色者为阴性。
微生物的生理生化反应原理
3、甲基红试验
❖ 某些细菌在糖代谢过程中，将培养基中的糖分解为甲酸、 乙酸、乳酸等，使培养基变酸，加入培养基中的甲基红 指示剂[pH4.2（红色）-6.3（黄色）]，可使培养基由 原来的桔黄色变为红色，即甲基红阳性反应。
微生物的生理生化反应原理
4、淀粉水解试验（生wk.baidu.com大分子的分解利用）
一、目的要求
❖ 1.了解细菌的一般生化反应； ❖ 2.了解细菌的生化鉴定方法其原理。
二、实验材料
菌种： 大肠杆菌；枯草杆菌；变形杆菌； 自己划线分离的大肠杆菌。
培养基： 糖发酵培养基（紫红色液体） H2S试验用培养基（固体、试管） 蛋白胨水培养基(吲哚实验） (液体） 淀粉水解用培养基（固体、平板） 葡萄糖蛋白胨水培养基（甲基红实验）(液体）
枯草杆菌
实验结果
H2S试验 甲基红试 淀粉水解 吲哚试验
验
实验
变形杆菌 空白对照
试验结果：“+”表示阳性反应；“-”表示阴性反应； “⊕”表示产酸产气（糖发酵
思考题
❖细菌的生化反应试验意义何在？