微粒子酶免分析技术与酶联免疫吸附试验检测乙肝两对半的临床比较

微粒子酶免分析技术与酶联免疫吸附试验检测乙肝两对半的临床比较

发表时间：2016-12-23T13:55:31.897Z 来源：《航空军医》2016年第23期作者：刘军[导读] 探讨微粒子酶免分析技术（MEIA）与酶联免疫吸附（ELISA）试验在乙肝两对半检测中的差异。

安化县大福中心医院湖南安化 413517 【摘要】目的探讨微粒子酶免分析技术（MEIA）与酶联免疫吸附（ELISA）试验在乙肝两对半检测中的差异。方法选取我院2013年1月-2016年1月收治的疑似乙肝患者的临床资料，共入选85例，均采用微粒子酶免分析技术与酶联免疫吸附试验检测，对比分析两种检测方法的检测结果。结果 85例血清通过MEIA检出45例患者HBsAg为阳性，而ELISA检测方法则检出31例HBsAg阳性，两种检测方法的检

出率比较差异有统计学意义（x2=4.664，p<0.05）；本研究中选取采用ELISA方法检测乙肝两对半仅抗-HBe（+）、抗HBc（+）此2项阳性的30例患者、仅HBeAg（+）1项呈阳性的1例患者和仅HBeAg（+）、抗-HBc（+）2项呈阳性的1例患者，再采用MEIA检测法进行HBsAg测定，仅HBeAg（+）和仅HBeAg（+）、抗-HBc（+）检测阳性率均为100%。结论微粒子酶免分析技术操作简单、影响因素少、灵敏度高，且能够观察患者临床疗效和特殊乙肝两对半模式，有较高的临床应用价值。

【关键词】微粒子酶免分析技术；酶联免疫吸附试验；乙肝两对半

乙型肝炎是常见传染病、多发病，如病情得不到有效控制能进展为肝硬化、肝癌等，严重影响患者的身体健康。资料显示，乙肝的传染性和病死率问题一直是全球严重的社会公共卫生难题[1]。目前，临床上主要通过实验室检测血清病毒标志物来筛查患者是否感染乙型病毒，其中微粒子酶免分析技术（microparticle enzyme immunoassay，MEIA）与酶联免疫吸附检测试验是临床上常用的检测乙肝两对半的方法，本文对比分析了该两种方法应用于乙肝两对半检测的结果，现将结果报道如下。 1资料与方法 1.1一般资料选取我院2013年1月-2016年1月采集的85例疑似乙肝患者的血清标本，其HBsAg均呈阳性，均符合2000年中华医学会制定的相关病毒性肝炎诊断标准[2]，其中男45例，女40例，年龄18-68岁，平均（27.4±5.7）岁，症状表现：均伴有不同程度的恶心、乏力、腹胀、畏食、肝区疼痛等，严重者伴肝掌、蜘蛛痣、慢性肝病面容、脾大、肝功能持续异常等。

1.2 方法 1.

2.1入组标准肝脏检查结果为慢性肝炎；HBsAg阳性超过6个月；血清HBV-DNA＞10-5copies/ml；患者的谷丙转氨酶或谷草转氨酶呈间歇性或持续性升高状态。

1.2.2 仪器及试剂酶联免疫吸附试剂由上海科华生物技术有限公司提供，仪器采用美国Bio-Rad680全自动酶标仪；微粒子酶免分析采用美国雅培全自动微粒子酶免分析仪和HBsAg试剂盒，两种试验均严格按照说明书进行，结果判断标准严格按照说明书评定。

1.2.3 血清采集采集入选患者的清晨空腹静脉血2-3ml，采集后12h内进行血清分离，以3000rpm/min离心15min，取上层血浆，如能够在48h内进行检测，则可将血浆置于2-8℃的冷藏条件下保存，备用；如不能及时进行检测，则应将血浆置于-20℃保存，备用，尽快进行实验室检测。两种方法均对血清进行HBsAg、HbeAg、抗-HBs、抗-Hbe、抗-HBc检测。

1.2.4 检测方法和原理 ELISA检测HBsAg采用夹心法包被抗体-被测抗原-酶标记抗体复合物，然后催化出O2使得底物显色，以P/N≥2.1判定为阳性；MEIA检测法则是用HBsAg抗原与微粒子相应的抗体结合后形成抗体，然后分析物-复合物和酶联结合而成抗体-分析物-酶联复合物，然后加入荧光底物，使之与酶联发生反应，形成荧光产物，对荧光强度和标准浓度进行测量比较，计算分析物的浓度。以S/N≥2判定为HBsAg阳性。

1.3统计学处理试验结果数据均采用SPSS19.0处理分析，计量资料用（）表示，配对资料采用t检验；计数资料用%表示，数据间比较采用x2检验。P<0.05差异有统计学意义。 2结果

2.1 两种检测方法检测HBsAg结果比较 85例血清中通过MEIA检出45例患者HBsAg为阳性，而ELISA检测方法则检出31例HBsAg阳性，两种检测方法的检出率比较差异有统计学意义（x2=4.664，p<0.05），见表1；可见，MEIA检测方法对患者HBsAg标志物的灵敏度更高。

3讨论

资料显示，目前临床上主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）来检测血清乙肝两对半。此法灵敏度和特异度均较高，不过，此方法可作为定性测定，并不能准确判断乙肝两对半具体的含量，而且无法进行HBV感染动力学观察，此外，酶联免疫吸附试验操作繁琐、耗时长，且受不同血清标记物变化和实验室因素影响较大，如移液器、恒温水箱、酶标仪等的不同以及操作人员手法不一致等因素，均会影响该方法检测结果而出现假阴性或假阳性[3]。

微粒子酶免分析技术（MEIA）则不但具有灵敏度高、特异性强的特点，而且该方法能进行定量分析、对药物治疗疗效及患者病情的监测均有重要作用[4]。MEIA的微粒子直径仅仅为0.5um，其表面多空，这在一定程度上增加了反应面，对缩短反应时间、提高反应灵敏度有积极的意义。研究资料显示，微粒子由多空的高分子粒子构成，亲水性良好，且具有与水差不多的比重，具有极好的悬浮性[5]。同时，微粒子能够与玻璃纤维进行不可逆的结合，大大提高了反应的特异性。有研究结果显示，MEIA测定HBsAg的灵敏度高达0.1ng/ml，且检测结果不易受人为因素、实验室条件等因素影响[6]。本研究结果显示，MEIA检测85例患者血清后检出45例患者HBsAg呈阳性，而ELISA仅检出31例，同时，检测仅HBeAg（+）和仅HBeAg（+）、抗-HBc（+）阳性率均为100%。

综上所述，微粒子酶免分析技术操作简单、影响因素少、灵敏度高，且能够观察患者临床疗效和特殊乙肝两对半模式，有较高的临床应用价值。

参考文献：

[1]冯晶.酶联免疫吸附试验法检测的乙肝两对半结果分析[J].世界最新医学信息文摘，2015，15（24）：148-149.

[2]岳化葵.酶联免疫吸附法与定量聚合酶链反应对乙肝两对半测定的比较分析[J].临床和实验医学杂志，2012，11（2）：73.

[3]卢俊婉，卢玲玲.乙肝两对半两种检测方法比较分析[J].求医问药，2013，11（4）：161-162.

[4]王盈，付冬琴，邓世华.两种不同方法检测乙肝病毒血清标志物的临床比较研究[J].求医问药，2012，10（6）：710.

[5]高云.乙肝两对半检测使用酶联免疫加速仪与传统法及不同试剂的对比[J].安徽卫生职业技术学院学报，2011，01（2）：79-80.

[6]贺云方.定性酶标测定与定量检测对乙肝两对半结果的影响分析[J].医学信息（中旬刊），2011，06（22）：2283-2284.