人参茎叶总皂苷的提取方法研究

第1卷第1期2017年3月
现代牧业
MODERN ANIMAL HUSBANDRY
Vol.1No.1
Mar.2017人参茎叶总皂苷的提取方法研究
宋幸辉，郑宝亮，王长林，王秀君，刘永录，马霞，卞陆杰
(河南牧业经济学院，河南郑州450046)
摘要：以人参皂香Rg1与人参皂香R e的总量及人参茎叶总皂香的含量为依据，筛选人参茎叶提取物的最佳提取方法。

方法：采取水煎及水煎液不同浓度乙醇（30%、60%、80% )分别提取人参茎叶中总皂香，并进行喷雾干燥,统计各提取物得率，采用高效液相法检测人参皂香R g1与R e的总量，采用紫外分光光度法检测人参总皂香含量。

结果显示，以水煎液乙醇终浓度为60%醇沉时所得提取物得率较高，且其中人参皂香Rg1与人参皂香R e的总量和人参总皂香含量相对较高，综合评价最终确定人参茎叶的提取方法为水煎、60%乙醇醇沉。

关键词：人参茎叶；总皂香;提取方法;得率；含量测定
中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号:2096 -2975(2017)01 -0030 -03
Research on Extraction M ethod of Total Saponins from Ginseng Stem and Leaf
Song Xinghui,Zheng Baoliang,Wang Changlin,Wang Xiujun,Liu Yonglu,Ma Xia,Bian Lujie (Henan University of Animal Husbandry and Economy , Zhengzhou , Henan 450046 , China) Abstract ：Objective to explore the optimum extraction method of ginseng stem leaf taking the amount of ginsenoside Rg1 , Re and Ginseng stem and leaf saponin (GSLS) as evaluating indicators. Methods GSLS was extracted by water decoction and al­cohol sedimentation with different concentrations ethanol (30% , 60% , 80% ). Then recoding the extraction ratios after spray drying. The amounts of ginsenoside Rgland Re were tested by HLPC method , and the total ginseng saponin was determined by UV - spectrophotometry. The result shows that the highest extraction ratio was determined with an ethanol concentration of 60% in alcohol sedimentation. And the amounts of ginsenoside Rgland Re were relatively high. Therefore , the optimum ex­traction method of ginseng stem leaf was taking alcohol sedimentation with 60% concentration ethanol.
Key words ：ginseng stem and l a , total saponin , extraction method , yield , determination
人参叶（Ginseng Folium)是五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的干燥叶，性味苦、甘，
寒，归肺、胃经，具有祛暑、补气、益肺、生津之功能。

主要用于治疗暑热烦躁、津伤口渴、咳嗽气虚、四肢 倦乏、头目不清等[1]。

国内外学者对人参茎叶化学、药理学等方面的研究[2]，已初步证明人参茎叶 皂苷成分与人参皂苷成分两者相似，其含量明显比 人参高，且人参茎叶成本比人参低的多，因此，人参 茎叶活性成分的提取备受关注[3]。

目前人参茎叶 皂苷的提取方法主要采用加热回流方法进行萃取，而《中国药典》4]中的提取方法需过大孔吸附树脂柱纯化，制约其在临床中的大量生产和使用。

本研究分别采取水煎及水煎不同浓度乙醇(30%、60%、80%)醇沉的方法提取人参茎叶中总
皂苷，并进行喷雾干燥，比较干燥物得率，检测人参 皂苷Rg1与R e的含量及人参茎叶总皂苷的含量，为工业化提取人参茎叶皂苷提供新方法，为今后的 开发利用提供参考。

1材料与方法
1.1试剂与药材
医用酒精、分析甲醇，由天津市富宇精细化工有
收稿日期：2016-12-23
作者简介：宋幸辉（1983 -),女，汉族，河南伊川人，助教,硕士。

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限公司生产;色谱级乙腈，由天津四友精细化学品有 限公司生产;人参茎叶购自禹州市凯旋药业有限公
司，人参皂苷R gl与Re标准品购自中国食品药品 检定研究所。

1.2仪器
BG-50A电子称；GZX-9030 MBE电热恒温鼓风干燥箱，上海博讯实业有限公司医疗设备厂;电
子分析天平，岛津国际贸易有限公司；22型可见分 光光度计，上海分析仪器总厂;SHZ—D(III)型旋转 蒸发仪由巩义市瑞德仪器设备有限公司；喷雾干燥
机((T8000Y)，杭州聚同电子有限公司；高效液相色 谱仪（型号为P230 n型）大连依利特分析仪器有限 公司。

1.3人参茎叶的提取处理
取人参茎叶3000 g加45L水浸泡1h，煎煮两 次，每次2 h，过滤，合并滤液浓缩至3000 ml。

处理一:取500 mL浓缩液直接喷雾干燥得样品 1，称重，计算得率；
处理二:取550 mL浓缩液加乙醇至醇浓度为 30%，静置过夜，抽滤，滤液喷雾干燥得样品2,称 重，计算得率；
处理三:取500 mL浓缩液加乙醇至醇浓度为 60%，静置过夜，抽滤，滤液喷雾干燥得样品3,称 重，计算得率；
处理四：取500 mL浓缩液加乙醇至醇浓度为 80%，静置过夜，抽滤，滤液喷雾干燥得样品4,称 重，计算得率。

得率=干燥物重量（g)/药液体积（ml) x100%。

1.4人参皂苷的含量测定
1.4.1高效液相色谱法[2]测定人参皂苷Rg1与Re含量。

色谱条件与系统适用性试验以乙腈-0.05%磷酸溶液(20 : 80)为流动相，柱温30 °C，检测波长 为203 nm。

理论板数按R e峰计算均应不低于1500。

对照品溶液的制备取对照品人参皂苷Rg1与 Re适量，加入甲醇后，分别制成每1mL含人参皂苷
Rg1 0.25 mg、含 Re0.5 mg 的溶液。

供试品溶液的制备取上述配制样品20 m g经 过精密称定后，置于10 mL量瓶中，加入甲醇后超声 溶解，并稀释至刻度，滤过后，取滤液即得。

测定法取配制的供试品溶液和标准品溶液各 10 ^L，进注高效液相色谱仪，测定。

1.4.2紫外分光光度法[2]测定人参茎叶总皂苷的含量。

对照品的制备取对照品人参皂苷Re适量，经 过精密称定，加甲醇后，分别制成每1mL含人参皂 苷Re 1mg的溶液。

标准曲线制备精密吸取配制的对照品溶液20、40、80、120、160和200 ^L分别置具塞试管中，在低 温条件下挥去溶剂，加入1%香草醛高氯酸试液0. 5 mL，置于恒温60C水浴上充分混匀后加热15 min，立即用冰水冷却2 min后，加入77%硫酸5 mL，摇 匀，在540 nm波长处测吸光度值，以相应试剂作为 空白，以浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，测得标 准曲线 y=0.0102x+0.0609，R2 =0.9961。

样品含量测定取样品50 mg于25 mL容量瓶 中，加入甲醇溶解后并定容，吸取样品液50 ^L按上 述步骤操作，测吸光度值，以标准曲线计算皂苷含量。

2 结果
2.1不同提取方法人参茎叶提取物的得率
表1结果可见，未进行醇沉样品1所得提取物 的得率最高为26.2%，样品2次之为24. 3%，样品4 最低为9. 3%。

随提取时乙醇浓度的升高，每kg提 取物的成本也相应提高。

表1不同提取方法人参茎叶提取物得率及成本核算
样品编号得率（％/成本核算（元/
kg)样品126.2250
样品224.3320
样品319.7450
样品49.3900
2.2不同提取方法样品中人参皂苷的含量
表2结果可见，随提取时乙醇浓度的升高，样品 1 -4中的人参皂苷Rg1与Re含量及人参茎叶总皂 苷的含量逐渐升高，即样品4中人参皂苷Rg1与Re 含量及人参茎叶总皂苷的含量最高。

表2不同提取方法样品中人参皂苷的含量（％)样品编号Rg1与Re含量人参茎叶总皂苷
样品 1 6.0118.37
样品 27.1925.86
样品 319.6658.54
样品 421.6559.18
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3讨论与结论
人参茎叶中含有丰富的人参皂苷等活性物质，并具有很高的保健和药用价值，成本相对较低。

大 量的研究证明，人参茎叶中的人参皂苷具有调节中 枢神经系统、抗疲劳、调节机体免疫力、延缓衰老等 作用[5]。

在国内外研究中，人参皂苷的提取研究较 多并且成熟，人参茎叶中的人参皂苷的提取研究相 对较少。

但是对于人参茎叶中人参皂苷的提取、分 离纯化及其药理作用的研究在当前多个领域的发展 中占据重要的地位，比如医药行业、保健、食品等，也 为人参茎叶进一步研究与开发奠定了基础。

因此，从人参茎叶中提取人参皂苷具有重要意义。

目前提取人参皂苷的方法有很多种，溶剂大多 是不同浓度的乙醇。

于杰等[6]在人参茎叶总皂苷 提取精制工艺研究中，通过试验表明，人参总皂苷在 用乙醇提取时，乙醇对叶绿素的溶解性较大，不易去 除，影响提取物的质量。

本试验采用水煎醇沉的方 法提取人参茎叶总皂苷，克服了上述缺点。

从本试验结果发现，随着提取时乙醇浓度的升 高，提取物得率降低，成本升高，而各提取物中人参 皂苷Rgl与Re含量及人参茎叶总皂苷的含量也相 应升高。

但在乙醇终浓度为60%时制备样品3得 率比80%时样品4的得率高l倍，而二者人参皂苷R gl与Re含量及人参茎叶总皂苷的含量差别较小。

综合考虑人参皂苷Rgl与Re及人参茎叶总皂苷的含量以及提取物得率，结合实际生产需要，故将人参
茎叶提取物的制备工艺确定为水煎并在乙醇终浓度为60%时醇沉。

对其制备的人参茎叶提取物的活性比较拟在后期试验中研究。

参考文献：
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）2010年版
[M].北京：中国医药科技出版社，2〇10. 9.
[2]辛海量，盛佳钰，葛凌弦，等.人参叶提取物的制备工艺
研究[].医药导报，2011, 30(1) :79 -82.
[3 ] Hyun Jung Lee, Hyun - Sun Lee, Hye Jin Cho, et al. Uti­
lization of hydrolytic enzymes for the extraction of ginsen- osides from Korean ginseng leaves [ J ]. Process Biochemis­try. 2012, 47：538 -543.
[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）2010年版
[M].北京：中国医药科技出版社，2010. 365 -366. [5 ]刘海霞，刘洋，郑文成.人参茎叶中人参皂苷的提取、分
离纯化及其药理作用的研究进展[].吉林化工学院学报，2014,31(5) :4 -8.
[6]于杰，白志川，付超美.人参茎叶总皂甙提取精制工艺研
究[J].西南农业大学学报：自然科学版，2004 ,6 (4): 479 -482.
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