蟾蜍离体心脏灌流PPT课件
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验四
蟾蜍离体心脏灌流
实验目的
学习离体蛙心灌流方法 观察K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离
体心脏活动的影响。
实验原理
心肌具有自动节律性、传导性和兴奋性。 离体和脱离神经支配的动物心脏,保持在适当的
环境中,在一定的时间内,仍然能够有节律性地 产生兴奋和收缩。 利用心肌细胞的这一特性,可用来制作离体心脏 模型, 来观察药物和电解质水平对心肌活动的 影响。
第3次结扎：左\右肝静脉\后腔静脉
5. 第四次结扎：
在左主动脉下穿线→在动脉上剪一斜口→蛙心套管 动脉插管插入动脉（不要插入动脉球内）→结扎固 定
在静脉插管中灌入任氏液，可见液体从动脉插管端泵出， 并且直至心脏颜色变成黄白浅色，血液全部泵出后进行离体。
6. 蛙心离体：
剪断右主动脉—剪断左主动脉—剪断静脉插管— 再将多余的长线头剪断—提起第二次结扎的线头、 动脉插管、静脉插管及心脏 小心将蛙心离体。 将与蛙心套管静脉插管和动脉插管的离体蛙心固定在铁架台上
4 2%KCl
注意事项
每次换液时液面应保持一定的高度。 每次换液或滴加试剂时应打标记。 每个试剂瓶的滴管不能混淆。 心脏表面随时滴加任氏液。 待心跳恢复正常后进行下一项实验。
注意事项
同学最容易犯的错误是第二次结扎:要让一个同 学将蛙心提起来，然后另一个同学进行结扎， 以免将蛙的静脉窦结扎进去。
实验要求
每一项实验记录出一段有代表性的曲线，包 括连续三部分: (1)正常对照 (2)加药后的反应 (3)更换灌流液后恢复至正常状态。
实验项目
1 正常曲线
心收缩力
心输出量
最大 波谷值 心率 记录滴 心输出 每搏输出
收缩力 （g） （g）
数（滴） 量（滴/ 量（滴/搏） 分）
2 2%CaCl2 3 更换任氏液
实验项目
3.当心脏恢复正常时，向套管内加入2滴2%KCl溶液，观察 心搏变化频率和幅度，当曲线出现明显变化时，立即更 换任氏液。
4.当心脏恢复正常时，向套管内加入1滴0.01%肾上腺素溶 液，观察心搏变化频率和幅度，当曲线出现明显变化时， 立即更换任氏液。
5.当心脏恢复正常时，向套管内加入1滴0.01%乙酰胆碱溶 液，观察心搏变化频率和幅度，当曲线出现明显变化时， 立即更换任氏液。
离体蛙心循环回路
静脉插管
橡胶连接管 动脉插管
实验材料及仪器设备
蟾蜍 蛙用手术器械，蛙心套管，蛙心夹，张力换
能器，受滴-刺激两用电极 RM6240 系 统 ， 任 氏 液 ， 2%CaCl2 ， 2%KCl ，
0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱。
实验内容与操作步骤
（一）离体蛙心灌流制作
离体蛙心循环回路
静脉插管
橡胶连接管 动脉插管
实验步骤
7.用蛙心夹在心室舒张时夹住心尖约1mm，用 丝线将蛙心夹与张力换能器相连。
8.在动脉套管与静脉套管之间放置记滴电极， 记录滴数。
受滴-刺激-两用电极
蛙心灌流装置安装
受滴信号线
通道1
RM6240记录系统
点击“实验”菜单，选择“蛙心灌流”， 系统进入信号记录状态。
1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，剪除心包膜和肝 系膜（不要损伤血管）
2.第1次结扎：双结扎右主动脉
右主动脉
左主动脉
第1次结扎：双结扎右主动脉
实验内容与操作步骤
3.第2次结扎：结扎左右肺静脉、前腔静脉
（关键步骤：结扎时远离静脉窦） 线头从左主动脉下面穿线，穿行于右主动脉下方；然后 用眼科镊从右侧穿过左肝静脉、后腔静脉、右肝静脉下 方，夹住右主动脉下方的线头拉出；然后一个同学将心 脏提起，另一个同学进行结扎。
第2次结扎：结扎左右肺静脉、前腔静脉
4.第三次结扎：
在左右肝静脉和后腔静脉下穿线→在右肝静脉（或 左肝静脉、或后腔静脉）上用眼科剪剪一斜口→用 加有任氏液的蛙心套管静脉插管插入剪口→结扎固 定（远离静脉窦） 然后马上用任氏液灌入静脉插管中，吸管吹吸，防 止凝血，可见心脏膨大，然后红色逐渐变浅。
做插管时，静脉插管不能太深以免插进静脉窦 中；动脉插管不能太深以免插入动脉瓣中。
静脉插管弄完后，一定马上要灌任氏液，防止 凝血，可见心脏膨大，心脏红色逐渐变浅，； 插管受那些因素影响， 其作用机制如何，在体心脏的活动主 要受那些因素调节？
仪器参数：通道，时间常数：直流；滤波 频率10Hz；灵敏度3g，采样频率400Hz， 扫描速度1s/div。
实验项目
1. 正 常 蛙 心 收 缩 曲 线 和 每 搏 心 输 出 量 记 滴 （ 最 大收缩力、心率、心输出量）。
2.向套管的任氏液中加2%CaCl21滴，观察并记录 心搏曲线的变化。
蟾蜍离体心脏灌流
实验目的
学习离体蛙心灌流方法 观察K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离
体心脏活动的影响。
实验原理
心肌具有自动节律性、传导性和兴奋性。 离体和脱离神经支配的动物心脏,保持在适当的
环境中,在一定的时间内,仍然能够有节律性地 产生兴奋和收缩。 利用心肌细胞的这一特性,可用来制作离体心脏 模型, 来观察药物和电解质水平对心肌活动的 影响。
第3次结扎：左\右肝静脉\后腔静脉
5. 第四次结扎：
在左主动脉下穿线→在动脉上剪一斜口→蛙心套管 动脉插管插入动脉（不要插入动脉球内）→结扎固 定
在静脉插管中灌入任氏液，可见液体从动脉插管端泵出， 并且直至心脏颜色变成黄白浅色，血液全部泵出后进行离体。
6. 蛙心离体：
剪断右主动脉—剪断左主动脉—剪断静脉插管— 再将多余的长线头剪断—提起第二次结扎的线头、 动脉插管、静脉插管及心脏 小心将蛙心离体。 将与蛙心套管静脉插管和动脉插管的离体蛙心固定在铁架台上
4 2%KCl
注意事项
每次换液时液面应保持一定的高度。 每次换液或滴加试剂时应打标记。 每个试剂瓶的滴管不能混淆。 心脏表面随时滴加任氏液。 待心跳恢复正常后进行下一项实验。
注意事项
同学最容易犯的错误是第二次结扎:要让一个同 学将蛙心提起来，然后另一个同学进行结扎， 以免将蛙的静脉窦结扎进去。
实验要求
每一项实验记录出一段有代表性的曲线，包 括连续三部分: (1)正常对照 (2)加药后的反应 (3)更换灌流液后恢复至正常状态。
实验项目
1 正常曲线
心收缩力
心输出量
最大 波谷值 心率 记录滴 心输出 每搏输出
收缩力 （g） （g）
数（滴） 量（滴/ 量（滴/搏） 分）
2 2%CaCl2 3 更换任氏液
实验项目
3.当心脏恢复正常时，向套管内加入2滴2%KCl溶液，观察 心搏变化频率和幅度，当曲线出现明显变化时，立即更 换任氏液。
4.当心脏恢复正常时，向套管内加入1滴0.01%肾上腺素溶 液，观察心搏变化频率和幅度，当曲线出现明显变化时， 立即更换任氏液。
5.当心脏恢复正常时，向套管内加入1滴0.01%乙酰胆碱溶 液，观察心搏变化频率和幅度，当曲线出现明显变化时， 立即更换任氏液。
离体蛙心循环回路
静脉插管
橡胶连接管 动脉插管
实验材料及仪器设备
蟾蜍 蛙用手术器械，蛙心套管，蛙心夹，张力换
能器，受滴-刺激两用电极 RM6240 系 统 ， 任 氏 液 ， 2%CaCl2 ， 2%KCl ，
0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱。
实验内容与操作步骤
（一）离体蛙心灌流制作
离体蛙心循环回路
静脉插管
橡胶连接管 动脉插管
实验步骤
7.用蛙心夹在心室舒张时夹住心尖约1mm，用 丝线将蛙心夹与张力换能器相连。
8.在动脉套管与静脉套管之间放置记滴电极， 记录滴数。
受滴-刺激-两用电极
蛙心灌流装置安装
受滴信号线
通道1
RM6240记录系统
点击“实验”菜单，选择“蛙心灌流”， 系统进入信号记录状态。
1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，剪除心包膜和肝 系膜（不要损伤血管）
2.第1次结扎：双结扎右主动脉
右主动脉
左主动脉
第1次结扎：双结扎右主动脉
实验内容与操作步骤
3.第2次结扎：结扎左右肺静脉、前腔静脉
（关键步骤：结扎时远离静脉窦） 线头从左主动脉下面穿线，穿行于右主动脉下方；然后 用眼科镊从右侧穿过左肝静脉、后腔静脉、右肝静脉下 方，夹住右主动脉下方的线头拉出；然后一个同学将心 脏提起，另一个同学进行结扎。
第2次结扎：结扎左右肺静脉、前腔静脉
4.第三次结扎：
在左右肝静脉和后腔静脉下穿线→在右肝静脉（或 左肝静脉、或后腔静脉）上用眼科剪剪一斜口→用 加有任氏液的蛙心套管静脉插管插入剪口→结扎固 定（远离静脉窦） 然后马上用任氏液灌入静脉插管中，吸管吹吸，防 止凝血，可见心脏膨大，然后红色逐渐变浅。
做插管时，静脉插管不能太深以免插进静脉窦 中；动脉插管不能太深以免插入动脉瓣中。
静脉插管弄完后，一定马上要灌任氏液，防止 凝血，可见心脏膨大，心脏红色逐渐变浅，； 插管受那些因素影响， 其作用机制如何，在体心脏的活动主 要受那些因素调节？
仪器参数：通道，时间常数：直流；滤波 频率10Hz；灵敏度3g，采样频率400Hz， 扫描速度1s/div。
实验项目
1. 正 常 蛙 心 收 缩 曲 线 和 每 搏 心 输 出 量 记 滴 （ 最 大收缩力、心率、心输出量）。
2.向套管的任氏液中加2%CaCl21滴，观察并记录 心搏曲线的变化。