反义RNA技术原理及其应用
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端粒酶
端粒
肿瘤细胞中端粒被不断复制，长度增长， 肿瘤细胞中获得不死性。
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端粒延伸模型（动画演示）
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反义RNA作用于端粒酶机制
反义RNA
端粒酶
hTR，端粒复制模板
反义RNA封闭端粒酶的hTR，抑制端粒酶活性，使永生化细胞变为正常 细胞，有凋亡周期
端粒酶一种细胞RNA 依赖的DNA聚合酶，其功 能是维持真核细胞染色体末端端粒的长度。
蛋白催化亚基 (hTERT) 端粒酶主要组成 具有逆转录酶活性
RNA组分(hTR)
端粒复制所必须的模板，向染色体Βιβλιοθήκη Baidu端 添加TTAGGG序列
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反义RNA作用于端粒酶机制
端粒、端粒酶与肿瘤的关系 端粒的长度决定细胞寿命，胚胎早期端粒酶的活 性随着胚胎的发育而逐渐消失 ，正常的组织细胞 端粒酶活性被抑制。 肿瘤细胞中端粒酶活性高
DNA复制水平
转录及转录后 水平
翻译水平
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ＤＮＡ复制水平
反义ＲＮＡ作为ＤＮＡ复制的抑制因子，与引物 ＲＮＡ结合或作用于引物前体而抑制ＤＮＡ复制
引物ＲＮＡ
正常ＤＮＡ 复制 反义ＲＮＡ
×
ＤＮＡ复制 被抑制
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转录及转录后水平
作用于靶m R N A 的5’端, 阻止帽子结构的形 成, 影响靶m R N A 的成熟 作用于Pol y A 形成位点, 阻止靶m R N A 的 成熟及向胞浆内转运 作用于外显子和内含子的连接区, 阻止m R N A 前体的剪接
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反义RNA技术原理及 其应用
小组成员：
Context
反义RNA定 义 反义RNA原 理
反义RNA应 用实例
反义RNA技 术展望
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反义RNA定义
反义RNA
是指与mRNA互补的RNA分子， 也包括与其它RNA互补的RNA分子
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反义RNA的作用原理
反义RNA 技术可以设计出针对肿瘤细胞的癌基因、 突变基因、非正常表达基因及某些肿瘤相关病毒的癌基因 反义RNA,以阻断这些有害基因的表达,达到治疗肿瘤的目 的。
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参考文献
1.许风娣, 金志军. 肿瘤的反义核酸治疗.国外医学生理.病理科学 与临床分册, 199 5 ; 15 (3 ): 14 9 一15 1 2.马进财，刘吉勇，刘绍玲，等． 逆转录病毒载体介导的端粒酶 抑制基因促进肝癌细胞凋亡［J］． 世界华人消化杂志， 2006， 14( 10) : 989-992． 3. 周峻，金岩，何勇，等． 端粒酶抑制剂对舌癌细胞株端粒酶 活性和细胞周期的作用［J］． 中国癌症杂志，2002， 12( 2) : 110-112． 4. Kim N W． Advances in quantification and characterization of telomerase activity by the telomeric repeat amplification protocol ( TRAP) ［J］． Nucleic Acids Res，1997，25( 3) : 25952597．
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转录及转录后水平
× ×
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翻译水平
Antisense RNA
反义RNA可直接 与mRNA的SD序 列(含RBS)或编 码区(主要是AUG) 结合,从空间上直 接阻止核糖体的正 常结合或可直接降 解靶mRNA。
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反义RNA的应用（只具体举一个靶点）
反 义 作 用 于 端 粒 酶
端粒酶反义RNA对人喉癌细胞 Hep-2生长的影响
端粒酶反义RNA对人髓性细胞 系HL-60的作用 反义端粒酶RNA对SMMC7721 肝癌细胞系的作用 反义人端粒酶RNA亚基对胆囊癌 端粒酶活性及细胞生长的抑制作用
RNA
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反义RNA作用于端粒酶机制
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展望
反义RNA的抗病毒
病毒是对人和动植物危害极大的病原体,然而对病毒 引起的疾病的治疗,目前尚无特效药物与方法。反义RNA 却能特异性阻断病毒基因表达和抑制病毒的复制,从而激 起许多科学工作者去探索反义RNA 治疗病毒性疾病的有 效方法。
反义RNA 的抗肿瘤作用
端粒
肿瘤细胞中端粒被不断复制，长度增长， 肿瘤细胞中获得不死性。
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反义RNA作用于端粒酶机制
反义RNA
端粒酶
hTR，端粒复制模板
反义RNA封闭端粒酶的hTR，抑制端粒酶活性，使永生化细胞变为正常 细胞，有凋亡周期
端粒酶一种细胞RNA 依赖的DNA聚合酶，其功 能是维持真核细胞染色体末端端粒的长度。
蛋白催化亚基 (hTERT) 端粒酶主要组成 具有逆转录酶活性
RNA组分(hTR)
端粒复制所必须的模板，向染色体Βιβλιοθήκη Baidu端 添加TTAGGG序列
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反义RNA作用于端粒酶机制
端粒、端粒酶与肿瘤的关系 端粒的长度决定细胞寿命，胚胎早期端粒酶的活 性随着胚胎的发育而逐渐消失 ，正常的组织细胞 端粒酶活性被抑制。 肿瘤细胞中端粒酶活性高
DNA复制水平
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ＤＮＡ复制水平
反义ＲＮＡ作为ＤＮＡ复制的抑制因子，与引物 ＲＮＡ结合或作用于引物前体而抑制ＤＮＡ复制
引物ＲＮＡ
正常ＤＮＡ 复制 反义ＲＮＡ
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ＤＮＡ复制 被抑制
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作用于靶m R N A 的5’端, 阻止帽子结构的形 成, 影响靶m R N A 的成熟 作用于Pol y A 形成位点, 阻止靶m R N A 的 成熟及向胞浆内转运 作用于外显子和内含子的连接区, 阻止m R N A 前体的剪接
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反义RNA定 义 反义RNA原 理
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反义RNA
是指与mRNA互补的RNA分子， 也包括与其它RNA互补的RNA分子
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反义RNA的作用原理
反义RNA 技术可以设计出针对肿瘤细胞的癌基因、 突变基因、非正常表达基因及某些肿瘤相关病毒的癌基因 反义RNA,以阻断这些有害基因的表达,达到治疗肿瘤的目 的。
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参考文献
1.许风娣, 金志军. 肿瘤的反义核酸治疗.国外医学生理.病理科学 与临床分册, 199 5 ; 15 (3 ): 14 9 一15 1 2.马进财，刘吉勇，刘绍玲，等． 逆转录病毒载体介导的端粒酶 抑制基因促进肝癌细胞凋亡［J］． 世界华人消化杂志， 2006， 14( 10) : 989-992． 3. 周峻，金岩，何勇，等． 端粒酶抑制剂对舌癌细胞株端粒酶 活性和细胞周期的作用［J］． 中国癌症杂志，2002， 12( 2) : 110-112． 4. Kim N W． Advances in quantification and characterization of telomerase activity by the telomeric repeat amplification protocol ( TRAP) ［J］． Nucleic Acids Res，1997，25( 3) : 25952597．
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反义RNA可直接 与mRNA的SD序 列(含RBS)或编 码区(主要是AUG) 结合,从空间上直 接阻止核糖体的正 常结合或可直接降 解靶mRNA。
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反义RNA的应用（只具体举一个靶点）
反 义 作 用 于 端 粒 酶
端粒酶反义RNA对人喉癌细胞 Hep-2生长的影响
端粒酶反义RNA对人髓性细胞 系HL-60的作用 反义端粒酶RNA对SMMC7721 肝癌细胞系的作用 反义人端粒酶RNA亚基对胆囊癌 端粒酶活性及细胞生长的抑制作用
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展望
反义RNA的抗病毒
病毒是对人和动植物危害极大的病原体,然而对病毒 引起的疾病的治疗,目前尚无特效药物与方法。反义RNA 却能特异性阻断病毒基因表达和抑制病毒的复制,从而激 起许多科学工作者去探索反义RNA 治疗病毒性疾病的有 效方法。
反义RNA 的抗肿瘤作用