血液分析仪的实验室标准流程

国际参考方法文献
内容
1. 安装后的校准程序 2. 性能验证程序 3. 质控程序 4. 室间质评的意义
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性能验证
● 要求对每台血液分析仪进行性能验证，内容包括：
– 精密度（方案一为传统方法，卫生部临检中心建议；方案二参 照User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy; Approved Guideline，EP15-A Vol. 21 No. 25）
参照：ICSH (1984) Protocol for evaluation of automated blood cell counters. Clin Lab Haemat, 6,69-84
精密度评价——常用方法
● 根据传统的精密度评估方案 ● 批内精密度
– 取低、高两个水平的新鲜血或类新鲜血质控物，连续 重复测定10次，计算CV，SD
– 要求小于CLIA‘88的1/4
● 批间精密度
– 取低、高两个水平的类新鲜血质控物，在5个工作日 进行5个批次的测量。计算X,S,CV
– 一般要求小于CLIA‘88的1/3
CLIA’88要求
精密度评价——CLSI EP-15方法
● 批内精密度
– 要求小于CLIA‘88的1/4
● 批间精密度
– 一般要求小于CLIA‘88的1/3 ● 使用至少2个水平的稳定类新鲜血质控物，在连续的5天内，每
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校准前确认
● 校准时环境状态确认：
– 温度: 15 ~35℃ – 湿度： 30~85%RH – 电压： 220±10%V
● 在仪器上登记试剂的批号和有效期。 ● 校准前30分钟开机，进行自动清洗，确认空白表示没有
超出规定范围。 ● 仪器基本性能确认：
– 精密度检测 – 携带污染率
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校准步骤
● 在开放模式下连续进行6次分析。在分析当中不要混匀校 准品。
● 仪器维护保养后校准
– 特定保养 – 故障维修（更换了可能影响仪器计数校准的特定部件，如旋转
阀、吸样管、泵、定量器模块等） – 仪器搬运 – 质控失控无法纠正时
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厂家的职责
记 录
血液分析仪校准报告
客户名称： 仪器型号： 仪器编号： 校准物名称： 校准物批号： 校准物有效期： 校 准 单 位： 校 准 人: 校 准 日 期：
天检测3次； ● 计算批内精密度
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● 计算实验室内精密度（Sl）：
● 要求：批内精密度和实验室内精密度小于厂家的标称值
或小于CLIA的要求。
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正确度
● ICSH定义的正确度为“估计值与真值之间的一 致性。”真值必须由决定性方法或参考方法获 得。
● 使用具有溯源性的定值全血样本混匀后连续进 行5次测定，计算其平均值与靶值相比较。
– 携带污染率、线性范围及正确度验证（参照：ICSH：含白细胞 分类、网织红细胞计数和细胞标志检测的血细胞分析仪评价指 南）等；
● 频度：
– 性能验证周期最长为1年，仪器校准后必须经过性能验证。
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性能评估实验
¾ 精密度
¾ 批内精密度 ¾ 批间精密度
¾ 正确度 ¾ 携带污染率 ¾ 线性（稀释效应）
校准程序
● 校准品准备：
– SCS-1000校准品，用于WBC、RBC、HGB、HCT/MCV及PLT等参数 校准。
– SYSMEX厂家提供SCS-1000的溯源性证明和不确定度 – 存储：SCS-1000瓶应垂直保存在2~8℃，避免冰冻。未开封的
产品在标签所注明的有效期内稳定。开封后必须4小时内使用 。如未用完，应废弃剩余部分。 – 将校准物从冰箱内（2～8℃）取出后，要求在室温（18～ 25℃）条件下放置15分钟，使其温度恢复至室温。 – 检查校准物是否超出效期，是否有变质或污染。 – 轻轻地将校准物反复颠倒混匀，并置于两手掌间慢慢搓动， 使校准物充分混匀。进行分析前在平面上静置瓶子15秒，使 泡沫散去。 – 打开瓶塞时，应垫上纱布或软纸，使溅出的血液被吸收。
10%
1.0%
10%
2.0%
10%
1.0%
10%
3.0%
15%
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校准报告
● 完成仪器调整校准后，由工程师填写书面报告，并与实 验室负责人共同报告签字，报告存档。
● 实验室人员记录校准因子，备案。
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校准品的溯源性和不确定度
溯源性：追溯到 国际参考方法
不确定度为Uc 的两倍，表 示被检测量的95％可信区间
● 6次分析结束后，使用洁净无屑的纸巾或纱布拭净瓶子及 瓶盖螺纹，之后盖上瓶盖。
● 排除第1次分析结果，计算5次分析的平均值，确认各参 数的平均值都在可接受极限范围内。
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校准步骤
● 各参数均值与定值的差异全部等Байду номын сангаас或 小于表中的第一列数值时，仪器不需 进行调整，记录检测数据即可；
● 若各参数均值与定值的差异大于表中 的第二列数值时，需请维修人员核查 原因并进行处理
● 若各参数均值与定值的差异在表中第 一列与第二列数值之间时，需对仪器 进行调整。
● 将定值除以所测均值，求出校准系数 ，将仪器原来的系数乘以校准系数即 为校准后的系数，将校准后的系数输 入仪器更换原来的系数。
参数
WBC RBC HGB HCT MCV PLT
百分数差异
一列
二列
1.5%
10%
1.0%
血液分析仪的实验室标准流程
20th June, 2012 SCH 客户服务部 张滢
内容
1. 安装后的校准程序 2. 性能验证程序 3. 质控程序 4. 室间质评的意义
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法规要求
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校准要求
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血液分析仪校准周期
● 装机后首次校准 ● 每半年实施1次校准
– 仪器到期需要进行校准，提前3个月向厂家订购校准品，提前30 天与公司有关人员取得联系，由公司派经过认可的工程师对仪 器进行校准。
WBC分类的准确性验证
● 在CBC校正后，为了确保人工镜检结果的准确可靠，对于 人工镜检的白细胞分类结果有以下要求：
1． 镜检人员必须有中级以上职称的检验工作人员，同时 有10年以上镜检工作经验。
2． 必须有两个符合条件1的检验人员，采用盲法镜检同一 份新鲜血的血涂片，每人镜检200个白细胞，镜检结果必 须满足Rumke表中的范围，例如两个人淋巴细胞分类结果 为28%和32%，均值为30%，查表均值为30%时的允许范围 是23.5%~36.5%，28%和32%都在这个范围里面，因此可以 认为30%是一个比较可靠的结果，可以用于淋巴细胞百分 比的校正。