多肽序列分析题答案
基于质谱的蛋白质鉴定,第4节:基于MALDI-MS-PSD的多肽序列分析
基于质谱的蛋白质鉴定,第4节:基于MALDI-MS-PSD的多肽序列分析尽管MALDI原则上是一种软电离技术,几乎只产生完整的生物分子离子,但MALDI在电离过程中会形成相当程度的亚稳态离子。
对于肽和蛋白质离子,这种亚稳定的离子行为不仅会引起中性小分子(如水和氨)的损失,还会引起多种肽键断裂。
MALDI-MS中有两种不同类型的碎片反应:(i)在激光撞击后几百ns内,质谱仪的离子源附件的离子的“迅速碎片” (prompt fragmentation)和(ii)PSD则需要较长一些的时间(μs),在将来源于MALDI的离子从离子源提取到RETOF质谱仪的第一个无电场区域的过程。
一般认为,分析物离子在萃取过程中的碰撞激活,以及在电离过程后能量过剩的离子的单分子衰变,都被认为是造成PSD现象的原因。
由于PSD发生在无电场区域,碎片离子的速度与其完整的母离子保持相同的速度,因此在线性MALDI-MS光谱中不能被观察到。
可以通过用一个静电离子镜或“场电子场”代替无场区末端的检测器,这会颠倒入射离子的飞行路径,碎片离子就可以从其完整的母离子中分离出来。
由于它们的动能较小,它们不像完整离子那样深入反射层,因此会更早地从该场中弹出,并且在MALDI-RETOF-MS光谱中的表观质量会低于其前体离子。
由于大多数反射电子场在给定的电压设置下仅具有有限的动态分离范围,因此需要将其逐步降低到较低的电压,以便分离和聚焦整个目标碎片质量范围(通常可以获得10-15个片段)。
一旦反射电子场通过人工合成的已知肽段进行了校准,即可将片段光谱胶合在一起以形成PSD光谱,这时所有片段离子的质量都可以确定。
也可以使用弯曲场反射器,将场几何(field geometry)同时应有于分离和聚焦产生的所有碎片离子,从而避免使用单级或双级反射器的耗时的电压渐进过程。
通过研究肽离子的MALDI-PSD片段,可以推测PSD是酰胺键断裂的主要结果,非常类似于低能碰撞活化解离(CAD)诱导的肽的片段化行为。
高考研究 专题技法系列之(一)
[答案]
C
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高考研究
专题技法系列之(一)
结束
1.已知天冬酰胺的 R 基为—C2H4ON,现有分子式为 C63H103 O18N17S2 的多肽链,其中含有 2 个天冬酰胺。在上述多肽链 中最多有肽键 A.17 个 B.16 个 ( )
C.15 个 D.14 个 解析:多肽 C63H103O18N17S2 中有 17 个 N,因含有两个天冬酰
结束
[解析]
从题意知该多肽为 199 肽,则它是由 199 个氨基酸
组成的;又知该多肽分子式为 CxHyNaObS2,其中 N 有 a 个,则 可知组成该多肽的 199 个氨基酸共有 a 个氨基;又知组成该多肽 的 5 种氨基酸中只有赖氨酸含有 2 个氨基,所以赖氨酸个数为 a -199。由于组成该多肽的 5 种氨基酸中只有天冬氨酸含有 2 个 羧基,设该多肽共含有天冬氨酸为 d 个,反应前 199 个氨基酸中 氧原子共有 4d+(199-d)×2,形成 199 肽时脱去 198 个水分子, 每个水分子含一个氧原子,所以该多肽分子中尚存在氧原子数为 b=4d+(199-d)×2-198=2d+200,d=(b-200)/2。 [答案] A
此以氮原子数或氧原子数的计算为突破口, 计算氨基酸的分子式 或氨基酸个数最为简便。
(6)含 2 个氨基的氨基酸数=N 原子数-肽键数-1。
(7)含 2 个羧基的氨基酸数为:
(O 原子数-肽键数-2)/2。
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高考研究
专题技法系列之(一)
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[例 1]
某多肽链为 199 肽,其分子式为 CxHyNaObS2(a>
高考生物《蛋白质的计算分析》真题练习含答案
高考生物《蛋白质的计算分析》真题练习含答案1.血红蛋白分子由2条α链和2条β链组成,其中α链由141个氨基酸组成,β链由146个氨基酸组成,血红蛋白分子中肽键的数目是()A.141个B.146个C.570个D.574个答案:C解析:血红蛋白含有4条肽链,共2×141+2×146=574个氨基酸,因此氨基酸脱水缩合反应形成的肽键数=574-4=570个。
2.经分析某条多肽链中有O原子p个,N原子q个,它彻底水解后,只得到下列四种氨基酸。
分析推算可知,1分子该多肽水解得到的赖氨酸个数为()A.p-q B.q-pC.p-q+1 D.q-p+1答案:D解析:根据图示分析可知:半胱氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸中都只有一个氨基和一个羧基,而赖氨酸中含有两个氨基和一个羧基,所以它们在核糖体上合成蛋白质时,通过脱水缩合形成的一条多肽链中,含多个游离的氨基和一个游离的羧基,因此,按氧原子数目计算,氧原子数=氨基酸数+肽链条数+R基上氧原子数,分析这四种氨基酸的R基可知,四种氨基酸的R基上均无氧原子,所以氨基酸数为p-1;多肽中N原子数=氨基酸数+R基上的N 原子总数,四种氨基酸中只有赖氨酸的R基上有一个N原子,所以赖氨酸数为q-(p-1)=q-p+1。
3.绿色荧光蛋白简称GFP,最初是从维多利亚多管发光水母中分离出来的结构蛋白。
其相关数据如图所示,下列有关叙述错误的是()A.该蛋白质含有2条肽链B.该荧光蛋白含有的氮原子数是126C.该蛋白质共有肽键124个D.合成该蛋白质时,相对分子质量减少了2 232答案:B解析:游离的羧基数=肽链数+R基上的羧基数,17=肽链数+15,肽链数是2,该蛋白质含有2条肽链,A正确;氮原子数=氨基酸数目+游离的氨基总数-肽链数,氮原子数=126+17-2=141个,B错误;肽键数=氨基酸总数-肽链数=126-2=124,该蛋白质共有肽键124个,C正确;合成该蛋白质时,脱水数=肽键数=124,相对分子质量减少了18×124=2 232,D正确。
《生物化学》课后习题答案
生物化学(第三版)课后习题详细解答第三章氨基酸提要α-氨基酸是蛋白质的构件分子,当用酸、碱或蛋白酶水解蛋白质时可获得它们。
蛋白质中的氨基酸都是L型的。
但碱水解得到的氨基酸是D型和L型的消旋混合物。
参与蛋白质组成的基本氨基酸只有20种。
此外还有若干种氨基酸在某些蛋白质中存在,但它们都是在蛋白质生物合成后由相应是基本氨基酸(残基)经化学修饰而成。
除参与蛋白质组成的氨基酸外,还有很多种其他氨基酸存在与各种组织和细胞中,有的是β-、γ-或δ-氨基酸,有些是D型氨基酸。
氨基酸是两性电解质。
当pH接近1时,氨基酸的可解离基团全部质子化,当pH在13左右时,则全部去质子化。
在这中间的某一pH(因不同氨基酸而异),氨基酸以等电的兼性离子(H3N+CHRCOO-)状态存在。
某一氨基酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的介质pH称为该氨基酸的等电点,用pI 表示。
所有的α-氨基酸都能与茚三酮发生颜色反应。
α-NH2与2,4-二硝基氟苯(DNFB)作用产生相应的DNP-氨基酸(Sanger反应);α-NH2与苯乙硫氰酸酯(PITC)作用形成相应氨基酸的苯胺基硫甲酰衍生物( Edman反应)。
胱氨酸中的二硫键可用氧化剂(如过甲酸)或还原剂(如巯基乙醇)断裂。
半胱氨酸的SH基在空气中氧化则成二硫键。
这几个反应在氨基酸荷蛋白质化学中占有重要地位。
除甘氨酸外α-氨基酸的α-碳是一个手性碳原子,因此α-氨基酸具有光学活性。
比旋是α-氨基酸的物理常数之一,它是鉴别各种氨基酸的一种根据。
参与蛋白质组成的氨基酸中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外区有光吸收,这是紫外吸收法定量蛋白质的依据。
核磁共振(NMR)波谱技术在氨基酸和蛋白质的化学表征方面起重要作用。
氨基酸分析分离方法主要是基于氨基酸的酸碱性质和极性大小。
常用方法有离子交换柱层析、高效液相层析(HPLC)等。
习题1.写出下列氨基酸的单字母和三字母的缩写符号:精氨酸、天冬氨酸、谷氨酰氨、谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。
多肽氨基酸序列分析
百泰派克生物科技
多肽氨基酸序列分析
多肽的氨基酸序列分析就是对组成多肽的氨基酸种类、数量以及排列次序进行鉴定,也称为多肽测序,属于多肽一级结构鉴定的内容。
目前较常用的多肽氨基酸序列分析方法包括经典的Edman降解法、C末端酶解法、C末端化学降解法以及新兴的质
谱法等。
Edman降解法主要是对多肽的N末端氨基酸序列进行分析,但是其对N末端封闭的
肽链无能为力。
此外,Edman降解法测序速度较慢、样品用量较大、样品纯度要求
很高,而且对发生修饰的氨基酸残基识别的准确性不高。
C末端测序法在寻找理想
的PITC化学探针方面仍面临着很大的困难。
在这种背景下,高分辨率(达fmol 级)、高准确性以及操作简便的质谱测序技术则备受青睐,质谱分析技术的灵敏度
及准确性与待测物的分子质量成负相关,分子量增大时检测结果的准确性明显降低,多肽的分子量相比蛋白质小得多,因此采用质谱进行多肽氨基酸序列分析比蛋白质简单,许多研究均是以多肽作为分析对象。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,结合Nano-LC
纳升色谱,提供高效精准的蛋白/多肽氨基酸序列分析服务技术包裹,可对各种蛋
白/多肽样品的一级结构进行解析,包括多肽链中氨基酸的种类、数目和排列顺序
以及多肽链内或链间二硫键的位置和数目等,欢迎免费咨询。
短肽测序分析习题
1.某多肽的序列分析结果如下:(1)完全的酸解产生等量的Ala、Gly、Glu、Arg、Ile和NH4+;(2)羧肽酶A处理,游离出Ile;(3)Edman试剂处理,产生PTH-Gly;(4)用胰蛋白酶处理,产生两个短肽,一个短肽酸解产生等量的Gly、Ala、Arg,另一个短肽酸解产生等量的Glu、Ile和NH4+。
请分析说出该多肽可能的顺序。
问题1:根据(1)、(2)、(3)可推断出。
A. 该多肽为一五肽,C-端为Ile,N-端为GlyB. 该多肽为一五肽,C-端为Gly,N-端为IleC. 该多肽为一五肽,含Gln,C-端为Ile,N-端为GlyD. 该多肽为一五肽,含Gln,C-端为Gly,N-端为Ile 问题2:根据(1)、(2)、(3)和(4)可推断出两个短肽的序列分别为。
A. Gly-Ala-Arg和Gln-IleB. Gly-Ala-Arg和Ile-GlnC. Ala-Arg-Gly和Glu-IleD. Ala-Arg-Gly和Ile-Glu 问题3:根据(1)、(2)、(3)、(4)和(5)可推断出该短肽的序列为。
A. Ile-Glu-Arg-Ala-GlyB. Gly-Ala-Arg-Gln-IleC. Gly-Ala-Arg-Ile-GlnD. Ala-Arg-Gly-Ile-Glu2.某多肽的序列分析结果如下:(1)完全的酸解和碱解表明多肽氨基酸组成为Lys、Met、Pro、Trp、2Ser;(2)FDNB处理,最后得到DNP-Ser和ε-DNP-Lys;(3)羧肽酶A或B都不能使C-端氨基酸脱落下来;(4)用CNBr处理得到两个短肽,一个短肽含Trp、Ser、Pro,另一个短肽含Lys、Ser、Met;(5)用糜蛋白酶处理得到两个短肽,一个短肽含Ser、Pro,另一个短肽含Trp、Met、Lys、Ser。
请分析说出该多肽可能的顺序。
问题4:根据(1)、(2)、(3)可推断出。
生物化学第三版课后习题答案
1.举例说明化学与生物化学之间的关系。
提示:生物化学是应用化学的理论和方法来研究生命现象,在分子水平上解释和阐明生命现象化学本质的一门学科.化学和生物化学关系密切,相互渗透、相互促进和相互融合。
一方面,生物化学的发展依赖于化学理论和技术的进步,另一方面,生物化学的发展又推动着化学学科的不断进步和创新。
举例:略。
2.试解释生物大分子和小分子化合物之间的相同和不同之处。
提示:生物大分子一般由结构比较简单的小分子,即结构单元分子组合而成,通常具有特定的空间结构。
常见的生物大分子包括蛋白质、核酸、脂类和糖类。
生物大分子与小分子化合物相同之处在丁:1)共价键是维系它们结构的最主要的键;2)有一定的立休形象和空间大小;3)化学和|物理性质主要决定于分子中存在的官能团。
生物大分子与小分子化合物不同之处在于:(1)生物大分子的分子量要比小分子化合物大得多,分子的粒径大小差异很大;(2)生物大分子的空间结构婴复杂得多,维系空间结构的力主要是各种非共价作用力;(3)生物大分子特征的空间结构使其具有小分子化合物所不具有的专性识别和结合位点,这些位点通过与相应的配体特异性结合,能形成超分子,这种特性是许多重要生理现象的分子基础。
3.生物大分子的手性特征有何意义?提示:生物大分子都是手性分子,这种结构特点在生物大分子的分子识别及其特殊的生理功能方面意义重大。
主要表现在:(1)分子识别是产生生理现象的重要基础,特异性识别对于产生特定生物效应出关重要;(2)生物大分了通过特征的三维手性空间环境能特异性识别前手性的小分子配体,产生专一性的相互作用。
4.指出取代物的构型:6.举例说明分子识别的概念及其意义。
提示::分子识别是指分子间发生特异性结合的相互作用,如tRNA分子与氨酰tRNA合成醉的相互作用,抗体与抗原之间的相互作用等。
分子识别是生命体产生各种生理现象的化学本质,是保证生命活动有序地进行的分子基础。
7.什么是超分子?说明拆分超分子的方法和原理。
18 多肽蛋白质和核酸习题参考答案
18 多肽 蛋白质和核酸习题参考答案1. 写出下列化合物的构造式:(1) 丙氨酰甘氨酸 (2) 谷·半胱·甘肽答案(1) (2)2. 某三肽完全水解后,得到甘氨酸和丙氨酸。
若将此三肽与亚硝酸作用后再水解,则得乳酸、丙氨酸及甘氨酸。
写出此三肽的可能简写名称。
答案:丙-甘-丙 或 丙-丙-甘。
3. 有一个寡肽甲,经测定知其氨基酸组成为:Ala, 2Gly, Lys, 3Phe, Ser, Val 。
端基分析得知其C 端是苯丙氨酸,N 端是甘氨酸。
当用胰凝乳蛋白酶催化水解时得到了两个肽—甲1和甲2。
甲1完全水解得到2个Gly, 1个Phe 和1个Val ;甲2得Ala, Lys, 2个Phe, Ser 。
请写出寡肽甲可能的简写名称。
(此题删去)答案:可能的名称之一为 甘-苯丙-缬-甘-苯丙-丝-赖-丙-苯丙。
4. 什么是蛋白质的一级结构?蛋白质的一级结构与空间结构有何关系?答案:蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。
蛋白质的一级结构决定其空间结构5. DNA 分子二级结构有哪些特点?答案: DNA 的结构特点有:两条反相平行的多核苷酸链围绕着同一中心轴互绕;碱基位于结构的内侧,而亲水的糖磷酸主链则位于螺旋的外侧,通过磷酸二酯键相连,形成核酸的骨架;碱基平面与轴垂直,糖环平面与轴平行。
两条链皆为右手螺旋;双螺旋的直径是2nm ,碱基堆积距离是0.34nm ,两核酸之间的夹角为36°,每对螺旋由10对碱基组成;碱基按A=T ,G≡C 配对互补,彼此以氢键相互连系。
维持DNA 结构稳定的力量主要是碱基堆积力;双螺旋结构表面有着两条螺形凹沟,一大一小。
6. 解释下列各种条件可使蛋白质变性的原因:(1) Pb 2+和Ag + (2) 尿素 (3) 紫外线(4) 强酸、强碱 (5) 加热答案:(1)重金属离子可以和蛋白质中游离的—COO - 形成不溶性盐。
(2)尿素是很好的氢键受体,使蛋白质原有的氢键被破坏。
例说多肽的推断方法
C55 H70 N10 O19 + ( x + y + z + w - 1) H2 O ,根据左右两边 C、
H、O、N 数分别相等 ,可得
2x + 3y + 9z + 5w = 55……………………………①
5x + 7y + 11z + 9w = 70 + 2 ( x + y + z + w - 1) ……②
中共有lo个n所以它是由lo个氨基酸之间缩掉9个h0而生成故该多肽是nh所以该多肽分子中侧链上拥有的一cooh数即相当于单体谷氨酸的分个未参与缩合反应的一cooh而分子中的conh一键相当于其单体缩聚时用掉了9个一cooh根据含0数可推得其侧链所含一cooh数为19肽水解后能生成4个谷氨酸
2005年第 3期 化 学 教 育
这 2个实例 ,完全跳出了以往对于技能型教学
这一点在课堂小组合作学习中非常重要 ,因为课堂 内容的“操练型 ”教学模式 。从教学实践来看 ,效果
上可供学生支配的时间是有限的 。 ④问题结论的明 比较好 。从中给我们的启示是 :对于技能型教学内
确性 。这是对以概念教学 、技能教学等有明确认知 容 ,教师完全可以把通常由教师直接给出的操作原
⑷案例
⑵问题内容的选择 合作学习的主角是学生 ,
[案例 1 ] 电子式的书写
合作方式主要是学生之间的共同交流讨论和汇总 。
教师事先准备一份阅读材料 ,包含了足够多的
从现实情况来看 ,课堂合作学习的问题主要还是由 各种类型的“电子式 ”的书写实例 ,并按“正确 ”和
教师提供的 。教师在确定某学习内容后 ,面临的问 “错误 ”分成两组 。教师布置给学生的问题为“分析
多肽药物质谱法全序列分析
多肽药物质谱法全序列分析
多肽药物是一种生物大分子药物,由数个到几十个氨基酸通过肽键连接而成,具有广泛的生物活性,可以通过精确地和机体中的特定受体结合来发挥药效。
这种特异性的结合方式使得多肽药物在治疗各种疾病(如癌症、糖尿病和自身免疫病)时,具有良好的疗效和较低的副作用。
然而,多肽药物的质量控制是一大挑战。
由于它们的结构复杂、容易降解,并且常常含有一种或多种的修饰形式,因此,对多肽药物进行全序列分析以确保药物的质量和安全性是非常必要的。
质谱法全序列分析可以用于分析多肽药物的整个氨基酸序列以及任何可能的修饰。
这种方法通过将多肽分解为更小的片段,然后分析这些片段的质量,以确定多肽的氨基酸序列。
质谱法的敏感性高,分辨率好,可以检测到微量的样品,并能在复杂样品中精确地识别目标物质。
此外,质谱法可以定性和定量分析,对于研究药物的构效关系、药物代谢和药物的稳定性等方面都有非常重要的应用。
特别是在多肽药物的开发和生产过程中,质谱法全序列分析被广泛用于药物的质量控制,以确保药物的安全性和疗效。
生物制品表征质谱法全序列分析示意图。
百泰派克生物科技(BTP),采用ISO9001认证质量控制体系管理实验室,获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。
我们利用现有的高分辨率质谱技术平台,开发出以质谱为基础的多肽药物质谱法全序列分析技术,实现对所测定靶蛋白多肽序列100%的覆盖。
此分析可以用于确认多肽是否得到完整表达,检测多肽表达过程是否发生断裂。
百泰派克生物科技多肽药物表征内容。
生物化学:第三章 蛋白质参考答案
第三章 蛋白质1. 在生物缓冲体系中,何种氨基酸具有缓冲作用?答:组氨酸具有缓冲作用。
因为组氨酸含有咪唑基团。
而咪唑基解离常数为6.0,即解离的质子浓度与水的相近,因此组氨酸既可作为质子供体,又可作为质子受体。
在pH=7附近有明显的缓冲作用。
2. 什么是氨基酸的p K和 pI ?它们的关系如何?答:p K指解离常数的负对数,表示一半的氨基酸解离时的pH值;pI指氨基酸所带的正负电荷相等时的溶液的pH值,即等电点。
中性氨基酸:pI= (p K1 + p K2) / 2酸性氨基酸:pI= (p K1 + p K R) / 2碱性氨基酸: pI= (p K2+ p K R) / 23. 计算 0.1 mol/L 的谷氨酸溶液在等电点时主要的离子浓度。
答:因此,0.1 mol/L 的谷氨酸溶液在等电点时主要离子(即两性离子)的浓度为0.083mol/L。
4. 大多数的氨基酸,其α-羧基的p K a都在 2.0 左右,其α-氨基的p K a都在 9.0 左右。
然而,肽中的α-羧基p K a值为 3.8,α-氨基p K a值在7.8。
请解释这种差异。
答:α-氨基酸分子中带正电荷的α-氨基阻止了α-羧基负离子的质子化,即能稳定羧基负离子,因而提高了羧基的酸性。
同理,羧基负离子对质子化的氨基(NH3+)同样有稳定作用,从而降低了其酸性,提高了其碱性。
在肽分子中,由于两个端基(COO-和NH3+)相距较远,这种电荷间的相互作用要弱得多,因此其p K a值与α-氨基酸中氨基和羧基的p K a值存在明显差异。
5、写出五肽 Ser-Lys-Ala-Leu-His 的化学结构,计算该肽的 pI,并指出该肽在pH = 6.0 时带何种电荷。
答:6、人的促肾上腺皮质激素是一种多肽激素。
它的氨基酸序列为Ser-Tyr-Ser- Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Arg-Arg-Pro-Val-Lys-Val-Tyr-Pro-Asp-Ala-Gly-Glu-Asp-Gln-Ser-Ala-Glu-Ala-Phe-Pro-Leu-Glu-Phe;(1)在pH=7条件下,此多肽带有何种电荷?(2)用CNBr处理此多肽,可以得到多少肽段?答:(1)经分析,当pH=7时,多肽中的Ser的游离氨基,Phe的游离羧基以及4个Glu、3个Arg、4个Lys、2个Asp的侧链基团带有电荷。
2022-2023学年天津三中高一(上)期中生物试卷(含答案解析)
2022-2023学年天津三中高一(上)期中生物试卷1.研究发现一类称做“分子伴侣”的蛋白质可识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽,并通过改变自身空间结构与多肽的某些部位相结合,从而帮助这些多肽折叠、组装或转运,其本身不参与组成最终产物并可循环发挥作用。
下列叙述正确的是()A. “分子伴侣”对靶蛋白有高度的专一性B. “分子伴侣”溶于盐水中会造成其生物活性的丧失C. “分子伴侣”的空间结构一旦发生改变,则不可逆转D. “分子伴侣”介导加工的直链八肽化合物中至少含有9个氧原子和8个氮原子2.下列与糖类相关的叙述,正确的是()A. 通常把分布于细胞膜内表面的糖类分子叫做糖被,据此可判断细胞的内外侧B. 胰岛素能催化肝糖原的分解C. 磷酸与核糖交替连接构成DNA的基本骨架D. 几丁质也是一种多糖,存在于甲壳类动物的外骨骼中3.有关图中蛋白质的叙述正确的是()A. 此蛋白质共有2条肽链B. 此蛋白质共有95个肽键C. 此蛋白质的R基中共含有22个氨基D. 此蛋白质形成时共减少的相对分子质量为17644.如图是某多肽分子结构示意图,有关叙述正确的是()A. 该化合物为三肽B. ③⑤⑦的形成方式及结构不同是蛋白质多样性的重要原因之一C. 该多肽链完全水解后产生4种氨基酸D. 该多肽链在形成过程中,相对分子质量减少了545.某化合物含C、H、O、N、S元素,该化合物不可能具有的一项功能是()A. 与抗原发生特异性结合,并清除抗原B. 用于消化食物中的大分子C. 可调节血糖浓度D. 作为生物的遗传物质6.生命科学研究中常用“建模”方法表示微观物质的结构,图中1~3分别表示植物细胞中常见的三种大分子有机物,每种有机物都有其特定的基本组成单位。
则图中1~3可分别表示()A. 多肽、RNA、糖原B. DNA、RNA、纤维素C. DNA、蛋白质、糖原D. 多肽、RNA、淀粉7.如图表示真核细胞某些结构的组成成分,下列叙述正确的是(图中字母是元素符号)()A. 苏丹Ⅲ可用来鉴定物质甲,乙的单体是氨基酸B. 丙的单体是脱氧核苷酸,其中含有糖类C. 结构1功能的复杂程度主要是由图中甲的种类和数量直接决定的D. 丙为该生物的主要遗传物质,乙构成结构1的基本骨架8.下列有关核酸的叙述正确的是()A. 每一分子的核酸中都含有一分子五碳糖、一分子磷酸和一分子碱基B. 核酸的主要组成元素是C、H、O、N,有的含有PC. DNA是各种单细胞生物的遗传物质D. 一种病毒含有2种核酸,5种含氮碱基9.寨卡(Zika)病毒通过伊蚊叮咬进行传播,导致婴儿患上“小头症”,其模式图如图。
多肽蛋白质N-端序列分析
5
多肽蛋白质 N-端序列分析
报告编号:«报告编号» b) 实验方法
1) 液体样品处理: 加 40μl 甲醇到 Prosorb 装置的 PVDF 膜上,待滤过后;加入 40μl 0.1%TFA 溶液, 待滤过后;再加入供试品,供试品的量需大于 50pmol,滤过后;再分别加入 两次 600μl 0.1%TFA 进行滤过。将 Prosorb 放入已预热至 50℃的加热器中烘干, 用 PorSorb Punch(图 1)切下 PVDF 膜,上样。
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多肽蛋白质 N-端序列分析
报告编号:«报告编号»
8. 结论
综上所述,供试品«供试品名称»(批号:«供试品批号»)的 N 端序列为:xxxx
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多肽蛋白质 N-端序列分析
报告编号实验原理edman降解法是异硫氰酸苯酯pitc在弱碱tma条件下与蛋白质n端氨基偶联生成苯氨基硫甲酰肽ptc蛋白质然后在无水强酸tfa条件下n端的第一个残基从完整的多肽蛋白链上以2苯氨基噻唑啉酮atzaa的形式裂解下来之后在稀酸25tfa条件下atzaa转化为更加稳定的苯基乙内酰硫脲衍生物即pth氨基酸如图1生成的pthaa输送至高效液相色谱中进行在线分析剩下的多肽蛋白供试品可反复进行上述处理依次生成各种pthaa经液相系统色谱柱分离可以确定被测多肽蛋白质供试品n端的氨基酸排列顺序
报告编号:«报告编号»
多肽蛋白质 N-端序列分析
供试品:«供试品名称»
上海中科新生命生物科技有限公司 2015 年 4 月 19 日
报告编号:«报告编号»
«供试品名称»的多肽蛋白质 N-端序列分析
供试品名称:«供试品名称» 供试品批号:«供试品批号» 委托单位:«委托单位» 检测人员: 核验人员: 技术服务部负责人:
2019届二轮复习多肽形成过程中的相关数量计算作业(适用全国)
(5)多肽形成过程中的相关数量计算选择题1、下列关于氨基酸和蛋白质的叙述,错误的是( )A.酪氨酸几乎不溶于水,而精氨酸易溶于水,这种差异是由R基的不同引起的B.甜味肽的分子式为C13H16O5N2,则该甜味肽是一种二肽C.某二肽的化学式是C8H14O5N2,水解后得到丙氨酸(R基为-CH3)和另一种氨基酸X,则X的化学式应该是C5H9O4ND.n个氨基酸共有m个氨基,则这些氨基酸缩合成的一条肽链中氨基数为m-n2、下列有关蛋白质的计算的说法,错误的是( )A.氨基酸脱水缩合形成肽链过程中,形成肽键数与脱水分子数相同B.某一蛋白质由4条肽链组成,则此蛋白质至少含有4个游离的—NH2C.亮氨酸的R基为—C4H9,缬氨酸的R基为—C3H7,它们缩合形成的二肽中,C、H的原子个数比为11:24D.—条肽链的分子式为C22H34O12N6,其水解后最多会产生6个氨基酸3、经测定,某多肽链分子式是C21H X O Y N4S2(-SH+ -SH-→-S-S-+2H),其中含有一个二硫键(-S-S-)。
已知该多肽是由下列氨基酸中的几种作为原料合成的:苯丙氨酸(C9H11O2N)、天冬氨酸(C4H7O4N)、丙氨酸(C3H7O2N)、亮氨酸(C6H13O2N)、半胱氨酸(C3H7O2NS)。
下列有关该多肽的叙述,正确的是( )A.该多肽水解后产生的氨基酸分别是半胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸和亮氨酸B.该多肽在核糖体上形成,形成过程中相对分子质量减少了56C.该多肽形成过程中至少需要4种tRNAD.该多肽中H原子数和O原子数分别是32和54、现有若干个氨基酸共含370个氨基和400个羧基,全部合成多肽,则( )A.若形成2条链状多肽,则这2条肽链至少含2个氨基和32个羧基B.若形成2个环状多肽,则这2个环肽中一定不含氨基,但还有30个羧基C.若形成1条链状多肽和1个环状多肽,则合成过程中至少脱去369分子水D.氨基酸的数目至少为370个5、某多肽分子式是2142x y C H O N S 。
生物化学试题及标准答案(蛋白质化学部分)
大学生物化学试题库三蛋白质化学一、填空题1.构成蛋白质的氨基酸有种,一般可根据氨基酸侧链(R)的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。
其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性;而后一类氨基酸侧链(或基团)共有的特征是具有性。
碱性氨基酸(pH6~7时荷正电)有两种,它们分别是氨基酸和氨基酸;酸性氨基酸也有两种,分别是氨基酸和氨基酸。
2.紫外吸收法(280nm)定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。
3.丝氨酸侧链特征基团是;半胱氨酸的侧链基团是;组氨酸的侧链基团是。
这三种氨基酸三字母代表符号分别是4.氨基酸与水合印三酮反应的基团是,除脯氨酸以外反应产物的颜色是;因为脯氨酸是a—亚氨基酸,它与水合印三酮的反应则显示色。
5.蛋白质结构中主键称为键,次级键有、、、、;次级键中属于共价键的是键。
6.镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病,患者的血红蛋白分子b亚基的第六位氨酸被氨酸所替代,前一种氨基酸为性侧链氨基酸,后者为性侧链氨基酸,这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集,氧合能力下降,而易引起溶血性贫血。
7.Edman反应的主要试剂是;在寡肽或多肽序列测定中,Edman反应的主要特点是。
8.蛋白质二级结构的基本类型有、、和。
其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为键。
此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、有关。
而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候,多肽链的a-螺旋往往会。
9.蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体,其稳定性主要因素有两个,分别是和。
10.蛋白质处于等电点时,所具有的主要特征是、。
11.在适当浓度的b-巯基乙醇和8M脲溶液中,RNase(牛)丧失原有活性。
这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。
其中b-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。
而8M脲可使键破坏。
当用透析方法去除b-巯基乙醇和脲的情况下,RNA酶又恢复原有催化功能,这种现象称为。
生化分析题及计算题
生化分析题及计算题(一)多肽序列分析1.测定一种细菌七肽的氨基酸顺序。
经分析,它的氨基酸组成是:Lys1、Pro1、Arg1、Phe1、Ala1、Tyr1和Ser1。
在胰凝乳蛋白酶作用前,此肽不与FDNB反应。
经胰凝乳蛋白酶作用后,此肽水解为2个肽A和B,A肽的氨基酸组成分别为Ala、Tyr、Ser,B肽为Phe、Lys、Arg、Pro。
A肽和B肽分别与FDNB反应产生DNP-Ser和DNP-Lys。
此七肽与胰蛋白酶反应,同样能生成2个肽。
它们的氨基酸组成分别为Arg、Pro和Phe、Tyr、Lys、Ser、Ala。
写出该七肽的氨基酸顺序。
解答:①由于在胰凝乳蛋白酶作用前,此肽不与FDNB反应,即此肽不含有游离的N末端,那么可断定这是一个环肽。
②根据第二句话,由于胰凝乳蛋白酶作用位点是含芳香环的氨基酸,那么这次反应位点是Phe的C端。
③据第三句话,可以分析,A肽顺序为Ser-X-Y(X、Y为Ala或Tyr),B肽顺序为Lys-Z-W-Phe (Z、W为Arg或Pro)④据第四句话,由于胰蛋白酶水解碱性氨基酸(Arg或Lys),由于获得的二肽是Arg和Pro,那么断裂位点在Arg的C末端。
根据以上四点分析,可知这是一个环肽,顺序为—Phe—Ser—Ala—Tyr—Lys—Pro—Arg—2.用下列实验数据推导某寡肽的一级结构并简述判断的理由。
(10分)1) 完全酸水解后产生的氨基酸组成为:Ala、Arg、2Ser、Lys、Phe、Met、Pro;2) 用DNFB处理并水解得到DNP-Ala;3) 羧肽酶A和B对此肽不起作用;4) 用CNBr处理获得2个片段, 1个片段含有Pro、Trp、Ser;5) 用糜蛋白酶作用产生3个片段,1个含有Pro、Ser;另一个含有Met、Trp;最后1个含有Phe、Lys、Ser 、Ala 、Arg;6) 用胰蛋白酶处理产生3个片段,1个含有Ala、Arg;另一个含有Lys 、Ser;最后1个含有Phe、Trp 、Met 、Ser 、Pro。
“蛋白质相关计算”专题(讲解训练及答案)
“蛋白质相关计算”专题(讲解训练及答案)“蛋白质相关计算”专题(讲解训练及答案)一、氨基酸、多肽、肽键、肽链和蛋白质的关系可归纳成下图:例题1.能正确表示蛋白质分子由简到繁的结构层次的一组是:①氨基酸②C、H、O、N 等化学元素③氨基酸分子互相结合④多肽⑤肽链⑥形成具有一定空间结构的蛋白质分子()A.①②③④⑤⑥ B.②①④③⑤⑥ C.②①④③⑥⑤ D.②①③④⑤⑥二、求氨基酸的分子式此类题型的关键就是按照氨基酸分子通式和所给R基写出氨基酸的分子式,涉及到多肽时则根据脱水缩合原理反向推断。
例题2.谷胱甘肽(C10H17O6N3S)是存在于动植物和微生物细胞中的一种重要三肽,它是由谷氨酸(C5H9O4N)、甘氨酸(C2H5O2N)和半胱氨酸缩合而成的,则半胱氨酸可能的分子式为()A.C3H3NS B.C3H5NS C.C3H7O2NS D.C3H3O2NS三、有关蛋白质中氨基酸数、肽链数、肽键数、脱水数的计算1.n个氨基酸脱水缩合形成一条多肽链,则肽键数=脱水数=氨基酸数-1=(n?1)个;2.n个氨基酸脱水缩合形成一个由m条多肽链组成的蛋白质时,则脱去的水分子数和形成的肽键数为(n-m)个;3.无论蛋白质中有多少条肽链,始终有:脱水数=肽键数=氨基酸数-肽链数;4.注:环状肽特点是肽键数与氨基酸数相同。
即肽键的数目=脱去的水分子的数目=氨基酸的数目。
例题3.某蛋白质分子共有四条肽链,300个肽键,则形成这个蛋白质分子所需氨基酸分子数以及它们在脱水缩合过程中生成的水分子数分别是()A.296和296 B.304和304 C.304和300 D.300和300 例题4.某三十九肽中共有丙氨酸4个,现去掉其中的丙氨酸得到4条长短不等的多肽(如图),这些多肽中肽键总数为()A.31 B.32C.34 D.35例题5.氨基酸分子脱水缩合形成含2条肽链的蛋白质分子时,相对分子量减少了900,由此可知,此蛋白质分子中含有的氨基酸数和肽键数分别是()A.52、52 B.50、50 C.52、50 D.50、49四、有关蛋白质中游离的氨基或羧基数目的计算氨基酸之间脱水缩合时,原来的氨基和羧基已不存在,形成的多肽的一端是-NH2,另一端是—COOH,所以对于n条肽链的多肽,每1条肽链至少应有1个-NH2,1个—COOH,若还有--NH2或—COOH,则存在于R基中。
生物仪器分析试题及答案
生物仪器分析试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 生物仪器分析中,以下哪种仪器不属于色谱分析仪器?A. 气相色谱仪B. 液相色谱仪C. 质谱仪D. 光谱仪答案:D2. 在生物样品分析中,以下哪种检测器不适合用于液相色谱?A. 紫外检测器B. 荧光检测器C. 电化学检测器D. 热导检测器答案:D3. 质谱分析中,以下哪种离子化技术不适用于生物大分子?A. 电喷雾离子化(ESI)B. 基质辅助激光解吸/电离(MALDI)C. 大气压化学离子化(APCI)D. 电子轰击离子化(EI)答案:D4. 在生物样品分析中,以下哪种色谱柱不适合用于蛋白质分析?A. 反相色谱柱B. 离子交换色谱柱C. 凝胶渗透色谱柱D. 亲和色谱柱答案:A5. 以下哪种检测器可以用于检测生物样品中的糖类?A. 紫外检测器B. 荧光检测器C. 电化学检测器D. 蒸发光散射检测器答案:D6. 在生物样品分析中,以下哪种技术不适用于核酸分析?A. PCRB. 凝胶电泳C. 质谱分析D. 免疫分析答案:D7. 以下哪种仪器分析技术可以用于活细胞成像?A. 质谱分析B. 核磁共振(NMR)C. 共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)D. 流式细胞仪答案:C8. 在生物样品分析中,以下哪种技术不适用于蛋白质定量分析?A. 酶联免疫吸附测定(ELISA)B. 西方印迹(Western blot)C. 质谱分析D. 核磁共振(NMR)答案:B9. 以下哪种色谱技术不适用于小分子化合物的分离?A. 气相色谱B. 液相色谱C. 毛细管电泳D. 凝胶渗透色谱答案:D10. 在生物样品分析中,以下哪种检测器不适合用于检测氨基酸?A. 紫外检测器B. 荧光检测器C. 电化学检测器D. 质谱检测器答案:B二、填空题(每题2分,共20分)1. 生物仪器分析中,_________(填入“色谱”或“光谱”)分析技术主要用于分离和检测生物样品中的各种组分。
答案:色谱2. 质谱分析中,_________(填入“ESI”或“APCI”)是一种常用的软离子化技术,特别适合于生物大分子的分析。
多肽序列分析题答案
2.根据以下实验结果推断一多肽链的氨基酸序列:
(1)酸水解测出的氨基酸组成为:2Ala,Arg,2Lys,Met,Phe,2Ser。
(2)用羧肽酶水解最先得到氨基酸为Ala;
(3)胰蛋白酶水解得四个肽段,其氨基酸组成如下:①Ala,Arg;②Lys,Phe,Ser;③Lys;④Ala,Met,Ser。
(4)溴化氰水解得到两个肽段,其氨基酸组成如下:①Ala,Arg, 2Lys,2 Met,Phe,Ser;②Ala,Ser。
(5)嗜热菌蛋白酶水解得两个肽段,其氨基酸组成如下:①Ala,Arg, Ser;②Ala, 2Lys,Met,Phe,Ser。
由(1)得知该多肽为九肽。
由(2)得知,羧基端为Ala。
由(3)得出有如下肽段:
①Ala-Arg;②(Phe-Ser)-Lys;③Lys;④(Met-Ser)-Ala
由(4)中的②和(2)知:Ser紧邻Ala。
结合(3)中的④可知C端:……Met-Ser-Ala————⑤
由(5)中的②和噬热菌蛋白酶的专一性可知:
……Phe(Ala,Lys,Met, Ser)————⑥
由⑤、⑥和(5)中②可知……Phe-Lys-Lys- Met-Ser-Ala————⑦
结合⑦,由(3)中①和②可知:⑦片段的N端:Ala-Arg-Ser 因此,本题答案:Ala-Arg-Ser-Phe-Lys-Lys- Met-Ser-Ala
噬热菌蛋白酶的专一性:水解N端连接Phe、Leu、Ile、Trp、Tyr、Val、Met的肽键,形成带有游离氨基的肽段。
多肽种类的计算排列组合法
多肽种类的计算排列组合法
计算多肽的排列组合数涉及到计算不同氨基酸的排列组合情况。
在一个多肽中,氨基酸的种类和顺序可以多样化,因此需要使用排列组合法来计算不同氨基酸的排列组合数。
下面是一个简单的多肽种类的计算排列组合法示例:
假设有n个不同类型的氨基酸可供选择,要构造长度为m 的多肽。
那么可能的多肽排列组合数可以通过以下公式计算:排列: P = n^m
组合: C = (n+m-1)! / (m!(n-1)!)
其中P表示排列数,C表示组合数,n表示氨基酸的种类数,m表示多肽的长度。
排列数是指在确定长度的多肽中,每个位置都有n种选择的可能性。
对于每个位置的选择都有n个选项,因此通过乘以n的m次方得到排列数。
组合数是指在确定长度的多肽中,每个位置都可以选择不同的氨基酸,并且氨基酸的种类数是固定的。
所以可以使用组合数的公式来计算。
组合数的计算基于二项式系数的概念,通过使用组合公式进行计算。
需要注意的是,以上公式适用于假设所有氨基酸类型均不重复的情况。
如果存在氨基酸类型重复的情况,则需要根据实际情况对计算公式进行调整。
使用排列组合法来计算多肽的种类数可以帮助研究人员了
解多肽结构和序列的多样性,并对多肽的组成和功能进行分析。
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2.根据以下实验结果推断一多肽链的氨基酸序列:
(1)酸水解测出的氨基酸组成为:2Ala,Arg,2Lys,Met,Phe,2Ser。
(2)用羧肽酶水解最先得到氨基酸为Ala;
(3)胰蛋白酶水解得四个肽段,其氨基酸组成如下:①Ala,Arg;②Lys,Phe,Ser;③Lys;④Ala,Met,Ser。
(4)溴化氰水解得到两个肽段,其氨基酸组成如下:①Ala,Arg, 2Lys,2 Met,Phe,Ser;②Ala,Ser。
(5)嗜热菌蛋白酶水解得两个肽段,其氨基酸组成如下:①Ala,Arg, Ser;②Ala, 2Lys,Met,Phe,Ser。
由(1)得知该多肽为九肽。
由(2)得知,羧基端为Ala。
由(3)得出有如下肽段:
①Ala-Arg;②(Phe-Ser)-Lys;③Lys;④(Met-Ser)-Ala
由(4)中的②和(2)知:Ser紧邻Ala。
结合(3)中的④可知C端:……Met-Ser-Ala————⑤
由(5)中的②和噬热菌蛋白酶的专一性可知:
……Phe(Ala,Lys,Met, Ser)————⑥
由⑤、⑥和(5)中②可知……Phe-Lys-Lys- Met-Ser-Ala————⑦
结合⑦,由(3)中①和②可知:⑦片段的N端:Ala-Arg-Ser 因此,本题答案:Ala-Arg-Ser-Phe-Lys-Lys- Met-Ser-Ala
噬热菌蛋白酶的专一性:水解N端连接Phe、Leu、Ile、Trp、Tyr、Val、Met的肽键,形成带有游离氨基的肽段。