色谱定性定量方法
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用相对校正因子
➢把混合物中的不同组份的峰面积校正成相当
于某一标准物质的峰面积，用于计算各组份的 含量
B
9
1.定量依据和校正因子
相对校正因子fis是指某组份i的绝对校正因子与标准物质s的绝对 校正因子之比值，通常简称为校正因子，即
➢标准物质：
f is
fi fs
苯（用于热导检测器）
正庚烷（用于氢火焰离子化检测器）
5
2.与其它方法结合定性
①与化学方法结合进行定性
➢将试样经过一些特殊试剂处理，发生物理变 化或化学反应后，其色谱峰将会提前、移 后或完全消失
➢比较处理前后色谱图的差异，以及在柱后用 化学试剂鉴定流出物，就可初步定性鉴别 试样中含有哪些官能团
B
6
2.与其它方法结合定性
②与红外光谱、质谱及核磁共振谱联合定性
法进行定性
B
4
1.利用色谱保留参数定性
③双柱法定性
➢将试样和标准物的混合物分别在两根极性相差较 大的色谱柱上进行色谱分离
观察标准物和未知物色谱峰在这两根柱子上是否 始终重合，如两色谱峰始终重合，可判断为同一 组份，否则不是同一组份。
➢可以避免不同组份由于保留值的偶然一致性，可 能发生的定性错误。
B
B
12
2.峰面积的测量
①准确测量法
➢用计算机测量 通常高级色谱仪配有计算机，能自动计算峰面积
➢用自动积分仪测量 它能自动测出曲线所包围的面积，测量精度达0.2～2％
上述两种方法分析速度快，线性范围广，对小峰或不规
则的峰也能得出较准确的测定结果
B
13
2.峰面积的测量
②近似测量法 ➢对称峰可用峰高乘半高峰宽法：
色谱定性定量方法
B
1
一、色谱定性方法
定性依据 ★主要依据是每个组份的保留值
★一般需要标准样品，离开已知纯物质的对 照，就无法识别各色谱峰代表何种组份
★对某一未知试样，单独用色谱法定性十分 困难，因此常需与化学分析及其它仪器分 析方法相结合
B
2
1.利用色谱保留参数定性
①保留值定性
➢在一定的固定相和恒定的操作条件（如柱温、流动相流速、固定 液VR含）量，、一柱般长不和受柱其径它等组）份下的，影每响种，物表质现都为有每一一定组的份保的留特值征（值tR或 因此可利用已知物的保留值和未知物的保留值对照进行定性
A1.06h5W h/2
在相对计算时可省略系数，狭窄峰还可将半高峰宽视为 常数以峰高计算
➢不对称峰可用峰高乘平均峰宽法：
A12h(W0.15W0.85)
平均峰宽是指在峰高0.15和0.85处分别测量的峰宽的平
均值
B
14
3.常用定量方法
①归一法
若试样中各组份都能流出色谱柱并在所用的检测器上都能产生信 号显示出色谱峰，则可测量所有组份色谱峰的峰面积，由下列公 式计算各组份的含量
➢质量校正因子、摩尔校正因子和体积校正因子
由于被测组份i所使用的计量单位不同，校正因子又可分为质量
校正因子fm、摩尔校正因子fn和体积校正因子fV
B
10
1.定量依据和校正因子
某组份i与其等量的标准物s的响应值之比值称为相对响 应值，用Sis表示，它与相对校正因子互为倒数，即
S is
1 f is
Sis或fis只与被测组份、标准物质以及检测器的类型有 关，不受操作条件、柱温、载气流速和固定液的性质
mi fiAi ms fsAs
mi f i Ai ms f s As
mi
fis
Aims As
i m m 试 i 样 10 % 0 fisA A sm im 试 s 样 10 % 0
i A 1f1A2A f2i fiAnfn10 % 0
Ai为任一组份的峰面积，fi为任一组份的质量校正因子
归一法的优点是无需标样，结果准确，操作简便，操作条件（如
进样量、流速等）变化对测定结果影响较小，宜于分析多组份试
样中各组份的含量。
B
பைடு நூலகம்
15
②内标法
用一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据 被测试样和内标物的质量比及相应的色谱峰面积之比，计算被 测组分的含量
➢联用方法是解决复杂未知物定性问题最有效的方法之一，
其中特别是色谱-质谱联用分析，是当今分离和鉴定未
知物最好的手段
B
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二、色谱定量方法
1.定量依据和校正因子
➢在一定的操作条件下，被测组份的质量mi与检测器产生的响应信 号（色谱图上表现为峰面积）Ai成正比，比例系数称为峰面积绝 对校正因子fi，即
mi=fiAi
➢利用绝对保留值定性时，要求严格控制色谱操作条件，否则重现 性较差
➢若些采操用作相条对件保差留异值所r带2,1作来定的性影分响析，它仅与柱温有关，则可消除某
➢常用标准物：苯、正丁烷、对二甲苯、环己烷、2,3,4-三甲基戊烷
➢对于组份比较简单的已知范围的混合物试样，可采用此法进行定 性。也可利用文献上的r2,1值或色B 谱手册中的r2,1值对照定性。3
这就是色谱定量分析的依据
➢绝对校正因子主要由仪器的灵敏度所决定，并与分析的操作条件
有密切关系
同一种检测器对不同物质具有不同的响应值，即使两种物质的含 量相等，在检测器上得到的信号Ai也往往是不相同的，而且它不 易准确测定，因此无法直接用于定量分析
B
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1.定量依据和校正因子
➢为使峰面积能正确反映出物质的量，必须采
1.利用色谱保留参数定性
②加入已知物增加峰高法
➢首先用被测试样作色谱图，然后将已知纯物质加到试 样中去，在相同的条件下作色谱图，对比这两个色谱 图
若后一色谱图中某一色谱峰相对增高时，则该色谱峰 的组份原则上与加入已知纯物质是同一种化合物
➢当试样组份比较复杂，峰间距离太近，或操作条件不
易控制稳定，很难准确地测定其保留值时，可采用此
等因素的影响，因而使用方便。
B
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1.定量依据和校正因子
相对校正因子的测定方法
★准确称量被测组份和标准组份（色谱纯试剂，纯 度应大于99％），混合均匀后，在色谱操作条件 下进行分析。从色谱图上分别测量出相应的峰面 积，从而计算出质量校正因子。
★常用化合物的校正因子也可以查阅“色谱手册” 及有关参考文献。
➢色谱仪与红外光谱或质谱仪等联用，实际上是红外光谱 仪和质谱仪等起着检测器的作用，将复杂组份的混合物 经色谱柱分离为单组份，再利用红外光谱、质谱或核磁 共振谱等进行定性分析
➢既充分利用红外光谱、质谱等适于分析分子结构、官能 团或物质的摩尔质量等特点，克服了它们不易检定复杂 物质的困难，又充分利用了色谱的高效分离能力
➢把混合物中的不同组份的峰面积校正成相当
于某一标准物质的峰面积，用于计算各组份的 含量
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1.定量依据和校正因子
相对校正因子fis是指某组份i的绝对校正因子与标准物质s的绝对 校正因子之比值，通常简称为校正因子，即
➢标准物质：
f is
fi fs
苯（用于热导检测器）
正庚烷（用于氢火焰离子化检测器）
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2.与其它方法结合定性
①与化学方法结合进行定性
➢将试样经过一些特殊试剂处理，发生物理变 化或化学反应后，其色谱峰将会提前、移 后或完全消失
➢比较处理前后色谱图的差异，以及在柱后用 化学试剂鉴定流出物，就可初步定性鉴别 试样中含有哪些官能团
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2.与其它方法结合定性
②与红外光谱、质谱及核磁共振谱联合定性
法进行定性
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1.利用色谱保留参数定性
③双柱法定性
➢将试样和标准物的混合物分别在两根极性相差较 大的色谱柱上进行色谱分离
观察标准物和未知物色谱峰在这两根柱子上是否 始终重合，如两色谱峰始终重合，可判断为同一 组份，否则不是同一组份。
➢可以避免不同组份由于保留值的偶然一致性，可 能发生的定性错误。
B
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2.峰面积的测量
①准确测量法
➢用计算机测量 通常高级色谱仪配有计算机，能自动计算峰面积
➢用自动积分仪测量 它能自动测出曲线所包围的面积，测量精度达0.2～2％
上述两种方法分析速度快，线性范围广，对小峰或不规
则的峰也能得出较准确的测定结果
B
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2.峰面积的测量
②近似测量法 ➢对称峰可用峰高乘半高峰宽法：
色谱定性定量方法
B
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一、色谱定性方法
定性依据 ★主要依据是每个组份的保留值
★一般需要标准样品，离开已知纯物质的对 照，就无法识别各色谱峰代表何种组份
★对某一未知试样，单独用色谱法定性十分 困难，因此常需与化学分析及其它仪器分 析方法相结合
B
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1.利用色谱保留参数定性
①保留值定性
➢在一定的固定相和恒定的操作条件（如柱温、流动相流速、固定 液VR含）量，、一柱般长不和受柱其径它等组）份下的，影每响种，物表质现都为有每一一定组的份保的留特值征（值tR或 因此可利用已知物的保留值和未知物的保留值对照进行定性
A1.06h5W h/2
在相对计算时可省略系数，狭窄峰还可将半高峰宽视为 常数以峰高计算
➢不对称峰可用峰高乘平均峰宽法：
A12h(W0.15W0.85)
平均峰宽是指在峰高0.15和0.85处分别测量的峰宽的平
均值
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3.常用定量方法
①归一法
若试样中各组份都能流出色谱柱并在所用的检测器上都能产生信 号显示出色谱峰，则可测量所有组份色谱峰的峰面积，由下列公 式计算各组份的含量
➢质量校正因子、摩尔校正因子和体积校正因子
由于被测组份i所使用的计量单位不同，校正因子又可分为质量
校正因子fm、摩尔校正因子fn和体积校正因子fV
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1.定量依据和校正因子
某组份i与其等量的标准物s的响应值之比值称为相对响 应值，用Sis表示，它与相对校正因子互为倒数，即
S is
1 f is
Sis或fis只与被测组份、标准物质以及检测器的类型有 关，不受操作条件、柱温、载气流速和固定液的性质
mi fiAi ms fsAs
mi f i Ai ms f s As
mi
fis
Aims As
i m m 试 i 样 10 % 0 fisA A sm im 试 s 样 10 % 0
i A 1f1A2A f2i fiAnfn10 % 0
Ai为任一组份的峰面积，fi为任一组份的质量校正因子
归一法的优点是无需标样，结果准确，操作简便，操作条件（如
进样量、流速等）变化对测定结果影响较小，宜于分析多组份试
样中各组份的含量。
B
பைடு நூலகம்
15
②内标法
用一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据 被测试样和内标物的质量比及相应的色谱峰面积之比，计算被 测组分的含量
➢联用方法是解决复杂未知物定性问题最有效的方法之一，
其中特别是色谱-质谱联用分析，是当今分离和鉴定未
知物最好的手段
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二、色谱定量方法
1.定量依据和校正因子
➢在一定的操作条件下，被测组份的质量mi与检测器产生的响应信 号（色谱图上表现为峰面积）Ai成正比，比例系数称为峰面积绝 对校正因子fi，即
mi=fiAi
➢利用绝对保留值定性时，要求严格控制色谱操作条件，否则重现 性较差
➢若些采操用作相条对件保差留异值所r带2,1作来定的性影分响析，它仅与柱温有关，则可消除某
➢常用标准物：苯、正丁烷、对二甲苯、环己烷、2,3,4-三甲基戊烷
➢对于组份比较简单的已知范围的混合物试样，可采用此法进行定 性。也可利用文献上的r2,1值或色B 谱手册中的r2,1值对照定性。3
这就是色谱定量分析的依据
➢绝对校正因子主要由仪器的灵敏度所决定，并与分析的操作条件
有密切关系
同一种检测器对不同物质具有不同的响应值，即使两种物质的含 量相等，在检测器上得到的信号Ai也往往是不相同的，而且它不 易准确测定，因此无法直接用于定量分析
B
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1.定量依据和校正因子
➢为使峰面积能正确反映出物质的量，必须采
1.利用色谱保留参数定性
②加入已知物增加峰高法
➢首先用被测试样作色谱图，然后将已知纯物质加到试 样中去，在相同的条件下作色谱图，对比这两个色谱 图
若后一色谱图中某一色谱峰相对增高时，则该色谱峰 的组份原则上与加入已知纯物质是同一种化合物
➢当试样组份比较复杂，峰间距离太近，或操作条件不
易控制稳定，很难准确地测定其保留值时，可采用此
等因素的影响，因而使用方便。
B
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1.定量依据和校正因子
相对校正因子的测定方法
★准确称量被测组份和标准组份（色谱纯试剂，纯 度应大于99％），混合均匀后，在色谱操作条件 下进行分析。从色谱图上分别测量出相应的峰面 积，从而计算出质量校正因子。
★常用化合物的校正因子也可以查阅“色谱手册” 及有关参考文献。
➢色谱仪与红外光谱或质谱仪等联用，实际上是红外光谱 仪和质谱仪等起着检测器的作用，将复杂组份的混合物 经色谱柱分离为单组份，再利用红外光谱、质谱或核磁 共振谱等进行定性分析
➢既充分利用红外光谱、质谱等适于分析分子结构、官能 团或物质的摩尔质量等特点，克服了它们不易检定复杂 物质的困难，又充分利用了色谱的高效分离能力