精蛋白的原始研究

精蛋白（Protamine）是一类结构简单的蛋白质，存在于成熟的精细胞中，与细胞核DNA结合在一起，如鱼精蛋白。呈碱性，含有较多的碱性氨基酸，不过缺少Trp和Tyr。

碱性氨基酸

碱性氨基酸（精氨酸、赖氨酸、组氨酸）即水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸，其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团，分别是胍基、氨基、咪唑基。

碱性氨基酸在医药上具有重要的价值，赖氨酸可以治疗营养缺乏症、发育不全及氮平衡失调症，是重要的食品及饲料强化剂，特别适于儿童食品的制造。精氨酸与脱氧胆酸制成的复合制剂（明诺芬）是主治梅毒、病毒性黄疸等病的有效药物。

酸性氨基酸

天然氨基酸已经发现的有300余种，其中分布最为广泛的计有2O多种。通常根据氨

基酸分子中所含氨基(一N )和羧基(-COOH)的数目，将其分为中性、酸性和碱性氨基

酸三类，各类氨基酸的组成和性质有截然不同之处。中性氨基酸台1个氨基和1个羧基，等电点UP)一般在6．2—6．8之间；酸性氨基酸台1个氨基和2个羧基，等电点约在2．B一3．2之间；碱性氨基酸则台有2个氨基和1个羧基，等电点约在9．7一lO．7之间。

20种氨基酸根据其侧链的结构和理化性质可分为五类：

1.非极性脂肪族氨基酸

2.极性中性氨基酸

3.芳香族氨基酸

4.酸性氨基酸

5.碱性氨基酸

酸性氨基酸的侧链都含有羧基

酸性氨基酸:

-NH2比-COOH数目少

天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)

酸性氨基酸：pI<7，即pH<7

强酸性溶液中，主要以正离子存在，向阴极移动。

一种碱性蛋白，主要在鱼类（如蛙鱼、蹲鱼、鲱鱼等）成熟精子细胞核中作为和DNA结合的核精蛋白存在。在中性和碱性介质中显示出很强的抑菌能力，并有较高的热稳定性.

鱼精蛋白的原始研究

3-8hilda CID，Alejandro arellanoprotamines是很基本的，大约有70%的小分子蛋白精氨酸的含量。分子量范围从在哺乳动物和鸟类∼6000–7000鱼4000。在精子发生鱼精蛋白取代组蛋

白建立一个非常紧凑的DNA鱼精蛋白的转录抑制复合物。圆二色性。X射线衍射和电子显微镜的研究已经取得了不同的和非DNA和蛋白之间的相互作用机制，兼容模式。周杰伦与基于主结构数据的二级结构预测费斯门的方法使我们的假设从鱼鱼精蛋白独特的结构模式，哺乳动物和鸟类。其结构的主要特点是β-将产生平行链或不存在β表的配置。该β-将提供强大的球形性质的分子的存在，α-螺旋被排除的结构。该模型允许我们把一些现有的模型与现有的实验数据。

鱼精蛋白，是来自鱼鱼白阳离子肽（精子细胞）和用于医疗应用，如注射胰岛素载体，肝素拮抗剂和最近在一些食品抗菌成分。到目前为止，已经提出了几个程序和定量的鱼精蛋白的纯化。当然，任何天然产物纯化从一个复杂的矩阵，其准确的定量分析使商业过程可以优化回收，收率和纯度。

描述了一种新的中试规模的提取及冷冻鲱鱼鱼精蛋白的纯化。分馏过程是简单的，廉价的和不涉及耗时色谱程序不使用有机溶剂。作为其氯化物和硫酸盐给出最佳的提取和回收鱼精蛋白的条件。冻鲱鱼精的回收率分别为盐酸鱼精蛋白和鱼精蛋白1.1%和1.5%，分别。此外，纯化过程进行了监测和回收率优化新的亲和色谱法对肝素琼脂糖使用。成品是冻干，要么达到或超过美国和欧洲药典标准。

各种方法已被报道和鱼精蛋白但很少出版日期的方法是非常具体的定量检测。本研究描述了测定鱼精蛋白使用一种新的快速蛋白液相色谱分离的琼脂糖肝素亲和柱。鱼精蛋白定量洗脱，作为一个单一的峰与一个缓冲盐溶液和光度在220 nm 峰检测。样品制备是在酸提取物的食品样品进行（包括牛肉和卷心菜）。运行时间包括分离柱平衡是约42分钟，鱼精蛋白的检测限为30μg／mlμ亲和技术被发现在许多方面优于先前公布的分析程序。

一个独特的和简单的比色法测定血浆鱼精蛋白水平的定量分析已经研制成功。该方法是建立在竞争结合位移机构鱼精蛋白与肝素蓝色染料复合物之间，以及在肝素的存在下，蓝色染料的异染的颜色变化。由于该方法是基于临床的特异性为肝素鱼精蛋白拮抗剂，它是特定鱼精蛋白定量。血浆鱼精蛋白水平测定的方法是在94%的精度与它们的水性的常规蛋白检测确定相比。由于中和肝素后鱼精蛋白过量的方法措施，它可能可以使用鱼精蛋白肝素鱼精蛋白逆转过程中监测过量。此外，该方法可以提供一个有用的方法来识别机制的所谓“肝素反弹”。

从软体动物精子鱼精蛋白及相关蛋白。通过凝胶电泳测定分子量表征原始研究文章

大多数种类的软体动物精子有那些组蛋白和鱼精蛋白相关蛋白的混合物的组合物。在stellerii Cryptochiton精子呈现不同的部件，材料就定位，蛤蜊珊瑚和Gibbula李已被分离和表征。结果，连同先前发现的那些（subirana，J.A.，cozcolluela，C.，帕劳，J.和unzeta，M.（1973）生物。生物化学与生物物理进展。学报317，364–379），表明在所有研究的软体动物的一个或多个精氨酸丰富的成分存在。这些蛋白质的分子量差别很大，在不同的物种中，通常是比传统的更大的鱼鱼精蛋白。传统的组蛋白，以及低分子量的赖氨酸丰富的蛋白质，也已在成熟精子的几个物种的发现。分子量已通过凝胶电泳估计，使用聚合鲑精蛋白为标准。

一个简单的高效液相色谱法已发展为鱼精蛋白成分的快速纯化和分析中的胰岛素制剂。只有一个单一的步骤是需要单独的肽的组合物，大小，和不寻常的等电点（PI 13.8）几乎是相同的。该方法涉及他们的等度分离用pH 2的磷酸盐缓冲溶液和乙腈含量低为洗脱剂的反相柱。通过氨基酸分析纯化的鲑鱼成分，固相氨基酸测序，羧肽酶B消化，分析胰岛素络合，和质谱分光光度法程序，给出了完整的肽的精确质量。采用高效液相色谱纯化技术也可以适用于鱼精蛋白和其他高碱性肽从其他来源分离。

从不同种类的软体动物门的精子获得基本的蛋白质已被提取和分级分离。氨基酸分析和这些蛋白质的电泳迁移率显示的类型和不同的物种中的成分相对含量的变化很大。在某些情况下（Gibbula，鲍，乌贼，章鱼）的主要成分是类似于鱼精中发现的鲑鱼，但他们似乎是更大的尺寸（40–80个氨基酸）和氨基酸组成的显着差异。在其他情况下（贻贝，衣衫）一个复杂的蛋白质混合物，其中包括体如组蛋白和中间的鱼精蛋白和组蛋白之间的大小和组合物的蛋白质。其他贝类（牡蛎，大西洋，髌骨）也含有蛋白质鱼精蛋白和组蛋白组成之间的中间，但它们的分子量是大于在组蛋白。在对一个复杂的蛋白质混合物的含胱氨酸得到的一些成分，富含精氨酸。在大多数物种，如组蛋白也存在体。他们的类型和相对含量在各种不同的。这些结果对这些蛋白质的进化历史的理解的意义进行了讨论。这是建议，这些蛋白组蛋白前体的演变。

为定量或半血浆鱼精蛋白的降解进行了三项技术定量测定。一种是基于解放精氨酸的测量，由于精氨酸是最重要的一个组成部分鱼精蛋白（80%重量）。第二利用连续估计的鱼精蛋白的另外一个二次肝素化介质中，过量的肝素测定凝血酶时间和凝聚胺法。第三种方法采用电泳醋酸纤维素，并提供了鱼精蛋白和白蛋白之间形成可溶性配合物的直接可视化，和它们的降解。当应用于含有血浆稀释的孵育混合物（1：8）和鱼精蛋白0.8毫克/毫升，前两种方法很好的相关性，表明鱼精蛋白的降解速度随时间线性。第三种方法与前两个很好的定量协议。鱼精蛋白的降解率是不同的，估计的三种方法，由于可能涉及不同的物理-化学反应。