b达唑中有机溶剂残留量测定方法学验证

三氯苯达唑中有机溶剂残留量测定方法学验证
韩加怡，郑国钢 （ 浙江省药品检验所，浙江 杭州 ) -($$$. ） 摘要) 目的：用气相色谱法测定三氯苯达唑中有机溶剂残留量。方法： 采用高效毛细管色谱柱 9::;<=> （ -$+ ? $# -/++ ? $# /0 !+） ， 检测器为 @9A， 应用程序升温， 直接进样法检测。结果： 两个测定系统中乙醇、 AB@、 乙酸与所用内标、 溶剂互不干扰， 分离度及检出灵敏度均达到要求， 三成分的最小检出浓度分别为 /# $- !, 1 +7、 /# /( !, 1 +7 与 -# ’0 !, 1 +7。结论： 本方法能准确控制样品中残留溶剂， 控制产品的质量。 关键词) 气相色谱法； 三氯苯达唑； 残留量 中图分类号： C!(’) ) ) 文献标识码： =) ) ) 文章编号： ($$* 2 $((( （ /$$- ） $* 2 $-00 2 $-
药学实践杂志 /$$- 年第 /( 卷第 * 期
-00
为 !"# !$%（ !"# & $# "’% ） 。结果见表 ( 。 表 () 加样回收试验结果 （ $ & *）
编号 ( / . 0 * 样品中阿魏酸的含量 （ +,） $# --$. $# --/( $# --$! $# ---$# --!* $# -/"" 加入阿魏酸对照品的量 （ +,） $# --./ $# --./ $# --./ $# --./ $# --./ $# --./ 实测量 （ +,） $# **($ $# **$. $# **(" $# **.’ $# *’." $# *00* 回收率 （% ） !"# !/ !"# /!!# $( !!# (* ($$# -$ !’# !! !"# !$ $# "’ 平均值 （% ） !"# （% ）
批号
对照溶液配制： 取对照品贮备液 8A 2?+， 样品溶液配制" 取 25552424 批 号
置 522?+ 量瓶中， 用 "#$ 稀释至刻度， 即得。 6A 222)， 置 82?+ 量 瓶 中， 用 "#$ 稀 释 至 刻 度， 即
#$ !$ !" 色谱柱程序升温方法 82C ， /?*- $ 7?*$ $ $#502C ， #$ !$ # " 溶液配制 #$ !$ #$ ! " 内标溶液配制 " 精密称取正己烷 2A 822)， 用 "#$ 稀释至 522A 2?+ （ 内标贮备液） ， 取 5A 2?+ 内标贮备液， 用 "#$ 稀释至 522A 2?+， 作为 内标溶液。 #$ !$ #$ # " 对照品溶液配制 " 精密称取乙醇 5A 222)， 用 "#$ 稀释至 522A 2?+ （ 对照品贮备液） ， 取 5A 2?+ 对照品贮备液及 5A 2?+ 内标贮备液， 用 "#$ 稀释至 522A 2?+， 作为对照品溶液。 #$ !$ #$ % " 样品溶液配制： 精密称取样品 2A 622)， 用内标溶液稀释至 52A 2?+。 #$ !$ % " 系统适用 性 试 验 " 分 别 将 正 己 烷、 乙 醇、 "#$ 和乙酸用水作 溶 剂 制 成 一 定 浓 度 的 溶 液， 进 样， 结果见表 5 。各成分之间无干扰。 表 5! 各成分的保留时间 DEF 5 G,HIJK.*I- IL ,M,GN *-)G,O*,-.
!" #$% 样品的含量测定 按上述方法测定三批样品中阿魏酸含量， 结果 批号为 $(($(/ ， $(($(0 ， $(($(" 的含量 （ +, 1 , ） 分别 为 (# -/ ， (# -$ ， (# /! 。 &% 讨论 &" #% 在供试品溶液的制备过程中， 为保证样品中阿 魏酸充分提取， 杂质尽可能少， 采用同一批样品分别 对提取溶剂、 方法进行了试验， 比较了以甲醇、 (% 冰 醋酸甲 醇、 甲醇 2 甲酸 （ !0 ： 0） 、 乙酸乙酯 2 甲酸 （ !0 ： 0） 为溶剂的超声处理和回流的方法， 以及乙醚 为溶剂的萃取方法。结果表明乙醚萃取的方法不仅 测得的阿魏酸含量高， 且可将大部分杂质除去， 供试
#$ !$ &" 线 性 试 验 " 取 对 照 品 贮 备 液 62A 2?+， 用 "#$ 稀 释 至 522A 2?+， 分 别 精 密 量 取 2A 68?+、 2A 8?+、 5A 8?+、 6A 8?+、 8A 2?+、 /A 2?+ 与 3A 8?+ 分 别置 522?+ 的 量 瓶 中， 分别加入内标贮备液 5A 2?+， 用 "#$ 稀释 至 刻 度， 分 别 连 续 检 测 4 次。 结果： 线性方程： ! P 2A 251 4 Q 2A 255 6 " ， # $ 2A 111 0 。其中， ! 为乙醇与内标物的峰面积之比； " 为乙
/2 C B ?*-
。 醇测定浓度 （ 单位 !) B ?+） #$ !$ ’" 回收率 #$ !$ ’$ ! " 内标溶液配制 " 取内标贮备液 8A 2?+， 置 82?+ 量瓶中， 用 "#$ 稀释至刻度， 即得。 #$ !$ ’$ #" #$ !$ ’$ % " 得。 #$ !$ ’$ &" 测定法" 分别精密量取对照溶液 5A 5?+、 5A /?+、 6A 2?+ 各三分， 分别置 52?+ 的量瓶中， 分别 加入内标溶液 5A 2?+ 及样品溶液 8A 2?+， 用 "#$ 稀释至刻度， 作为加样回收率测定溶液。结果平均 回收率为 522A 00R （ % P 1） （ &’( P 6A 70R ） ， 见表 6 。 #$ !$ ( " 定量限和最低检测限 " 将对照品溶液分别 用 "#$ 稀释至一定浓度， 分别进样三次， 计算信噪 比。结果， 当浓度为 /A 38 !) B ?+ 时， 信噪比为 55A 0 （ +=S ） ； 当 浓 度 为 6A 24 !) B ?+ 时， 信 噪 比 为 4A 4 （ +="） 。 #$ !$ )" 样品测定 " 取 6A 5A 6A 4 样品溶液， 照上述 表 6!
万方数据
48/
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
DT, 9IKG-EJ IL WTEG?EX,K.*XEJ WGEX.*X, VIJY 65 6224 <IY /
! ! 三氯苯达唑为一肠蠕动药， 制备工艺中用到了 乙醇、 "#$ 和乙酸， 根据 %&’ 注册要求， 需对三种残 留溶剂准确定量并作方法学研究。应用内标法测 定， 由于溶剂与待测主分之间存在互相干扰， 无法在 一个系统中同时检测， 故我们采用两个系统。 !" 仪器与试药 ()*+,-. /012 气相色谱仪； ()*+,-. 3104 自动进 样仪； 甲醇、 "#$、 正己烷为色谱纯； 乙醇、 乙酸、 氯苯 为 分 析 纯；三 氯 苯 达 唑（ 25552425 、25552426 、 25552424 、 25552727 、 25552728 ） #" 实验与结果 测定色谱条件： 色谱柱： 9:; %<<=;(> 毛细管 柱 （ 42? @ 2A 46?? @ 2A 68 !? ） ； 检测器： $%"； 载气： ’,； 分流比： 522 #$ !" 5； 柱流量： 5A 2?+ B ?*- ， 恒流； 进 样量： 8 !+； 进样口温度： 682C ； 检测器温度： 682C 。 乙醇残留量测定
溶媒 保留时间 （ ?*-） 正己烷 4A 5 乙醇 8A 2 "#$ 1A 5 后 乙酸 "#$ 后
色谱条件测定， 结果见表 6 。 样品测定结果 （ % P 4） DEF 6 DT, G,HKJ. IL HE?UJ, O,.,G?*-E.*I25552425 25552426 25552424 2A 204 5A 7 2A 206 5A 2 2A 208 6A 7 25552727 2A 218 6A / 25552728 2A 200 2A 7 乙醇R &VR
品溶液颜色最浅， 有利于对色谱柱的保护。 &" !% 阿魏酸为有机酸类化合物， 在酸性条件下较稳 定。实验表明， 用 (% 冰醋酸甲醇溶液配制的阿魏 酸对照品溶液， 置棕色瓶中低温保存比用纯甲醇同 法放置的溶液更稳定。 参考文献：
［(］ ) 王映芬3 复方偏头痛冲剂主要成份当归川芎中阿魏酸的含量 测定 ［ 4］ 3 北京医科大学学报， (!!. ， /* （-） ： /("# ［/ ］ ) 5678 测定逍遥散及当归中阿魏酸的含量， 中成药，/$$$ ， // （0） ： -.-# ［-］ ) 彭中芳3 高效液相色谱法测定华佗再造丸中阿魏酸含量 ［ 4］ 3 中药材， /$$( ， /. （0） ： -*(# 收稿日期： /$$- 2 ($ 2 /"
’()*+, -(./01 +2 3452)/)1 +0 +.652/7 8+9-(2)8 .(:5/2/26
5=: 4DEFGD， H5I:J JKLF,EM, （ HNOPDEM, 9MQRDRKRO SLT ATK, 8LMRTLU ， 5EM,VNLK -($$$. ，8NDME） ;<=>?;@>% A<BC@>DEC：WL OQREXUDQN E J8 +ORNLY SLT RNO YOROT+DMERDLM LS LT,EMDZ QLU[OMRQ TO+EDMDM,3 ’C>FAG=：WNO +ORNLYQ \EQ E]]TL[OY XG ND,N OSSDZDOMZG ZNUL+ERL,TE+ ZLUK+M LS 9::;<=> （ -$+ ? $# -/++ ? ， \DRN E YOROZRLT LS @9A KQDM, YDTOZR DMPOZRDLM3 ?C=HI>=： WNOTO DQ ML DMROTSOTO LS O[OTG ZL+]LMOMR XOF $# /0 !+） R\OOM ORNEMLU ， AB@， EZORDZ EZDY，DMQDYO QREMYETY EMY QLU[OM# WNO TOQLUKRDLM EMY QOMQDRD[DRG \OTO EZZO]REXUO# WNO YOF ROZRDLM UD+DR LS RNO RNTOO ZL+]LMOMRQ \OTO /# $- !, 1 +7， /# /( !, 1 +7， -# ’0 !, 1 +7 TOQ]OZRD[OUG# @AJ@IH=DAJ=： WNDQ +ORNLY DQ EZZKTERO RL ZLMRTLU RNO LT,EMDZ QLU[OMRQ TO+EDMDM,# KCL MA?G= ) J8 ； ^KEMRDRG LS LT,EMDZ QLU[OMRQ；TO+EDMDM,
#$ # "
"#$ 与乙酸残留量测定
52 C B ?*/2 C B ?*-
#$ #$ ! " 色谱柱程序升温方法 02C ， 0?*- $ 6?*- $ 7?*$ $ $#572C ， $ $ $#622C ， #$ #$ # " 溶液配制 #$ #$ #$ ! " 内标溶液配制 " 精密称取氯苯 2A 682)， 用甲醇稀释至 522A 2?+ （ 内标贮备液） ， 取 5A 2?+ 内 标贮备液， 用甲醇稀释至 522A 2?+， 作为内标溶液。 #$ #$ #$ # " 对 照 品 溶 液 配 制：精 密 称 取 "#$ 2A 653 8)与乙酸 5A 680)， 用甲醇稀释至 522A 2?+ （对 照品贮备液） ， 取 5A 2?+ 对照品贮备液及 5A 2?+ 内 标贮备液， 用甲醇稀释至 522A 2?+， 作为对照品溶 液。 #$ #$ #$ % " 样品溶液配制 " 精密称取样品 2A 622)， 用内标溶液稀释至 52A 2?+。 #$ #$ % " 系统适用性 " 分别将甲醇、 乙醇、 "#$、 氯 苯和乙酸用水作溶剂制成一定浓度的溶液， 进样， 结 果见表 4 。各成分之间无干扰。
万方数据
药学实践杂志 ?::! 年第 ?= 卷第 ; 期
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表 !" 各成分的保留时间 #$% ! &’()*+,-). )/ ’0’&1 -.2&’3-’.,
溶媒 甲醇 乙醇 氯苯 ;9 < 乙酸 =:9 > 456 =?9 @ 89 : 保留时间 （ 7-.） （ 少于） 89 :（ 少于）