一般杂质检测法

一般杂质检测法USP
1定义：
一般杂质：存在于药品或药物中的组分，这些组分不包括有重大的、不良的生物活性的物质。

一般杂质可能来源于合成过程、制备过程或者降解产物。

2报告及标准
如果USP各论里没有特殊要求，检测出的一般杂质总和不得大于2.0%。

如果USP专论里对某些共存的、指定或降解杂质规定了限度，那么这些杂质都不属于一般杂质要评估的范畴，除非在USP各论里有特殊说明。

共存杂质定义为很多药品的物种特征，在药典里不定义为杂质。

例如，药品的共存物有几何结构、光学异构体、抗生素或者几种都有。

任何有重大的、不良的生物影响的有毒组分都不能称之为共存杂质。

3方法
如果USP各论里没有特殊要求，评估一般杂质的总量与数量采取相对法而不是更严格的与标准品比较的方法。

未指定的一般杂质同样符合这种类型。

一般杂质典型的评估方法为TLC法。

相关物质或色谱纯度的测试也被用来评估一般杂质。

其他方法（如高效液相色谱法、薄层色谱法等）也可适当的作为测试方法。

如在各论里没有特殊要求按照如下方法进行。

3.1测试溶液
溶剂：用各品种项下规定的溶剂。

浓度：精密称取样品适量，用溶剂溶解，配制成10mg/ml的溶液。

注意：在没有不利的影响的情况下，可以适当加热或超声使样品溶解。

3.2标准溶液
溶剂：用各品种项下规定的溶剂。

浓度：精密称取（工作）标准品适量，用溶剂溶解，分别配制成0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml的溶液。

注意：在没有不利的影响的情况下，可以适当加热或超声使样品溶解。

3.3操作
薄层板：涂层厚度0.25mm，填料为硅胶。

展开剂：按各品种项下要求。

点样量：20ul
将标准溶液、测试溶液分别点样20ul，点样后的薄层板在预先已平衡好的展开缸内展开，直至溶剂前沿展开至大约薄层板的3/4处。

从展开缸内取出薄层板，在空气中晾干，用可视化技术中规定的方法观察薄层板，观察测试溶液除了主斑点外的其他斑点，通过与标准溶液斑点比较来确定这些斑点的强度。

然后报告一般杂质的总和。

3.4可视化技术
3.4.1用紫外灯在254nm及366nm下观察。

3.4.2用碘铂酸盐溶液显色。

溶液A：称取850mg碘化铋，用40ml水和10ml冰醋酸溶解，混匀。

溶液B：用20ml水溶解8g碘化钾。

将溶液A和溶液B混合后作为储备液。

储备液溶液装在棕色瓶中可保存数月。

将10ml储备液与20ml冰醋酸混合，然后用水稀释至100ml，此溶液作为喷雾溶液，喷雾显色后直接观察。

3.4.3茚三酮显色：溶解200mg茚三酮与100ml无水乙醇中，喷雾后烘干薄层板。

3.4.4酸喷雾显色：在冰浴条件下，慢慢将10ml硫酸加入到90ml无水乙醇中。

喷雾显色后，加热直至焦化。

3.4.5酸-重铬酸盐显色：配制饱和的重铬酸钾-硫酸溶液100ml。

喷雾显色后，加热直至焦化。

3.4.6香草醛：溶解1g香草醛于100ml硫酸中。

3.4.7氯胺-三氯乙酸：10ml的3%氯胺水溶液与40ml的25%乙醇三氯乙酸溶液混合，临用新配。

3.4.8福林溶液：将10g钨酸钠与2.5g钼酸钠加入到70ml水中，加入5ml 85%的磷酸溶液和10ml 36%盐酸，回流此溶液10h。

3.4.9高锰酸钾：溶解100mg于100ml水中。

3.4.10 DAB：将1g对二甲氨基苯甲醛溶于100ml 0.6N盐酸溶液中。

3.4.11 DAC：将100mg对二甲氨基肉桂醛溶于100ml 1 N盐酸溶液中。

3.4.12铁氰化物：将1%氯化铁溶液与1%铁氰化钾溶液等体积混合。

临用新配。

3.4.13快蓝B：
试剂A：将500mg快蓝B溶解于100ml水中。

试剂B：0.1 N 氢氧化钠溶液。

先喷试剂A，然后再喷试剂B。

3.4.14碱性铁氰化物：用水稀释1.5ml 1%铁氰化钾溶液至20ml，加入10ml 15%氢氧化钠溶液。

3.4.15碘喷雾：0.5%碘-氯仿溶液。

将展开缸内放入碘，碘蒸气在展开缸内平衡好后，将薄层板暴露在碘蒸气下10min。

溶液A：溶解0.5g碘化钾于50ml水中。

溶液B：溶解0.5g可溶性淀粉于50ml热水中。

将溶液A和溶液B等体积混合，临用新配。

3.4.16 PTSS：溶解20g对甲苯磺酸于100ml乙醇中，喷雾后，在110℃下干燥15min，然后再紫外灯（366nm）下观察。

3.4.17邻联苯胺显色：溶解160mg邻联苯胺于30ml冰醋酸中，用水稀释至500ml，加入1g碘化钾，混合直至碘化钾溶解。

3.4.18将3ml氢氯铂酸溶液（10%）与97ml水混合，然后加入100ml碘化钾溶液（6%），此溶液作为喷雾溶液。

3.4.19碘-甲醇显色：将碘溶液与甲醇按等体积混合。