微量注射器使用

微量注射器的使用

1. 用微量注射器进液体样前的几点考虑

在日常色谱分析中，由于进样失败致使分析结果无效是常有的事。其中液体微量注射器进样对定性定量重现性影响因素是多方面的，例如：a.进样系统的设计原理、结构及使用材料；b.样品中的杂质浓度和待分析组分的物理化学性质；

c.进样条件（汽化温度、载气流量、隔垫清洗流量、衬管的选用和注射隔垫的老

化等）；d.注射器选用（规格、结构和质量）、正确使用及保养；e.进样技巧（注射器取样方法、穿透深度及拔出时间）等等。为了尽量减小液体微量注射器进样技术对色谱分析重复性和准确性影响，在分析进样之前应考虑以下几问题：

⑴ 根据样品特点和进样量,应选择配置那种结构汽化衬管？

⑵ 柱头进样还是一般汽化室（带不带玻璃衬管）进样，那种更适合工作需要？

⑶ 在毛细管分析中，首先核对您选择那种进样技术（分流不分流、直接进样等）是否

合适?

⑷ 需要打开调节隔垫清洗气路吗（特别是痕量分析时）？

⑸不同厂商、不同材质、不同结构的注射隔垫对分析干扰程度相差甚大，有条件选用

贴有聚四氟乙稀薄膜的隔垫对分析影响可以减至最小。在痕量分析中，由于垫质量欠佳可使噪声增大1~2倍。另外，选垫隔垫时，还应考虑它的耐温和不同温度下允许穿透的次数；

⑹ 隔垫要老化处理吗？做痕量分析或操作高灵敏度检测器（ECD HID）时，一般隔垫

在使用之前，要在隔垫允许最高使用温度下老化5~6小时。老化后隔垫的使用次数会有些下降应引起注意；

⑺ 汽化玻璃衬管不同厂商形状有所不同，但结构特点是为了不同柱类型、进样量或样

品特点设计分类的，进样前应了解选用那种最适合自己的分析要求；

⑻ 不同厂商的仪器，汽化衬管的密封方法不同，但是密封效果相差甚大，它是注样重

复性的重要保证之一，进样前要特别注意检查是否漏气；

⑼ 为了使样品汽化迅速和均匀或防止非挥发性物质进入色谱柱等，有时在玻璃衬管内

填加石英棉、玻璃棉（可能需要硅烷化）和某种担体（固定相）或叫予柱，看您的分析是否需要？

⑽ 玻璃衬管使用中，一般要经常清洗以除去隔垫或石墨那样颗粒或样品残留物，以防产生对样品催化作用或产生不必要的“鬼”峰；

⑾ 气化温度的选择：汽化温度的高低对组分的分离和峰形有很大影响，温度过低，产 生 前沿峰，温度过高，峰前沿直立或出现分解产物的色谱峰。汽化温度选择一般根据样品组成、样品量和使用色谱柱类型以及柱温来选择，如柱头进样，由于柱头插入汽化室，温度过高会使柱头前沿部分固定相的剥落或分解，造成基线不稳和出现“鬼”峰；⑿ 色谱分析进样量大小依赖于：

①柱容量；

②检测灵敏度；

③检测器的线性范围；

④恒温分析还是程序升温分析；

⑤ 毛细管分析中，以进样方法和毛细管类型等来决定。进样量大会使保留时间位移，

峰变宽而且峰形异变，组分之间的分离变坏。在溶剂拖尾情况下，临近的低含

量组分被掩盖或难以定量；进样量小，可以克服上述弊病，有利于提高组分分

离和分析的准确度，但在痕量分析中，由于主组分和待测组分相差太大，进样

量太小微量组分难以鉴定，有时由于担体的吸附作用，进样量过小还会使保留

时间滞后。程序升温操作进样量和恒温操作相比进样量的限制要小些等等。另

外，进样量还和载气的流量、玻璃衬管汽化体积等有关。进样之前一定要核对

色谱分析方法给定进样量和自己的仪器是否匹配；

⒀ 进样速度依赖于：

⑤样品类型；

⑥柱类型；

⑦恒温还是程序升温操作；

⑧汽化室结构；

⑨载气流量；

⑩衬管类型；

分析方法的要求等。

一般讲组分的挥发性大或峰宽小，注射速度应尽量快，如果注射时间超过峰宽，峰将加宽、拖尾和分离变坏。若组分沸点高和保留时间长，快速进

样就显得不太重要；

⒁ 注射针的插入深度：

由于进样器的结构不同，插入深度是不同的。柱头进样针尖必须插入到柱头，一般汽化室针尖必须插到有效加热区或具玻璃衬管的内填充物上1~2mm处，方有利于样品的瞬时汽化和以“塞子”型进入色谱柱。另外为了重复性每次插入深度应相同；

⒂ 隔垫的松紧：

过紧有利于密封但进样困难，不易重复和隔垫寿命短。实操时应根据柱前压大小适当调节松紧，以保证拨针不漏气为准。实践表明，在某些情况下注入样品后在进样口停留几秒有利于隔垫较松时进样的重复性；

⒃ 柱头进样时，柱头处要留一段不填固定相，此体积多大合适，这要看色谱分析方法而定。内径细、此容积小易得到理想峰形，但汽化体积若小于样品汽化后的体积，由于气化体积突然膨胀，压力波动很大时，会引起样品 "倒灌"而导致峰形畸变；

⒄ 金属汽化室的缺点与清洗:

金属柱头进样或未安装玻璃汽化衬管的金属汽化室,只适用热稳定性好，不与金属表面起反映的样品。因当样品中含有高沸点物质及热不稳定性或腐蚀性组分时,会在柱头或汽化室中沉积炭化,这些物质一旦与其样品中热不稳定组分接触相互作用,会发生吸附作用改变了保留时间、峰形畸变、柱效率降低。另一种可能是在200℃以上时，极性化合物或化学活性物质与残留物发生反应而无峰。有时残留物中的吸附物质又可能与样品作用而解吸出来，在色谱图上出现"鬼峰"。

总之，使用这类型气化室要特别注意，一旦发生异常，就应及时处理柱头或清洗整个汽化室.。

2．液体微量注射器使用注意事项

为了保证液体微量注射进样的重复性和分析精度，液体微量注射器正确使用和技巧也应给一足够重视。

⑴ 规格选用：原则上讲，注射样品量应在注射器量程的2/3左右为佳；

⑵ 注射器量程的校正：a.可用汞称重法；b.用已校正的注射器进样，用比较法

校正；

⑶由于微量注射器注射量校正比较困难和麻烦，为了减小进样量的误差影