酵母培养物添加剂固态发酵的研究_刘大程

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[ 3] 王殿魁 , 罗新义 , 李红. 肇东苜蓿 [ J] . 牧草 与饲料 , 1989(2):41
提高百分率 /%
1
2. 09
127. 54
187. 17
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204. 83
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48. 4
表 5 酵母培养物中的微量元素含量 mg kg- 1
按配方 3的组成配制固态发酵底物 , 根据生产工 艺要求对水进行酸化处理 , 然后进行拌料 , 通过地暖 加热并进行堆积发酵 。在整个发酵过程中分别在 18 小时 、24小时 、42小时 、54小时 4个时间点测定发酵 物料温和酵母细胞数 , 结果见表 2。
表 2 不同发酵时间料温及酵母细胞数的变化
酿酒酵母 , 由伊利集团内蒙古牧泉元兴饲料有限
收稿日期 :2006 02 07 作者简介 :刘大程 (1968 ), 男 , 副教授 , 博士 .
责任公司化验室提供 。 1. 2 培养基
包括麦芽汁斜面培养基和麦芽汁液体培养基 。 1. 3 固态发酵培养基
以麸皮 、糖蜜 、蛋白粕 、葵粕 、啤酒糟 、玉米 、花生 糠等 15种成分为原料 , 以不同碳氮比配制 5 种发酵 用培养基 。 1. 4 试验方法 斜面菌种的活化 → 接种 1环至小 三角瓶中 → 35℃ 、120 r /m in 摇床培养 24 h→ 按 5%接种量接入大三角瓶中 , 在 35 ℃、120 r /m in摇床 培养 24 h, 菌种按一定接比例接种于固态发酵培养基 中 , 待分析测定 。 1. 5 测定方法
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an d V e te r in a ry M ed ic ine № 9 2006
低 ;特别是人类活动的干扰 (采掘 、过度放牧 、开荒 、 工业污染等 ), 使一些物种减少或近 于灭亡 。 因此 , 要近一步开展调查工作 , 对一些有开发利用价值的草 种采取保种措施 。 3. 2 开展以开发利用为目的的搜集
在黑龙江省泰来沙地现存的野生桑 , 具有较高的 养蚕 、治沙利用潜力 , 应加大培育和利用的研究 。 3. 3. 4 耐盐碱新品种的选育 在黑龙江省松嫩草原 的腹地 , 盐碱化草地有 26万 hm 2, 治理草原盐碱化已 成为治理退化草原 、改善草原生态环境和提高草原生 产力的重大课题 。 该草原上的星星草 、野大麦都具有 较强的耐盐碱性 , 是选育耐盐碱性牧草新品种的重要 材料 。 参考文献 :
现有的禾本科牧草除羊草外 , 存在着产量低 、品质差 或利用年限短的弊端 。 3. 3. 3 抗旱 、耐瘠薄新品种的选育 松嫩沙地分为 5个区 , 其中的杜蒙沙地 、泰来沙地 、齐齐哈尔沙地分 布在黑龙江 省西部 , 是黑 龙江省沙尘暴 的源头 。 目 前 , 该区种草治理沙地 , 缺少不同类型的抗旱 、耐瘠薄 和经济价值较高的牧草品种 。当地的野生扁穗冰草 、 引进的塔落岩黄芪都应做系统的选育工作 , 以提高其 生产性能 。
发酵时间 / 料温 / 酵母细胞数 /
酵母细胞数 /
h

(亿个 g - 1) 发酵时间 /h 料温 /℃ (亿个 g -1)
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酿酒酵母在发酵初始时生长较缓慢 , 以后生长速 度逐渐加快 。培养至 42 小时 , 发酵物酵母细胞数达 到最大值 , 为 25. 5亿个 /g, 此时 , 料温上升至 40 ℃。 继续培养至 54小时 , 料温不再上升 , 发酵物酵母细胞 数下降 , 这表明菌体开始自溶 , 而此时正是代谢产物 大量产生的时候 。在一定范围内 , 温度越高酵母菌的 繁殖越快 , 繁殖过程中产热的加速能使料温在短时间 迅速升高 , 这种情况不利于酵母菌的充分繁殖和代谢 产物的产生 。当温度较低时 , 整个发酵周期延长 , 生
酵母数的测定 , 采用血球计数板计数法 [ 1] ;氨基 酸和多肽的测定 , 用日立 835— 50型氨基酸分析仪 ;
《黑龙江畜牧兽医 》2006年第 9期
67
维生素 B1 、维生素 B2、维生素 E、硒等微量元素的测 定 , 用日立 850 型荧光分光光度计 ;烟酸的测定 , 用 DU— 7紫外可见分光光度计 。 2 结果与讨论 2. 1 不同碳氮比对固态发酵的影响
文献标识码 :B
文章编号 :1004 7034(2006)09 0066 03
近些年 , 酵母培养物已越来越受到国内外饲养业 的重视 , 许多国外产品 (如益康 XP 、 Yea Sall等 )已进 入我国 , 但价格十分昂 贵 , 约是我 国同类产品 的 10 倍 。近几年来 , 我国酵母饲料工业发展也十分迅速 。 如何提高酵母培养物的作用效果 , 并降低其生产 成 本 , 是目前亟需解决的问题 。研究利用酿酒酵母在自 行配制的培养基上进行固态发酵 , 通过对发酵工艺 、 特殊培养基的配制 、营养活性物质含量测定 、生产试 验等内容的研究 , 研制作用效果好 、价位低的酵母活 性物质 , 从而更好地为生产服务 。 1 材料与方法 1. 1 菌种
廖巧霞 1 , 邓国东2 , 毛乾慧 2 ,
(1. 广东省技术经济研究发展中心 , 广东 广州 510070; 2. 广东省兽药与饲料监察总所 , 广东 广州 510230)
中图分类号 :S859
文献标识码 :B
文章编号 :1004 7034(2006)09 0068 02
莱 克多巴胺 (Ractopam ine, 商品 名 P ay lean), 是 苯乙醇胺类 β -受体激动剂 , 用于猪只改善饲料利用 率和提高瘦肉率 。由美国 E lanco Anim al H ea lth公司 (礼来公 司的 分 公司 )开 发成 功 并被 美 国 FDA 于 2000年 7月份批准生产应用于养猪业 , 也是迄 今唯 一被 FDA 批 准 应 用于 食 品 动 物 提高 瘦 肉 率 的 药 物 [ 1] 。基于莱克多巴胺 与克仑特罗为 同类药物 , 其 在动物源性食品中如有高浓度的残留可能会对人体 健康产生危害 , 因而在我国目前仍属违禁药物 [ 2 - 3] 。
7. 14
18
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12. 5
在固态发酵中 , 通过试验确定最佳的营养物组成 对菌体生长及产物形成是至关重要的 。 由表 1可以 看出 , 在碳氮比为 3. 14、发酵 42 h的固态发酵物中的 酵母细胞数最高 , 为 26. 5 亿个 /g。 酵母培养物的生 产工艺包括两个过程 :在有氧条件下酵母菌主要进行 大量繁殖 ;在无氧条件时产生代谢产物 。 在配料中加 入多量的麸皮 、啤酒糟 、花生糠等底物 , 一方面能为酵 母菌繁殖提供充足的碳源 ;同时也可使固态发酵物具 有良好的通透性 , 为酵母菌繁殖提供充足的氧气 。 发 酵物中酵母细胞数越多 , 才能形成更多的代谢产物 , 因此 , 选用配方 3作为正式发酵用培养基 。 2. 2 最佳发酵时间点的确定
ELISA是莱克多巴胺残留筛选检测的主要方法 , 具有简单 、快速 、高通量的优点 。 但在检测过程中易 出现在饲料中用 ELISA 检测检出有莱克多巴胺, 而用液 相方法进行确认时没有检测出莱克多巴胺的问题 , 也就 是存在交叉反应问题 , 出现假阳性检验结果 。试验初步 探讨了氟苯尼考等兽药对莱克多巴胺 ELISA 检测的影 响。 1 材料与方法 1. 1 ELISA试剂盒
项目 维生素 B1 维生素 B2 烟酸 维生素 E

含量 2. 54
11. 59
478. 40
47. 9
1. 08
发酵 48小时与 42小时相比 , 产物中大多数氨基 酸含量都有不同程 度的提高 , 其氨基 酸总量增加了 19. 13%, 其中具有较高饲养价值的酪氨酸 、氨酸分别 增长了 79. 17%和 54. 64%, 而且第一限制性氨基酸 蛋氨酸的含量也有明显提高 。只有甘氨酸和缬氨酸 出现负增长 。 而据观测 , 到 54小时时发酵物中氨基 酸和多肽含量不再 增加 , 许多氨基酸 含量出现了下 降 , 并且发酵物中会出现轻微异味 。
缬氨酸 蛋氨酸
15. 13 5. 72
11. 30 6. 95
- 25. 31 21. 50
异亮氨酸 亮氨酸
6. 52 14. 84
8. 50 19. 62
30. 37 32. 21
酪氨酸
4. 85
7. 50
54. 64
苯丙氨酸
8. 73
12. 11
38. 72
赖氨酸
5. 48
7. 60
38. 69
组氨酸
4. 10
4. 79
16. 83
精氨酸
9. 84
16. 01
62. 70
脯氨酸 总和
8. 75 179. 94
12. 35 214. 37
41. 12 19. 13
表 4 不同配方培养基发酵前后多肽含量的变化
培养基 序号
发酵前多肽总 发酵 48 h多肽总 C ∶N 量 /(mg g - 1) 量 /(m g g - 1)
产成本也提高 。当发酵物中酵母细胞数不再增加时 , 适当延长发酵时间有利于活性物质的产生 。 可以用 不同时间发酵物中活性物质含量的测定值来确定发 酵终止时间 , 结果见表 3, 4, 5。
表 3 不同发酵时间发酵物中氨基酸含量的变化
氨基酸
天冬氨酸 苏氨酸
发酵 42小时 / 发酵 48 小时 /
(m g g -1 ) (mg g- 1 )
15. 50
17. 42
6. 44
8. 01
提高 百分率 /%
12. 39 24. 38
丝氨酸
7. 10
9. 59
பைடு நூலகம்35. 07
谷氨酸 甘氨酸
35. 42 20. 12
47. 20 9. 98
33. 26 - 50. 39
丙氨酸 胱氨酸
9. 72
12. 43
27. 88
1. 68
3. 01
79. 17
保护和搜集的目的是为生产服务 , 要开展以开发 利用为目的的搜集工作 , 一是要搜集还未被受到关注 的具有开发价值和培育价值的草种 , 如黑龙江省东部 的三叶草既可作为饲用草种 , 又可作为草坪用草种 。 二是搜集省外和国外的新材料 、新品种 , 通过试验和 示范在生产上直接利用 。 3. 3 牧草种质资源利用和新品种选育的主要目标 3. 3. 1 野生牧草的驯化及其特性研究 黑龙江省 缺少野生牧草的栽培驯化 、生物学特性 、农艺性状 、细 胞遗传学 、分子生物学等方面的研究 。应在野生牧草 搜集 、栽培驯化的基础上 , 同时开展其特征特性的研 究 , 将会加快其开发利用的步伐 。 3. 3. 2 高产 、优质 、抗寒新品种的选育 目前 , 黑龙 江省畜牧研究所培育的龙牧 801、803、806 号苜蓿和 肇东苜蓿 , 基本上解决了国外苜蓿在特殊气候条件下 不能越冬的问题 ;但还缺少高产优质的禾本科牧草 ,
用 15种原料以一定的比例配制成碳氮比分别为 2. 09, 2. 67, 3. 14, 4. 90, 7. 14的 5种固态发酵培养基 , 试验菌在 5种培养基上的生长情况见表 1。
表 1 不同碳氮比发酵物中的酵母细胞数 亿个 g - 1
碳氮比
发酵时间 /h
2. 09
2. 67
3. 14
4. 90
发酵底物经发酵后多肽含量提高了 66.0%。由 试 验数据可知 , 酵母发酵后产物中 B族维生素含量
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氟苯尼考等兽药对莱克多巴胺
ELISA 检测的影响
- 45.
(01 0)
酵母培养物添加剂固态发酵的研究
刘大程 1 , 宋丽华 2 , 程 艳 1 , 周振峰 2
(1. 内蒙古农业大学 动物科学与医学学院 , 内蒙古 呼和浩特 010018; 2. 伊利集团 内蒙古牧泉元兴饲料有限责任公司 , 内蒙古 呼和浩特 010070)
中图分类号 :S816.6
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