2016版植物生理学实验指导书资料
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导.第3版
本实验指导书旨在介绍植物生理学的相关知识，指导并帮助广大学子更好地了解植物生理学，能够对实验结果给出合理解释，有助于将知识学习运用到实践中。
《植物生理学实验指导》第3版主要介绍以下内容：
1、植物生长观测：介绍如何正确观察植物的生长，及其生长过程中的变化特点；
2、植物水分特征：介绍植物对水分的需求、植物在水文环境下的适应性，以及植物组织的水力特性；
3、植物营养：介绍植物的营养需求，重点介绍植物对其异养性矿质元素的需求；
4、光合作用与环境：重点介绍植物光合响应性分析实验中被评价复杂反应的生理过程；
5、植物发育特征：介绍植物发育模式，重点讲解植物体态特征以及生物量动态；
6、植物抗逆性表达：介绍植物体内抗逆性的调控机制，以及解析植物诱发抗性反应的研究方法等。
植物生理学作业指导书
植物生理学作业指导书1. 实验目的本次实验旨在帮助学生加深对植物生理学相关知识的理解与应用，通过实际操作实验室中的常见技术和方法，培养学生的实验观察能力和数据分析能力。
2. 实验仪器和材料- 植物样本（如豆芽、植物叶片等）- 干燥器- 秤- 显微镜- 毛细管- 温度计- pH计- 高速离心机- 甘油3. 实验步骤3.1 实验准备3.1.1 准备不同植物材料，确保植物样本的健康状态。
3.1.2 对植物样本进行干燥处理，使其水分含量降至一定程度。
3.1.3 使用秤量取干燥后的植物样本质量，并记录下来。
3.2 水分传导实验3.2.1 取一段长度适当的毛细管，将其一端与水分容器相连，另一端插入植物茎部。
3.2.2 观察水分在毛细管中的上升高度，并记录下来。
3.2.3 根据水分上升高度计算植物茎部的水势。
3.3 光合作用实验3.3.1 准备好一片健康叶片，并在其表面涂抹甘油。
3.3.2 使用显微镜观察叶片中的叶绿素体，并记录下来。
3.3.3 在不同光强下测量光合作用速率，并绘制光合作用速率与光强之间的关系曲线。
3.4 酶活性实验3.4.1 取一定量的酶液，并在不同温度下进行酶活性测定。
3.4.2 使用高速离心机离心酶液，并测定上清液中的酶活性。
3.4.3 根据测定结果，分析酶活性与温度之间的关系。
4. 实验结果分析根据实验步骤中所记录的数据，对每个实验环节进行结果分析。
可以通过绘制图表、计算数据指标等方式呈现实验结果，并结合理论知识进行解释和讨论。
5. 思考题5.1 就水分传导实验结果，探讨植物水势与植物体内水分传导之间的关系。
5.2 对光合作用实验结果进行解读，分析光合作用速率与光强之间的关系，以及甘油对光合作用的影响。
5.3 对酶活性实验结果进行分析，并探讨酶活性与温度之间的关系。
6. 实验总结结合实验步骤、实验结果和思考题，总结本次实验的目的、方法、结果和意义，提出改进措施，并陈述你在本次实验中的收获和体会。
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导实验一小液流法测植物组织水势一、目的学会用小液流法和质壁分离法测植物组织水势和渗透势。
二、材料用具及仪器药品马铃薯、刀片、移液管、培养皿、蔗糖溶液（1mol/L），显微镜三、原理1、小液流法测植物组织水势植物细胞是一个渗透系统，若将植物细胞放在各种不同浓度的蔗糖溶液中时，由于细胞液的浓度与外界溶液的浓度（或水势）的差异。
两者便会发生水分的交换。
当ψ cell外＞ψw cell时，细胞则吸水，细胞外溶液的浓度↑，细胞外溶液的比重↑。
当ψ cell外＝ψw cell时，细胞液与细胞外溶液水分平衡，细胞外溶液的浓度不变，细胞外溶液的比重不变。
当ψ cell外＜ψw cell时，细胞则失水，细胞外溶液的浓度↓，细胞外溶液的比重↓。
本实验是以有色液滴的比重变化确定等渗浓度。
根据公式，即可计算出外溶液的ψs，即ψs= - CiRT[i:离解系数，蔗糖等于1;c:等渗浓度；R：气体常数，0.0083 MPa·L/mol·K；T表示绝对温度，即273+t （实验时溶液的温度）]。
2、质壁分离法测渗透势ψw＝ψp＋ψs。
当ψ cell外＞ψw cell时，细胞则吸水。
当ψ cell外＜ψw cell时，细胞则失水，发生质壁分离。
当发生初始质壁分离时，ψp＝0 ，ψw＝ψs＝ψ cell外= - CiRT四、方法步骤小液流法测植物组织水势1．按十字交叉法把1mol/L蔗糖溶液（母液）分别配成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mol/L蔗糖溶液各10ml。
分别置于5支大试管中，编号作为实验组。
2．另取5支小试管对应于实验组编号，从实验组取2ml蔗糖溶液作为观察组。
3．切约2mm左右见方的马铃薯片。
4．把马铃薯片放入实验组，每组20片，20分钟后，加一点点亚甲基蓝粉末，摇匀。
5．用吸管吸蓝色液，伸入对应观察组中部，轻轻挤出一滴液滴，轻轻取出吸量管，观察液滴移动方向。
6.根据公式ψs=-CiRT,计算出所测材料的ψ cell质壁分离法测渗透势1、按十字交叉法把1mol/L蔗糖溶液（母液）分别配成0.1、0.2、0.3、0.5、0.6 mol/L 蔗糖溶液各2ml。
植物生理学实验指导张志良
植物生理学实验指导引言植物生理学是研究植物内部生物化学和物理活动的科学。
通过实验的方法研究植物的生理过程和生理功能，能够帮助我们更好地了解植物的生长发育、代谢、适应环境等方面的机制。
本实验指导将介绍几个常见的植物生理学实验，并详细说明实验的步骤和注意事项。
实验一：光合作用的测定实验目的通过测定植物光合作用的速率，了解光合作用的基本原理和影响因素。
实验材料和设备•高度光合作用活跃的绿叶片•蒸馏水•滤纸•光合色素提取液•盐酸•詹氏液•光合作用速率测定仪实验步骤1.准备一片新鲜的绿叶片，并使用滤纸将其表面的水分吸干。
2.将绿叶片放入提取瓶中，加入适量的蒸馏水，盖好瓶盖，放置在强光下静置30分钟。
3.将提取瓶中的绿叶片取出，并将其压碎，制成绿叶片提取液。
4.在一次容器中加入10ml绿叶片提取液，同时加入1ml盐酸，用詹氏液调节为酸性条件。
5.将调节好酸性的绿叶片提取液瞬时注入光合作用速率测定仪中。
6.根据测定仪的说明书进行操作，记录每个时间点下的光合作用速率值。
注意事项•实验中所使用的绿叶片应当是光合作用活跃的绿叶片，新鲜度较高。
•测定的过程中应注意光照的稳定性，以免影响光合作用速率的准确性。
•实验过程中应注意安全操作，避免盐酸和其他化学试剂的直接接触。
实验二：渗透压的测定实验目的通过测定植物细胞内外溶液的渗透压差，了解渗透压的基本原理和影响因素。
实验材料和设备•草莓或马铃薯等含有较多汁液的植物组织•单质水•盐水•倒置显微镜•毛细管实验步骤1.取一片新鲜的含有较多汁液的植物组织，如草莓或马铃薯。
2.用刀将该组织剪碎，并将碎片放入一个玻璃杯中。
3.加入适量的单质水，使植物组织完全浸泡其中，静置12小时。
4.取一根毛细管，在一端封闭后，用吸管吸取约5cm 长的盐水，并保持液柱不断。
5.将封闭端的毛细管插入玻璃杯中，并用胶带固定在较深的位置。
6.进行倒置显微镜观察，记录质点的运动情况。
7.根据质点的运动情况，判断渗透压差的大小。
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导目录植物材料的采集、处理与保存..................................... 实验一拟南芥种植和形态观察................................... 实验二植物细胞的活体染色和死活的鉴定......................... 实验三植物原生质体的分离和融合............................... 实验四植物叶面积测定原理、方法和步骤......................... 实验五植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）..................... 实验六植物组织水势的测定（小液流法）......................... 实验七植物根系活力的测定（TTC法）............................ 实验八根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定..................... 实验九离体叶绿体的制备以及完整度的测定....................... 实验十叶绿体色素的提取、分离和理化性质....................... 实验十一植物叶片光合速率的测定（改良半叶法）................. 实验十二氧电极法测定植物组织的光合与呼吸速率................. 实验十三小篮子法（广口瓶法）测定植物的呼吸速率. (37)实验十四谷物淀粉含量的测定（旋光法）......................... 实验十五类似生长素对种子萌发的影响........................... 实验十六赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成........ 错误！未指定书签。
实验十七植物种子生活力快速测定............................... 实验十八植物光周期现象的观察................................. 实验十九植物抗逆性的测定（电导仪法）....... 错误！未指定书签。
(精)植物生理学实验讲义
植物生理学实验讲义目录目录 (I)实验一植物材料的无土培养及缺素症状观察（3学时） (1)实验二植物组织水势的测定（小液流法）（3学时） (2)实验三缺磷、缺铁对植物叶片中叶绿素含量影响（叶绿体色素的提取、分离及定量测定）及光合速率的测定（3学时） (3)实验四：缺素培养对叶片质膜透性及过氧化物酶活性的影响（电导率的测定&愈创木酚法测定POD酶活性）（3学时） (5)Part Ⅰ缺素培养对叶片过氧化物酶活性的影响 (5)Part Ⅱ缺素培养对叶片质膜透性的影响 (6)实验五：设计性实验：逆境胁迫下植物的适应机制研究（6学时） (7)PartⅠ蒽酮法测定可溶性糖 (7)Part Ⅱ植物体内可溶性蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法） (9)Part Ⅲ植物组织中丙二醛含量的测定 (11)实验一植物材料的无土培养及缺素症状观察（3学时）【实验原理】只要满足植物正常生长发育的要求(光、温、水、气、必需元素)，植物可以在水中或砂中生长。
把必需矿质元素配制成培养液培养植物称溶液培养，而把培养液加于洁净的石英砂中培养植物则称砂基培养。
由于培养液中元素的种类和数量可以人为控制，因此当要了解某种元素是否为植物必需时，只要有意识地配制缺乏该种元素的培养液，根据植物在该培养液中所表现出来的症状，便可了解该元素的作用以及对植物生长发育的必要性。
【器材与试剂】器材:，贮液塑料桶（10个)，量筒，移液管，石英砂或蛭石适量，水培设备4个移液器，酸度计，电子天平，数码相机。
试剂：硝酸钙，硝酸钾，硫酸镁，磷酸二氢钾，硝酸钠，氯化镁，硫酸钠，磷酸二氢钠，氯化钙，氯化钾，EDTA-Na2，FeSO4，CuSO4，HBO3，KI，MnCl2，ZnCl2，Na2MoO4。
HCl，NaOH，Na2ClO4或CaClO4以上试剂均需分析纯。
【方法与步骤】1.准备工作1）幼苗准备:实验用种子用漂白粉溶液灭菌半小时，用灭菌水洗几次，然后放在干净的湿石英砂中发芽，加以蒸馏水培养长至一定高度(5cm左右)。
植物生理学实验指导
实验1 植物组织渗透势的测定（质壁分离法）原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。
该溶液的浓度称为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。
代入公式即可计算出春渗透势。
仪器药品显微镜载玻片及盖玻片镊子刀片配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。
称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。
再配制成下列各种浓度：0.50mol/L：吸母液25ml+水25ml0.45mol/L：吸母液22.5ml+水27.5ml0.40mol/L：吸母液20.0ml+水30.0ml0.35mol/L：吸母液17.5ml+水32.5ml0.30mol/L：吸母液15.0ml+水35.0ml0.25mol/L：吸母液12.5ml+水37.5ml0.20mol/L：吸母液10.0ml+水40.0ml0.15mol/L：吸母液7.5ml+水42.5ml0.10mol/L：吸母液5.0ml+水45.0ml操作步骤将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。
撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10分钟后，从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。
实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。
在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直至有把握确定为止。
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导引言部分的内容：1.1 概述植物生理学是研究植物内部生物化学过程和生理功能的科学领域。
它涉及到植物的生长、发育、营养吸收、代谢反应等方面，对于揭示植物的生命活动规律具有重要意义。
通过实验方法，我们可以深入了解植物生理过程中的变化和机制，并为改善农业生产、保护植物资源等提供科学依据。
1.2 文章结构本文按照以下结构进行组织：首先，我们会介绍实验的背景和目标；其次，将详细阐述实验的准备工作，包括所需材料和设备以及实验设计；然后，给出实验步骤，并说明如何进行样本处理、观察测量以及控制变量与数据收集；接下来，在结果与讨论部分，我们将展示并解读实验结果，并分析所得数据；最后，通过总结主要发现、评估实验贡献以及提出可改进之处建议，我们将给出结论。
1.3 目的本文旨在提供一份关于植物生理学实验的指导，使读者能够全面了解实验的目标、设计和步骤，并具备对实验结果进行分析和讨论的能力。
通过本文的阅读，读者将能够掌握植物生理学实验的基本原理和操作技巧，并为进一步开展相关研究提供参考。
注意：以上内容为普通文本格式，不包含任何网址链接。
2. 实验准备2.1 材料和设备在进行植物生理学实验之前，需要准备以下材料和设备：- 植物样本：选择一种适合的植物作为研究对象，并确保样本鲜活、健康。
- 培养基：根据实验的需要选择合适的培养基，如MS培养基或Hoagland培养基等，并准备好所需的量。
- 生长环境：提供适宜的生长环境以促进植物生长，在实验室中可使用温室或生长箱来控制温度、湿度和光照条件。
- 实验室设备：包括显微镜、离心机、天平、移液器、试管架等常见实验室设备，以及pH计和电导仪等特定于植物实验的设备。
2.2 实验设计在进行植物生理学实验之前，应先设计一个科学合理的实验方案。
以下是一些实验设计要考虑的因素：- 实验目标：明确所要研究的问题或假设，并制定相应的研究方法。
- 处理组与对照组：根据研究目标确定不同处理组并设置相应的对照组，以比较不同处理条件下的实验结果。
植物生理学实验辅导资料(园艺专业)
《植物生理学》实验要求及教学大纲1、课程属性：必修2、学时学分：实验学时223、实验应开学期：春季4、实验开设地点：主楼710，植物生理学实验室一、实验要求1、教学方式学生为主，教师辅助，充分预习，独立完成。
2、考核要求以出勤、实验操作、预习报告和实验报告等平时成绩为主要考核内容。
3、出勤要求预习报告课前完成。
课前十分钟进入实验室，清洗实验台上的所有玻璃器皿。
课后将实验器械清洗整理后方可离开实验室。
上课认真听讲、完成实验，不得在课上聊天、打逗等做与实验无关的事情，未经允许不得将实验室内的物品带离实验室。
事、病假应提供相关假条，事后补做的不扣分；事假需调倒班级上课的，每次课每班不得超过3人；不允许无故缺课，一次无故缺课扣除实验总成绩20分，两次及以上无故缺课实验成绩按0分计算。
4、预习报告要求预习报告应包括下列各项：（1）报告的题目；（2）写报告人及共同测定人员的姓名及年级；（3）实验原理；（4）实验仪器和试剂（包括主要仪器的规格、主要试剂的名称）；（5）实验简要步骤（可画箭头示意图）；（6）实验数据记录（包括原始数据记录表格）或实验现象记录（包括各步骤的具体现象及最后现象的记录）；5、实验报告要求实验报告应包括下列各项：（1）报告的题目；（2）写报告人的姓名及年级、学号；（3）实验目的；（4）实验原理；（5）实验仪器和试剂（包括主要仪器的规格、主要试剂的名称）；（6）实验详细步骤；（7）实验数据记录（包括原始数据记录表格和整理后的数据记录表格）或实验现象记录（包括各步骤的具体现象及最后现象的记录）；（8）实验结果，明确提出本次实验的结论，用文字说明；（9）注意事项及对实验中发现的问题进行讨论；（10）回答思考题。
6、损坏赔偿学生在进行实验前应对实验方法和仪器使用方法认真学习，对于由于学生操作不当等原因造成的玻璃器皿、器具、仪器设备等物品的损坏、丢失，应由学生折价赔偿。
二、实验仪器的使用方法1、电子天平①接通电源，按在显示屏显示0.000前不要按任何键（非常重要）；②在托盘上放置一张硫酸纸，按有腐蚀性的固体时，除下垫硫酸纸外，还需使用小烧杯盛放样品，方可称量；③将待测样品放置在硫酸纸上，关闭玻璃防风罩，待显示屏幕左下角的圆圈消失，数值稳定后再读取数值，待测样品应置于托盘中间，不能有超过托盘外缘的部分，否则数据将失真；④总重量在200克以上的样品不得使用千分之一以上的电子天平称量；⑤⑥将电子天平称量室内的样品残渣清除干净，关严玻璃防风罩，罩上防尘罩。
2016年版植物生理学实验指导书
北京农学院[ 自编教材指导书]植物生理学》实验指导（2016版）李奕松姬谦龙马兰青葛秀秀杨明峰王文平赵筱萌编北京农学院生物科学与工程学院2016.2目录★★★ 实验室特别提醒实验一质壁分离法测定细胞渗透势⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 4实验二小液流法测定植物组织水势⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ 5实验三叶绿体色素的提取分离理化性质及定量测定⋯⋯⋯7实验四植物根系活力的测定（TTC 法）10实验五过氧化氢酶（CAT ）活性的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12实验六植物硝酸还原酶（NR ）活性的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯14实验七植物细胞膜透性的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16实验八植物光合速率的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17★★★ 实验室特别提醒一、实验室纪律要求1.按照规定，穿好实验服进入实验室。
2.不允许将食品和饮用水带进实验室。
3.按照教师指定的实验台进行实验，不允许私自调换位置4.实验课中禁止大声喧哗、跑动和打闹。
实验安全注意事项5.注意电源使用安全，禁止湿手拔插插头。
6.水浴锅锅盖开启关闭时，注意避免蒸汽烫伤。
7.注意抽气泵安全使用。
8.注意使用分光光度计时参比液体样品不能满溢洒漏。
三、实验课程要求9.提前预习实验指导内容，熟悉实验原理和步骤。
10.检查台面用具是否完好，若否，须报告进行补充调整。
11.清洗器皿程序：“自来水→去污粉→自来水→去离子水”12.实验原始结果记录需要指导教师审查签字。
13.实验后填写仪器使用记录。
14.实验完毕清洁实验器皿和台面、地面卫生。
15.离开实验课堂需要得到指导教师批准。
实验一质壁分离法测定细胞渗透势一、原理：在生活细胞和外界溶液构成的渗透体系中，水分总是从高水势一方流向低水势一方。
将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中，经过一段时间以后，有的细胞吸收水分，细胞膨胀；有的失去水分，细胞发生质壁分离。
如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好细胞处在临界质壁分离状态，此时细胞内的压力势等于零，外界溶液的渗透势等于细胞渗透势，故此外界溶液称为该组织的等渗溶液，其浓度称之为该组织的等渗浓度。
植物生理学实验课件资料
本科学生综合性实验报告
光合色素的提取、理化性质
分离、吸收光谱及含量的测定
学号：134120171 姓名：王晓莲
学院：生命科学学院专业、班级13生物科学C班实验课程名称：植物生理学实验
教师及职称：李忠光
开课学期：2015 至2016 学年下学期
填报时间：2016 年 4 月 2 日
云南师范大学教务处编印
皂化反应：溶液分为三层
用肉眼可以观察到叶绿素提取液在直射光照射下，反射光为蓝绿色，透射光为深红色
原因：叶绿素吸收光量子而转变成激发态，
当它变回到基态时可发射出红光量子，因而产生荧光；反射光呈蓝绿色是因为叶绿素对蓝绿色光的吸收很少，而对于其他颜色光的吸收很多，所以。
植物生理学实验指导
植物⽣理学实验指导实验⼀叶绿体⾊素提取分离与理化性质及含量测定⼀、实验⽬的和意义绿⾊植物的光合作⽤是在叶绿体中的叶绿体⾊素中进⾏的，了解叶绿体⾊素的组成、性质及测定对于理解光合作⽤的本质很有帮助。
因此，测定叶绿素含量便成为研究光合作⽤与氮代谢必不可少的⼿段，在作物育种、科学施肥、看叶诊断中有着⼴泛的应⽤⼆、实验原理植物叶绿体⾊素是吸收太阳光能，进⾏光合作⽤的重要物质。
它⼀般由叶绿素a、叶绿素b、胡萝⼘素和叶黄素组成。
这些⾊素都不溶于⽔，⽽溶于有机溶剂，故可⽤⼄醇、丙酮等有机溶剂提取。
⾊素分离的⽅法有多种，纸层析是最简便的⼀种。
当溶剂（有机推动剂）不断从纸上流过时，由于混合物（叶绿素提取液）中各种成分在固定相（滤纸纤维素所吸附的⽔分）和流动相（有机推动剂）间具有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过⼀定时间后，可将各种⾊素分开。
叶绿素是⼀种⼆羧酸——叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯，故可与碱起皂化反应⽽⽣成醇（甲醇和叶绿醇）和叶绿酸的盐，产⽣的盐能溶于⽔中，可⽤此法将叶绿素与类胡萝⼘素分开。
叶绿素与类胡萝⼘素都具有光学活性，表现出⼀定的吸收光谱，可⽤分光光度计精确测定。
叶绿素吸收光量⼦⽽转变成激发态，激发态的叶绿素分⼦很不稳定，当它变回到基态时可发射出红光量⼦，因⽽产⽣荧光。
叶绿素的化学性质很不稳定，容易受强光的破坏，特别是当叶绿素与蛋⽩质分离以后，破坏更快，⽽类胡萝⼘素则较稳定。
叶绿素中的镁可以被氢离⼦所取代⽽成褐⾊的去镁叶绿素。
去镁叶绿素遇铜则成为铜代叶绿素，铜代叶绿素很稳定，在光下不易破坏，故常⽤此法制作绿⾊多汁植物的浸渍标本。
测定叶绿体⾊素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝⼘素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度D，并根据叶绿素a、b及类胡萝⼘素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。
Ca=12.7D663–2.69 D645（3）Cb=22.9 D645–4.68D663（4）Ck=4.7D440- 0.27C a+b三、实验材料和器材1、实验材料菠菜或⽩菜叶⽚2、器材：722型分光光度计、电⼦天平、量筒、研钵、剪⼑、漏⽃、滤纸、移液管（1mL）、试管及试管架、洗⽿球、酒精灯、电筒等。
植物生理学复习资料(2016年)
2016—2017第一学期《植物生理学》复习资料一、名词解释第1章植物的水分代谢1.自由水:距离胶粒较远而可以自由流动的水分.2.根压：靠根部水势梯度使水沿导管上升的动力。
3.渗透势：由于溶质颗粒的存在,降低了水的自由能，因而其水势低于纯水的水势。
4.渗透作用：水分从水势高的系统通过半透膜向水势低的系统移动的现象。
5.水分临界期：是指植物在生命周期中，植物对水分不足特别敏感的时期。
6.水势：每偏摩尔体积水的化学势差.7.蒸腾速率：植物在一定时间内单位叶面积蒸腾的水量。
8.蒸腾效率:植物在一定生长期内积累的干物质与蒸腾失水量的比值，用克（干物质）/公斤（水）表示，也可以说是植物每消耗1公斤水所形成干物质的克数。
9.蒸腾比率：植物蒸腾作用丧失水分与光合作用同化CO2的物质的量(mol）比值.10.蒸腾作用Transpiration:指水分以气体状态，通过植物体的表面（主要是叶片），从体内散失到体外的现象。
11.质壁分离：植物细胞由于液泡失水而使原生质体与细胞壁分离的现象第2章植物的矿质营养1.溶液培养法:是在含有全部或部分营养元素的溶液中栽培植物的方法。
2.必需元素:①完成植物整个生长周期不可缺少的；②在植物体内的功能是不能被其他元素代替的，植物缺乏该元素时会表现专一的症状，并且只有补充这种元素症状才会消失；③这种元素对植物体内所起的作用是直接的,而不是通过改变土壤理化性质、微生物生长条件等原因所产生的间接作用。
3.单盐毒害：溶液中只有一种金属离子时,对植物起有害作用的现象.4.载体运输学说5.生物固氮：某些微生物把空气中的游离氮固定转化为含氮化合物的过程。
6.诱导酶（适应酶)：指植物本来不含某种酶，但在特定外来物质的诱导下，可以生成这种酶。
这种现象就是酶的诱导形成(或适应形成），所形成的酶便叫做诱导酶。
第3章植物的光合作用7.CO2饱和点:8.CO2补偿点：。
9.光饱和点：。
10.光补偿点：11.光合磷酸化Photophosphorylation：12.光合作用Photosynthesis：13.光呼吸Photorespiration：14.光能利用率15.红降：16.双光增益效应或爱默生效应：因两种波长的光协同作用而增加光合效率的现象。
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导实验一植物组织水势的测定（小液流法）一、实验目的：理解水势、渗透势的概念，掌握植物水势的测定方法。
二、实验原理：当植物组织浸在已知浓度的外液中时，如果组织水势高于外液水势，则组织失水，外液浓度降低，比重变小；如果组织水势低于外液水势，则组织吸水，外液浓度升高，比重变大；如果组织水势和外液水势相等，则外液的浓度和比重都不变，此溶液的渗透势即等于组织的水势。
三、仪器、试剂、材料：青霉素小瓶（带盖）、弯头注射器、打孔器、镊子、培养皿、滴管、甲烯蓝粉末。
0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol/L蔗糖溶液。
植物叶片。
四、实验步骤：1、用滴管取不同浓度（0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol/L）蔗糖溶液各4ml，分别注入6个青霉素小瓶中（甲组）；再另取上面6种溶液各4ml，注入另6个小瓶中（乙组），对应编号标记。
2、用打孔器从植物叶片上取下相同大小的圆叶片，分别放入甲组小瓶中（每瓶10片），加盖，轻轻摇动以使圆叶片浸泡于溶液中。
3、30分钟后，向甲组小瓶加微量甲烯蓝粉末，轻轻摇动使溶液均匀。
4、用注射器从甲组小瓶中吸取蓝色溶液，插入相同编号的乙组小瓶溶液中部，轻轻挤出一小滴，慢慢抽出注射器，观察蓝色液滴升降情况并填入下表。
五、结果计算：植物组织水势按下式计算：Ψw = - iCRT式中：Ψw —水势，i —解离系数（蔗糖为1 ）C —等渗溶液浓度（mol/L），R —气体常数（0.0083L .MPa /moL.K）T —绝对温度( K=273 + t ℃)附：蔗糖分子量：342.29实验二叶绿体色素的提取、分离和性质的观察一、实验目的：掌握叶绿体色素的提取和分离方法，加深对其性质的理解。
二、实验原理：叶绿体色素包括叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素，这四种色素均不溶于水而溶于有机溶剂，故常用丙酮或乙醇等提取。
叶绿体色素可采用纸层析法进行分离，当溶剂不断地从层析滤纸上流过时，由于混合物各成分在两相（即流动相和固定相）间具有不同的分配系数，它们的移动速度不同，因而使样品混合物分离。
《植物生理学实验》教学大纲全文
《植物生理学实验》教学大纲课程名称（中文/英文）：植物生理学实验（Plant physiology experiments） 课程编号：1805102课程类别：专业方向选修教材名称：《植物生理学实验》实验教学大纲与指导学时学分： 学时 21 学分 1 实验学时 21应开实验学期：二～三 年级 四～五 学期先修课程：植物生理学适用专业：环境科学，生物技术一、课程性质及要求本课程为环境科学、生物技术专业本科生开设的专业教育选修课，是《植物生理学》理论课教学的补充。
本课程教学要求：通过实验操作，让学生深入认识、巩固和扩充植物生理学的基本概念、基本原理、重要生理代谢机制等理论知识，学习植物生理学基本的研究方法和实验技术，培养学生进行科学研究的基本技能，提高学生动手能力以及分析问题、解决问题的能力，养成严谨的科学态度。
二、内容简介《植物生理学》是植物学科方向的高级课程，《植物生理学》实验课是充实课堂理论知识，锻炼学生动手操作能力，培养学生实验基本技能的辅助课程。
该课程通过实践操作，使学生掌握组成植物体各部分的组织学特征及根、茎、叶等器官的细胞学特征，以及掌握植物生理中水分代谢、光合作用、抗性生理、有机物质转化等基本概念和操作技能，更加熟悉植物生理学基础知识，为学生学习后续课程及日后参加生产、科研等工作打下基础。
三、主要仪器设备：普通显微镜，水浴锅，可见分光光度计，托盘天平四、教学方法与基本要求1．必须在所有化学，生物化学等课程完成后才能开设本课程；2. 一般是在理论课教授完成后才进行实验课程的教学；3. 教学方法主要是学生自己操作，授课教师边讲解边示范。
五、考核方法实验报告作为平时成绩记录六、实验项目设置序号实验名称内容提要实验学时每组人数实验属性实验要求1 淀粉粒，石细胞，厚角组织的观察观察植物不同组织的细胞形态及结构 2 1 验证2 根尖形态与结构观察 观察根尖的形态与结构 2 1 验证3 茎的初生与次生结构观察 观察单、双子叶植物茎的初生与次生结构 2 1 验证4 叶表皮细胞，气孔与结构观察观察植物叶表皮细胞及气孔形态与叶横切面结构2 1 验证5 植物细胞原生质流动和质壁分离现象的观察观察植物细胞原生质流动，质壁分离的现象2 1 综合6 植物组织水势的测定 利用小液流法测定植物组织的水势 3 4 综合7 植物叶绿素的提取、分离、性质及吸收光谱利用有机溶剂提取新鲜植物叶片的叶绿素，观察叶绿素的荧光现象，掌握吸收光谱测定方法3 4 综合8 过氧化物酶及超氧化物歧化酶活性的测定掌握植物材料中过氧化物酶及超氧化物歧化酶活性测定原理与方法,比较各种植物材料中酶活性的变化2 4 综合9 油类种子萌发时脂肪酸含量的变化掌握油类种子里脂肪酸测定的方法，比较它们在萌发过程中含量的变化3 4 综合小计21。
2016《植物生理学实验》
2016《植物生理学实验》植物SOD酶活性的测定一、实验目的●学习掌握用氮蓝四唑（NBT）法来测定植物超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的活力。
●了解不同盐浓度胁迫对水稻幼苗叶片SOD酶的影响。
二、实验原理◆SOD发现：1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到SOD。
◆SOD分布：广泛分布在各种生物体内，其活性高低可作为抗衰老的指标。
◆SOD类型：SOD是含Cu、Zn、Mn、Fe金属元素、能清除超氧阴离子自由基的酶，其类型有Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD。
盐胁迫对植物叶片SOD酶的影响（1）在一定盐度的胁迫下，植物叶片中SOD活性随盐浓度的升高而增强。
（2）SOD酶能有效抑制膜脂过氧化作用，具有一定的保护作用。
因此，盐胁迫的损伤在一定范围内是可以修复。
然而，膜系统的修复与SOD、CAT、POD等抗氧化酶的活性和抗坏血酸(ASA)、谷胱甘肽(GSH)等抗氧化物含量的变化密切相关。
SOD测定方法⏹直接法：脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法、核磁共振法。
⏹间接法（化学法）：邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法等。
⏹免疫法：放射免疫法、化学发光免疫分析法、ELISA法等。
超氧阴离子自由基寿命短，不稳定，不易直接测定SOD活性，因而采用间接法测定。
常用有3种：氮蓝四唑光化还原法、邻苯三酚自氧化法、化学发光法。
NBT法测定SOD酶活性的原理◆在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，还原的核黄素极易再氧化而产生氧自由基，可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，甲腙在560nm处有最大吸收。
而SOD可清除氧自由基，从而抑制了甲腙的形成。
◆光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。
据此可以计算出酶活性大小。
酶单位/样品量=⏹核黄素：在有氧物质存在下，还原的核黄素与氧反应产生氧自由基。
⏹氮蓝四唑(NBT)：氧自由基将无色(或微黄)的NBT 还原为蓝色甲腙。
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北京农学院[自编教材指导书] 《植物生理学》实验指导（2016版）李奕松姬谦龙马兰青葛秀秀杨明峰王文平赵筱萌编北京农学院生物科学与工程学院2016.2目录★★★实验室特别提醒实验一质壁分离法测定细胞渗透势 (4)实验二小液流法测定植物组织水势 (5)实验三叶绿体色素的提取分离理化性质及定量测定 (7)实验四植物根系活力的测定（TTC法） (10)实验五过氧化氢酶（CAT）活性的测定 (12)实验六植物硝酸还原酶（NR）活性的测定 (14)实验七植物细胞膜透性的测定 (16)实验八植物光合速率的测定 (17)★★★实验室特别提醒一、实验室纪律要求1.按照规定，穿好实验服进入实验室。
2.不允许将食品和饮用水带进实验室。
3.按照教师指定的实验台进行实验，不允许私自调换位置。
4.实验课中禁止大声喧哗、跑动和打闹。
二、实验安全注意事项5.注意电源使用安全，禁止湿手拔插插头。
6.水浴锅锅盖开启关闭时，注意避免蒸汽烫伤。
7.注意抽气泵安全使用。
8.注意使用分光光度计时参比液体样品不能满溢洒漏。
三、实验课程要求9.提前预习实验指导内容，熟悉实验原理和步骤。
10.检查台面用具是否完好，若否，须报告进行补充调整。
11.清洗器皿程序：“自来水→去污粉→自来水→去离子水”。
12.实验原始结果记录需要指导教师审查签字。
13.实验后填写仪器使用记录。
14.实验完毕清洁实验器皿和台面、地面卫生。
15.离开实验课堂需要得到指导教师批准。
实验一质壁分离法测定细胞渗透势一、原理：在生活细胞和外界溶液构成的渗透体系中，水分总是从高水势一方流向低水势一方。
将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中，经过一段时间以后，有的细胞吸收水分，细胞膨胀；有的失去水分，细胞发生质壁分离。
如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好细胞处在临界质壁分离状态，此时细胞内的压力势等于零，外界溶液的渗透势等于细胞渗透势，故此外界溶液称为该组织的等渗溶液，其浓度称之为该组织的等渗浓度。
根据公式即可计算出该组织细胞液的渗透势。
在实际测定时，由于临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到，所以一般均以细胞初始质壁分离状态作为判断组织等渗浓度的标准。
如果细胞质壁分离较为明显，可根据引起质壁分离的溶液浓度，与相邻的不引起质壁分离的溶液浓度，取其平均值，求出组织等渗浓度，并计算出溶液的渗透势，即为该组织细胞的渗透势。
二、材料与设备：1.植物材料：洋葱鳞茎、大葱、蚕豆叶片或其它植物叶片。
2.设备：显微镜1台、培养皿7套；滴管；载玻片、盖玻片各5片；镊子1把；单面刀1片；滤纸适量。
3.试剂：1.00 mol/L蔗糖溶液，0.03%中性红溶液.三、实验步骤：1. 以1.00 mol/L蔗糖溶液为母液,依照公式C1V1=C2V2配制0.30、0.40、0.50、0.60、0.70 mol/L蔗糖溶液各10ml于干燥清洁的小培养皿内备用。
注意盖上培养皿盖，防止蒸发浓缩。
2. 用刀片在洋葱鳞茎内表皮上划出边长为5mm的小方格，用镊子剥取内表皮数块浸入盛有0.03%中性红溶液的小培养皿内，染色3min，取出后放入盛有自来水的小培养皿内，冲洗中性红留存在细胞间隙、细胞壁等上面的浮色，用滤纸吸干内表皮上的多余水分。
3.在盛有不同浓度蔗糖溶液的培养皿内分别放入染过色并漂洗后的内表皮数块。
20min 后，按从高浓度到低浓度蔗糖溶液的顺序各取出内表皮小块，依次开始镜检，绘图记录质壁分离情况，求出组织细胞的等渗溶液浓度。
四、结果计算：由所得到的组织细胞的等渗浓度和测定时的室温，用下式计算植物细胞的渗透势。
Ψs= -iCRT（MPa）ΨS：为细胞渗透势，以MPa表示。
i ：为溶液的等渗系数（蔗糖溶液的i=1）。
C：等渗溶液的浓度（mol/L）。
T：为绝对温度，T=（273+t℃）K，t为实验时的室温。
R：为气体常数，R=0.008314（L·MPa/mol·k）实验二小液流法测定植物组织水势一、原理水势表示水分的化学势，水分从水势高处流向低处。
植物体细胞之间、组织之间以及植物体和环境之间的水分移动方向都由水势决定。
当植物细胞或组织分别放在一系列浓度递增的溶液中时，如果植物组织的水势小于溶液的渗透势，则组织吸水而使外界溶液浓度变大；反之，则组织水分外流而使外界溶液浓度变小。
若植物组织的水势与溶液的渗透势相等，则二者水分保持动态平衡，所以外界溶液浓度不变，而外界溶液的渗透势即等于所测植物组织的水势。
溶液浓度不同，比重不同，当两个不同浓度的溶液相遇时，稀溶液由于比重小而上浮，浓溶液则由于比重较大而下沉。
取浸过植物组织的溶液一小滴（为了便于观察可先染色），放在原来浓度的溶液中，观察液滴升降情况即可判断浓度的变化，如小液滴不动，则表示溶液浸过植物组织后浓度未变，即外界溶液的渗透势等于组织的水势。
二、材料与设备：1. 植物材料：胡萝卜肉质根或其它作物的叶片。
2. 设备：青霉素小瓶或小试管（12×10mm）6支（均具塞）；大试管（15×150 mm）6支（具塞）；10 ml移液管2支；1 ml移液管2支；毛细滴管6支；打孔器1个；温度计1支；解剖针1支；镊子1把。
三、实验步骤：1、以1.00 mol/L蔗糖溶液为母液,依照公式C1V1=C2V2配制一系列不同浓度的蔗糖溶液（0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mol/L）于6支干净、干燥的大试管中，各管加塞，并编号。
按编号顺序在试管架上排成一列，作为对照组。
2、另取6支干净、干燥的青霉素小瓶，编定序号，按顺序放在试管架上，作为实验组。
然后由对照组的各试管中分别取溶液1ml移入相同编号的实验组试管中，加塞，备用。
3、取胡萝卜肉质根（或剪下具有代表性的新鲜叶片）立即用打孔器打园片。
注意实验材料的取样部位一定要一致，若为叶片组织要避开大的叶脉部分。
迅速将适量植物材料放在青霉素小瓶（或小试管）中。
一般胡萝卜肉质根放入8片（厚约1mm）左右，叶片材料放入20片左右。
摇动小瓶，使植物材料浸入到溶液中。
注意这个过程操作要快，防止水分蒸发。
放置20min。
在此期间摇动小瓶2-3次，使组织和溶液之间进行充分的水分交换。
4、20min后，分别在各小瓶中加入甲烯兰粉末少许，摇匀，使溶液为蓝色。
按浓度依次分别用毛细吸管吸取少量蓝色溶液，轻轻插入相应浓度的试管中，伸至溶液中部，小心缓慢地放出蓝色溶液一小滴，慢慢取出毛细管（注意避免搅混溶液）。
观察并记录液滴的升降情况：如果有色液滴向上移动，说明浸过植物组织的蔗糖溶液浓度变小，植物组织失水，表明植物组织的水势高于该浓度溶液的渗透势；如果有色液滴向下移动，说明浸过植物组织的蔗糖溶液浓度变大，植物组织吸水，表明植物组织的水势低于该浓度溶液的渗透势；如果液滴静止不动，则说明植物组织的水势等于该浓度溶液的渗透势。
在测定中，如果在前一浓度溶液中液滴下降，而在后一浓度溶液中液滴上升，则该组织的水势为前后二种浓度溶液渗透势的平均值。
四、结果计算记录液滴静止不动的试管中蔗糖溶液的浓度。
由所得到的等渗浓度和测定的室温，按下式计算植物组织的水势。
ΨW= - iCRT（MPa）ΨW：为植物组织水势，以MPa表示。
i ：为溶液的等渗系数（蔗糖溶液的i=1）。
C：为等渗溶液的浓度：（mol/L）。
T：为绝对温度：T=（273+t℃）K，t为实验时的室温。
R：为气体常数：R=0.008314（L·MPa/mol·k）实验三、叶绿体色素的提取、理化性质及定量测定I. 叶绿体色素的提取、理化性质一、原理：叶绿体中含有绿色素（叶绿素a和b）和黄色素（胡萝卜素和叶黄素）。
这两类色素能溶于有机溶剂，且各种色素的脂溶性不同。
根据它们在有机溶剂（如乙醇、甲醇、丙酮等）中的溶解特性，可将它们从叶子中提取出来。
叶绿素是一个双羧酸的脂，在碱的作用下，可发生皂化反应。
在酸性条件下，叶绿素啉环中央的镁可被氢取代，于是叶绿素成为褐色的去镁叶绿素。
叶绿素中的镁也可被铜、锌等金属离子取代，此时叶绿素仍可保持绿色。
叶绿素在光照下会发出暗红色的荧光。
二、材料与设备：1. 植物材料：新鲜植物叶片。
2. 设备：研钵一套；漏斗一个；剪子一把；细玻璃棒一支；烧杯（50ml）1支；20ml 刻度试管5支；5 ml刻度试管2支；25 ml刻度吸管2支；酒精灯；石棉网；铁三脚架；滤纸适量。
3. 试剂：丙酮；CaCO3; 80%丙酮；苯；醋酸酮粉末；50%醋酸；KOH-甲醇溶液（20克KOH溶于100ml甲醇中）三、实验步骤：1. 色素的提取取洗净新鲜的植物叶子5克，剪碎放入到研钵中，加入少量碳酸钙和石英砂，再少量多次加入丙酮共10ml，研磨至丙酮染成深绿色，将丙酮提取液滤入小烧杯内，再用10ml 丙酮重复研磨，过滤，滤液待用。
2. 理化性质的测定1）荧光现象取叶绿素提取液，放入试管中，在反射光下观察，溶液的颜色为暗红色，这是叶绿素辐射荧光的现象；在透射光下为绿色，是由于叶绿素分子不吸收绿色光的原因。
2）皂化作用用移液管吸取叶绿素提取液5ml，放入到一大试管中，再加入 1.5ml 20% KOH-甲醇溶液，摇匀。
紧接着加入5ml苯，马上摇匀。
沿试管璧加入蒸馏水 1 ml，轻轻转动试管，静置于试管架上，可看到溶液逐渐分成两层，上层是苯溶液，其中溶有黄色的类胡萝卜素，下层为稀的丙酮溶液，其中溶有绿色的皂化的叶绿素a和b。
3）取代作用[H+ 和Cu2+ 对叶绿素分子中Mg2+的取代]用移液管吸取叶绿素提取液5ml，放入试管中，加入50%醋酸数滴（或浓HCL 1~2滴），摇匀，可观察到溶液由绿色变成褐色，此时叶绿素分子中的Mg2+被H+取代，为去镁叶绿素。
之后将溶液倒一半于另一试管中，加醋酸酮粉末少许，微微加热，则溶液颜色又变成绿色，此时去镁叶绿素分子中的H+被Cu2+取代，为铜代叶绿素。
将两试管中的溶液进行比较。
II.叶绿素的吸收光谱与定量测定一、原理实验目的：掌握紫外分光光度计的使用，学习测定叶绿素的含量及吸收光谱的测定方法。
根据叶绿素对可见光有特定的吸收光谱，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，利用公式计算叶绿素的含量。
该法不但精确度高而且能在未分离的情况下，分别测定叶绿素a和叶绿素b的含量。
已知叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别位于663nm和645nm ,又已知在波长663nm下叶绿素a、b的80%丙酮溶液的比吸收系数为82.04和9.72，在波长645nm下分别为16.75和45.60。
其关系式：D663 = 82.04Ca + 9.72Cb (1)D645 = 16.75 Ca + 45.6Cb (2)D663 、D645：分别为叶绿素溶液在波长663nm和645nm的光密度。