黄芩苷 提取及结构鉴定

薄层色谱法
吸附剂：硅胶 薄层层析板 薄层层析板， 吸附剂：硅胶G薄层层析板，厚O．25-O ． ．3mm 展开剂：乙酸乙酯—甲醇—甲酸—水(7：2 展开剂： ： ：0．5 ：0．5 v／v／v) ． ． ／ ／ 显色剂： ％氯化铁-乙醇溶液 显色剂：1％氯化铁 乙醇溶液 方法： 样品配成合适浓度的甲醇液， 方法： 样品配成合适浓度的甲醇液，用 点样毛细管点样， 点样毛细管点样，点2-3次，边点边用电吹风 次 吹干，保证点样斑点直径不大于2mm。层析 吹干，保证点样斑点直径不大于 。 缸用展层剂饱和20min后，将点样硅胶板置 缸用展层剂饱和 后 层析缸内，上行展开，展层完毕后， 层析缸内，上行展开，展层完毕后，从层析 缸中取出，电吹风吹干， 缸中取出，电吹风吹干，将硅胶板浸入显色 剂中浸板，取出即显色. 剂中浸板，取出即显色
目的及意义
目的：对黄芩苷提取分离实验的工艺路线进行进
意义：对黄芩苷提取分离实验的工艺路线进行改进， 提高实验成功率，缩短实验时间，改善实验教学效果. 黄芩苷为祖国医学中的一种传统药用植物，其主要作 用成分黄芩苷已得到了国内外医疗界的广泛认同和应 用，由此黄芩苷的提取工艺和测定方法也就随之变得 尤为重要，就目前较为主要的一些工艺方法的原理和 应用价值进行归纳和总结，以期从中得到某些有价值 的信息，对今后发展趋势有所启发。
黄芩苷的理化性质
黄芩苷为黄色结晶，熔点223℃。淡黄色 细针晶（甲醇），熔点223-225℃；易溶于N， N-二甲基甲酰胺，吡啶中，可溶于碳酸氢钠、 碳酸钠、氢氧化钠等碱性溶液中，但在碱液 中不稳定，渐变暗棕色，微溶于热冰醋酸， 难溶于甲酸、乙酸、丙酮，几乎不溶于水， 乙醚、 苯、氯仿等。
黄芩苷化学结构式
制药工程综合性设计实验
开题报告
题目：黄芩苷提取及结构鉴定 答辩人：……….. 专业：制药工程
黄芩苷综述 黄芩苷是由唇形科植物黄芩的干燥根中提 取的一种黄酮类化合物，其原植物主要产于 陕西，内蒙古等地，以山西产量最大，河北 承德产的质量最好。黄芩味苦， 性寒，归肺， 肝，胆，大肠，小肠经，功能清热燥湿，泻 火解毒，止血，安胎。黄芩苷是黄芩的主要 有效成分之一。是黄芩及其制剂的主要质量 控制指标成分，据药理学研究报道，黄芩苷 具有抗微生物，抗变态反应，降压和镇静， 利胆，保肝和解痉等作用。
黄芩苷的提取
1. 所需仪器与试剂： 所需仪器与试剂：
数显恒温水浴锅，北京科伟永兴仪器有限公司。LDZ5-2离心机，北京医用离心机厂。 60%乙醇 ，盐酸，氢氧化钠。黄芩苷的炮制品200g 。
2.实验步骤 实验步骤
称取黄芩苷粗粉200g，粉碎。溶媒采用60%乙醇（料液比1：10）在温度90度下的恒温 水浴中分别提取两次。第一次加入 10倍量的50%乙醇,提取 1 h, 然后过滤;第二次向残渣中 加入10倍量的60%乙醇,提取 0. 5 h,过滤后将滤液合并,在80度保温，用盐酸调节ph=1-2。保 温30min,室温静置24h，过滤，加水搅拌成混悬液，用碱调pH值至7～7．5，加乙醇搅拌、 过滤，再加酸调pH值至l～2，80℃保温30 min，沉淀用水洗，干燥，得黄芩苷粗品。然后 将粗品用乙酸乙酯回流（料夜比1：3，三次，每次30min）。将不溶物再加适量的甲醇， 回流至甲醇无色，回收甲醇，浓缩，放置析出结晶，过滤。得黄芩苷精品。
参考文献
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4.工艺流程图
黄芩苷的纯度检测
1. 薄层色谱法 吸附剂：硅胶G薄层层析板，厚O．25—O．3mm 吸附剂 展开剂：乙酸乙酯—甲醇—甲酸—水(7：2：0．5：0．5 v／v／v) 展开剂 显色剂：1％氯化铁—乙醇溶液 显色剂 方法： 样品配成合适浓度的甲醇液，用点样毛细管点样，点2-3 方法 次，边点边用电吹风吹干，保证点样斑点直径不大于2mm。层析 缸用展层剂饱和20min后，将点样硅胶板置层析缸内，上行展开， 展层完毕后，从层析缸中取出，电吹风吹干，将硅胶板浸入显色 剂中浸板，取出即显色。与标准图谱比较。 2熔点测定 熔点测定 黄芩苷熔点:223℃-225℃ . 黄芩苷熔点 ℃ ℃
进度计划
第一周 60% 90度下的恒 称取黄芩药材 200g，粉碎。溶媒采用60%乙醇在温度90度下的恒 ，粉碎。溶媒采用60 乙醇在温度90 温水浴中分别提取两次。 倍量的60 乙醇, 60% 温水浴中分别提取两次。 第一次加入 4 倍量的60% 乙醇, 提取 1 然后过滤;第二次向残渣中加入4倍量的60 乙醇, 60% h, 然后过滤; 第二次向残渣中加入4 倍量的 60% 乙醇, 提取 0. 5 h,过滤后将滤液合并 过滤后将滤液合并, 80度保温 用盐酸调节ph= 度保温， ph=1 h, 过滤后将滤液合并 , 在 80 度保温 ， 用盐酸调节 ph=1-2 。 保温 30min,室温静置24 min,室温静置24h 30min,室温静置24h。 过滤，加水搅拌成混悬液，用碱调 值至 值至7～ ． ，加乙醇搅拌、 过滤，加水搅拌成混悬液，用碱调pH值至 ～7．5，加乙醇搅拌、 过滤再加酸调pH值至 值至l～ ， ℃保温30 min，沉淀用水洗， 过滤再加酸调 值至 ～2，80℃保温 min，沉淀用水洗，5O 乙醇洗， 乙醇洗， ％乙醇洗，95 %乙醇洗，干燥，得黄芩苷粗品。 乙醇洗 干燥，得黄芩苷粗品。
第一周
第二周 第二周
薄层色谱鉴定和熔点测定检测纯度 紫外分光光度法鉴定
实验预算
黄芩粗粉200g 乙醇 乙醇2000ml 黄芩粗粉 盐酸100ml 氢氧化钠 50ml 盐酸 甲醇 200ml 冰乙酸 50 ml 乙酸乙酯50 甲醇20ml 乙酸乙酯 ml 甲醇 1％三氯化铁一乙醇溶液 20 ml液体石蜡 ％ 液体石蜡
黄芩苷的结构鉴定
黄芩化学成分中以黄酮类化合物为主，而本研究中黄芩 苷粗品的提取方法与一般黄芩的提取方法相似，只是多了 1～2步酸沉纯化步骤，因此其中的化学成分应该仍然是黄 酮类化合物为主，且黄芩的主要有效成分黄芩苷的含量应 该较高。对黄芩中黄酮类化学成分的分析方法很多，如薄 层色谱法(TLC)[15～17]、紫外吸收光谱法(UV)MR). 其中较权威、应用最多的是高效液相色谱法(HPLC)， 本研究成分分析将以HPLC法为主。
3.提取原理 提取原理
用回流法提取黄芩苷，用酸沉淀法纯化黄芩苷。 用回流法提取黄芩苷，用酸沉淀法纯化黄芩苷。 具有酸性， 黄芩苷具 有 一 定 的 脂 溶 性,具有酸性，可以在盐酸中沉淀出来，黄 芩 苷 具有酸性 可以在盐酸中沉淀出来， 几乎不溶于水,难溶于甲醇 乙醇,丙酮 乙醇极性相似。 为 淡 黄 色 针 晶.几乎不溶于水 难溶于甲醇 乙醇 丙酮，与60%乙醇极性相似。 几乎不溶于水 难溶于甲醇,乙醇 丙酮， 乙醇极性相似
黄芩苷主要成分为黄酮类，结构式如下：
黄芩苷药理作用
黄芩中的主要有效成分为黄酮类化合物，其中抗菌有效成分以 黄芩苷为主，有抑菌、清热、降压、镇静、利尿、抗炎抗变态反应、 解毒等作用。在实际生产中，黄芩的提取工艺一般采用水提酸沉法， 碱提酸沉法或乙醇直接提取法。黄芩性寒味苦，具有清热揭火，解 毒消肿的作用，临床应用于肺炎、肾炎、肝炎、慢性支气管炎、高 血压、急性痢疾、化脓性感染等，黄芩中含有的成分主要有黄酮类、 甾醇类、氨基酸和糖类，在黄酮类中又以黄芩苷(baiea．1in)、黄芩 苷元(bmeMein)、汉黄芩索(wogonin)和汉黄芩苷(wogonoside)等为黄 芩的特征化学成分，以黄芩苷的含量为最高。现代医学研究表明， 黄芩苷还具有降血压、降胆固醇水平、抗癌、治疗慢性肝炎、降低 转氨酶等作用。